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1、word实验一 药酶诱导剂与抑制剂对戊巴比妥钠催眠作用的影响【目的】以戊巴比妥钠催眠时间作为肝药酶体活性指标，观察苯巴比妥与氯霉素对戊巴比妥钠催眠作用的影响，从而了解它们对肝药酶的诱导与抑制作用。【原理】苯巴比妥为肝药酶诱导剂，可诱导肝药酶活性，使戊巴比妥钠在肝微粒体的氧化代加速，药物浓度降低，表现为戊巴比妥钠药理作用减弱，即催眠潜伏期延长，睡眠持续时间缩短。而氯霉素如此为肝药酶抑制剂，能抑制肝药酶活性，导致戊巴比妥钠药理作用增强，即催眠潜伏期缩短，睡眠持续时间延长。【动物】小白鼠8只，1822g【药品】生理盐水、0.75%苯巴比妥钠溶液、0.5%氯霉素溶液、0.5%戊巴比妥钠溶液【器材】天平
2、、鼠笼、秒表、注射器1 ml4、5号针头4【方法与步骤】一、药酶诱导剂对药物作用的影响 1、取小鼠4只，随机分为甲、乙两组。甲组小鼠腹腔注射0.75%苯巴比妥钠溶液0.1 ml/10g，乙组小鼠腹腔注射生理盐水0.1 ml/10g，每天1次，共2天。 2、于第三天，给各小鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥钠溶液0.1 ml/10g，观察给药后小鼠的反响。记录给药时间、翻正反射消失和恢复的时间，计算戊巴比妥钠催眠潜伏期与睡眠持续时间。二、药酶抑制剂对药物作用的影响 1、取小鼠4只，随机分为甲、乙两组。甲组小鼠腹腔注射0.5%氯霉素溶液0.1 ml/10g；乙组小鼠腹腔注射生理盐水0.1 ml/10g。
3、2、30分钟后，给各小鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥钠溶液0.1 ml/10g，观察给药后小鼠的反响。记录给药时间、翻正反射消失和恢复的时间，计算戊巴比妥钠催眠潜伏期与睡眠持续时间。【统计与处理】以全班结果睡眠持续时间，分作分组t检验，检验用药组与对照组有无显著性差异。参见“数理统计在药理学实验中的应用【须知事项】 1、催眠潜伏期为开始给药到动物翻正反射消失的间隔时间，睡眠持续时间为翻正反射消失至恢复的间隔时间。 2、本实验过程中，室温不宜低于20C，否如此戊巴比妥钠代减慢，使动物不易醒。 3、氯霉素溶液有结晶析出时可在水浴中加热溶解。 4、吸取氯霉素溶液的注射器应预先枯燥，否如此易结晶堵塞针头。
4、【思考题】 1、何谓肝药酶诱导剂与抑制剂？ 2、试从理论上解释苯巴比妥与氯霉素对戊巴比妥钠睡眠时间的影响。实验二 家兔血浆中水酸钠浓度测定和药代动力学参数测定【实验目的】1. 以水酸钠为例了解血浆药物浓度随时间变化的时量关系。2. 了解药代动力学参数的临床意义。【实验材料】1. 动物：家兔1只，雌雄不限，体重+kg。2. 器材：试管5支、离心管3支、试管架、小玻棒、l0ml吸管、注射器(1 ml、5ml、l0ml)、手术器械、动脉插管、动脉夹、721分光光度计、离心机3. 试剂和药品：25%氨基甲酸乙酯、10%与0.02%水酸钠溶液、10%三氯醋酸溶液、10%三氯化铁溶液。【实验步骤】1.实验
5、准备： 取离心管3支与试管5支，编号备用，麻醉乌拉坦4ml/Kg，13号离心管与4、5号试管中分别参加10%三氯醋酸7ml2.手术： 颈动脉取血2ml,放入1号离心管3.给药： 耳缘静脉注入10%水酸钠，150mg/Kg，取血5,35min分别取血2ml放入2、3号离心管，4、5试管分别参加蒸馏水与0.02%水酸钠2ml4.离心： 2000r/分，5min，取上清液6ml，参加10%三氯化铁12滴，比色5min后，波长510nm，计算结果。【须知事项】1.注意颈总动脉插管术。2取血时，要先用0.1%肝素润湿注射器和针头，取血后用肝素封管，防止血液凝固，每次取出血第1ml弃去不用，再吸取2ml置
6、于离心管。3.给药时间与给药后取血时间要记清。4.取上清夜时，要先将上清液倒入编号相对应的试管中，再吸取所需的ml数，以免吸入沉淀影响比色，注意吸管要对号使用。5.计算Vd, CL时注意单位换算。【实验结果】管号 光密度X 水酸钠浓度Yg/100ml给药后5min2号 X1 C1给药后35min3号 X2 C2计算：1、 半衰期t1/2:K=y/xC1=kx1,C2=kx2(单位:g/100ml)t1/2= 单位：min注:k为去除速率常数，y为0.02g/100m1,x为标准管即5号管的光密度值;C1, C2分别为给药后5、35分钟取血时的血药浓度;t为两次取血的时间差。2、 表观分布容积V
