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1、基本原理：昆虫在取食正常食物的同时将药剂摄入消化道，经肠壁细胞汲取进入血液，随血液循环到达作用部位而使昆虫中毒。它采用昆虫的贪食性，因此要尽量避开药剂与昆虫体壁接触而产生其它毒杀作用。测定方法有（1）液滴饲喂法；（2）口腔注射法;（3）叶片夹毒法。一、叶片夹毒法基本原理：在两叶片中间匀称地夹入肯定量的杀虫剂，饲喂目标昆虫，药剂随叶片被昆虫取食，然后由被吞食的叶片面积，计算出吞食的药量。优点是可以削减目标昆虫与杀虫剂的接触，避开发生触杀作用，操作便利，结果比较精确。叶片夹毒法只适用于植食性的，取食量大的咀嚼口器目标昆虫，如粘虫、蝗虫.玉米螟等。1、试验材料：药剂：90%敌百虫溶剂：丙酮试虫：菜青
2、虫或斜纹夜娥幼虫：3050头用具：培育皿3050个，木塞钻（口径2cm）,微量注射器10微升1支，浆糊或明胶生物材料：甘蓝叶、翅麻叶等。2、试验方法：用木塞钻制成直径2cm的圆心叶片60片，把圆叶片放在潮湿的培育皿中待用。夹毒叶的制备：用丙酮将敌百虫稀释成有效成分为0.筮的药液，用微量注射器吸敌百虫丙酮液10微升，匀称滴在叶片上，计算出每张圆叶片药量（mg厘米2）。用浆糊（或明胶）涂在无药的圆叶片上，两相对合，即成夹毒叶片，同时制备不夹毒叶片24片作对比。每培育皿中放一片，另放一团湿棉花或湿水草纸一小块保湿，然后编号。采回的试虫先饥饿数小时，每头虫称重，每培育皿放一头虫，饲喂夹毒叶片。3、结果
3、观看及计算：观看试虫取食状况，掌握食叶量一部份虫食叶片1/3,一部分虫食叶片1/2,一部分食叶片3/4或全部叶片。然后取出剩余的夹毒叶片，饲喂新奇叶片，经3-24小时后，检查死亡率。食量的计算：将剩余的叶片放在直径2cm的方格纸上，计数被吃去的方格数（1亳米/I格），然后按每张圆叶片上的总药量，计算每一方格的剂量，即可求出取食药量。从而求得每头虫单位体重所取食的剂量（mg或微g/g体重）。致死中量的计算：按每头虫食剂量的大小挨次排列。将供试昆虫分为三组（1）生存组；（2）中间组（有生存的，也有死亡的）；（3）死亡组；在