7、d：C0=C1lg-1t1/t1/2)(单位：g/100ml)Vd=D0/C0单位：L/Kg注：D0为用药初始剂量150mg/Kg，t1为用药后到第一次取血的时间间隔3、 去除率CL：1/2Vd单位：ml/min.Kg实验三 氨茶碱的血药浓度测定与药动学研究【实验目的】掌握血清中氨茶碱血药浓度的紫外测定法，掌握血清中茶碱提取法，验证氨茶碱的动力学模型，掌握二房室动力学模型的参数计算方法。用有机溶剂将血清中的氨茶碱提出，用紫外测定法根据标准曲线测出氨茶碱浓度，用残差法运用计算机进展数据处理、曲线描绘与参数计算，从而验证氨茶碱动力学模型，使大家对药动学研究有一初步的了解。【实验原理】1. 氨茶碱为
8、临床常用平喘药，由茶碱与乙二胺缩合而成。在酸性条件下,可用有机溶剂从血清中提取出茶碱,再用碱液将茶碱从有机溶剂中提出。测量274和298处的吸光度A274为茶碱和本底，即溶剂、血清的吸光度，A298为本底的吸光度，A= A274-A298。2. 氨茶碱经静脉进入血液，随血液循环进展组织分布，达到平衡后转入消除相。时量曲线呈二房室动力学模型。3. 房室模型是抽象的数学模型，它的划分与解剖学部位或生理学功能无关。药物转运速率一样或相近的部位可划分为同一房室。房室模型可以分为一室模型、二室模型、多室模型。大多数药物在体的转运和分布符合二室模型。即药物静脉注射入血后，首先快速进入血流量大的组织，如心、
9、肝、肾、肺、脑等，然后缓慢地向血流量小的组织，如脂肪组织、静止的肌肉组织等转移。【实验材料】1、动物 家兔1只，雌雄不限，体重+kg 2、药品氨茶碱标准液3、试剂异丙醇：氯仿抽提液5:95。4、仪器754型紫外分光光度计液体涡旋混和器数学坐标纸一半对数坐标纸一。【实验方法】1 动物实验局部1.1取健康家兔1只，称重，将家兔置于兔台。1.2 在家兔一耳缘注射部位去毛、热敷和消毒，待血管扩后，以左手拇指与食指压住静脉耳根端，使静脉充盈，给药前用12号针头自耳静脉取血1-1.5ml，7号针头平行刺入静脉，抽动针管，见有回血即可推注。对其静脉注射氨茶碱15mg/kg。1.3另一耳用锐利刀片切割取血。分
10、别在给氨茶碱后5、10、20、30、60、120、180、300、420min取血。1.4别离血清，各管均取血清0.5ml于15ml试管中，加0.1mol/L盐酸0.2ml、抽提液5ml，振摇混合，2500r/min离心10min。2 血药浓度测定紫外分光光度法2.1 吸取下层氯仿液4ml置另一试管中，参加0.1mol/L NaOH溶液4ml，振摇混匀，2500r/min离心10min。2.2吸取上层碱液，以0.1mol/L NaOH溶液4ml作参比，振摇混匀，2500r/min离心10min。测定其在274和298处的吸收度A274和A298，计算A。3 制作茶碱标准曲线：取5支试管，依次参
11、加茶碱标准液20、40、60、80、100g/ml，测定各管的A274和A298，计算A。以茶碱浓度为横坐标，A为纵坐标描点绘图，用Excel软件求直线回归方程，即为茶碱标准曲线的直线方程图示。4. 将测得血清样品的A代入标准曲线的方程，求得相应的C，C10即为茶碱的血药浓度。以时间为横坐标，浓度对数为纵坐标，用CAPP软件描点做图，判断氨茶碱在体代的房室模型。时间minACg/ml血药浓度g/ml510203060120240480【须知事项】1.紫外分光光度计使用前需预热30min并激发氢灯。2.振摇混匀药液时防止溅出并准确加样。 3.样品离心前需配平。 4.测量时假如更换波长，必须重新调
12、节0和100。【讨 论】1.氨茶碱的时量曲线呈几房室模型？为什么？ 2.为何要测两个波长下茶碱的吸光度并取其差值？ 3.试述药动学参数V1、Vd、t1/2、t1/2、K10、K12、K21、Cl、AUC的含义。实验四 体液pH对水酸钠排泄的影响【实验目的】 1学习尿液中水酸的检测方法，掌握体液pH对药物排泄的影响与其临床意义。 2熟悉大鼠代笼的使用，巩固大鼠的各种给药方法。 【实验原理】 水酸钠经肾脏排泄物为水酸，尿液pH对水酸排泄影响非常大，当尿液呈酸性时仅排泄5%而尿液呈碱性时如此排泄大约85%。尿液中的水酸遇到三氯化铁后可生成紫色络合物，根据反响后溶液紫色深浅可以定性分析水酸钠排泄量的多
13、少。【实验材料】1动物 大白鼠，雌雄不限，200300g。2器材 大白鼠代笼两个，天平一个，棉手套一只，大鼠灌胃器两个，5毫升注射器两个，6号针头两个，30ml量筒1个，50ml注射器2个。 3药品 5%碳酸氢钠溶液，15%氯化氨溶液，单盲法配制并编号为A、B，2%水酸钠溶液，1%三氯化铁溶液，5%葡萄糖生理盐水，蒸馏水，苦味酸，1%速尿。【实验方法】1取大白鼠两只称重并编号。2给其中一只按0.5ml/100g灌胃A药液，给另一只以同样剂量灌胃B药液。330分钟后给两只大鼠灌胃5%葡萄糖生理盐水2ml/100g。430分钟后，分别给两只大鼠腹腔注射2%水酸钠溶液1ml/100g与1%速尿0.2
14、ml/100g。5 收集各鼠30分钟尿液，将收集的尿液分别用蒸馏水稀释到30ml，加1%三氯化铁 5ml，比拟紫色深浅。【实验结果】表2-1 体液pH值对水酸钠排泄的影响鼠号 体重(g) 药物 尿液反响后颜色 结果分析12 A B【须知事项】1实验步骤进展到4后，再将集尿笼插入代笼中，以免收集尿液前将集尿笼污染。2实验用烧杯、量筒、注射器、集尿笼应清洗干净，否如此影响反响pH，导致实验结果不准确。【思考题】1. 药物的排泄途径有哪些？影响药物排泄的因素有哪些？2. 体液pH还对药物的哪些体过程有影响？有何临床意义？3. 实验中给予碳酸氢钠、氯化氨、葡萄糖生理盐水、速尿等药物的目的各是什么？4.
15、 根据反响后溶液紫色深浅为什么可以定性分析水酸钠排泄量的多少？写出水酸与三氯化铁的反响式。实验五 酚磺酞药代动力学参数的测定【实验目的】 测定PSP在家兔体药代动力学参数。【实验原理】 酚磺酞Phenolsulfonphthalein，PSP，又名酚红。静脉注射后，不在体代，主要经肾近曲小管分泌排泄，属于一室模型一级动力学消除。PSP在碱性环境中变为红色，可用可见分光光度计于波长560 nm处进展定量测定。【实验材料】1、动物 家兔1只，2.53.0 kg，雌雄不限 2、药品 0.6%PSP溶液、PSP标准溶液0.5、1、2mol/L、3%戊巴比妥溶液、稀释液0.9% NaCl 29 ml +
16、 1 mol/L NaOH 1ml3、器材兔台、手术剪刀2、止血钳2、眼科镊子2、注射器5 ml1、2 ml1、抗凝试管5、试管架、离心机、分光光度计、比色杯0.5 ml5、加液器1 ml1，250l1、烧杯、酒精棉球、干棉球、绳4、线【实验步骤】1、家兔称重，用3戊巴比妥1 ml/kg耳缘静脉麻醉，仰卧，固定于兔板上，切开颈部皮肤，暴露颈浅静脉，从其下缘穿一线，备取血时用。 2、用1ml枯燥注射器从颈浅静脉取血约1 ml，然后由耳缘静脉注射0.6PSP溶液，按0.4 ml/kg给药，注射后分别在5、10、15、25分钟各取血约1 ml，置于备好的抗凝试管，离心2000转/分10分钟。 3、P
17、SP标准液的平均吸收系数K的测定：取PSP标准液0.5、1、2mol/L与蒸馏水各1.55 ml，再各参加1 mol/L NaOH 0.05 ml，于波长560 nm处比色，测得吸收度A，并计算出平均吸收系数K值。 4、取血浆样品0.1 ml，放入0.5 cm的比色杯，参加稀释液1.5 ml摇匀稀释了16倍，于560nm处比色，记录其吸收度。5、PSP血浆浓度计算： PSP的分子量为354，比色时取血浆0.1ml，稀释了16倍 6、药代动力学参数计算：（1） 计算5、10、15与25分钟时PSP的血浆浓度Ct（2） 以时间t与血浆浓度Ct进展直线回归，求出a、b、r值（3） 计算药代动力学参数：消除速率常数Kemin-1，血浆半衰期t1/2min，表观分布容积VdLkg-1，总去除率ClLkg-1min-1。计算公式如下：【须知事项】 1、本实验系定量实验，故每次采血或给药量一定要准确。每次取血样时均应用干净的取样器，以防止各样品之间浓度混杂。 2、顺利地采集足够量的血样是保证本实验成功的关键，故应具备娴熟的采血技术。11 / 11
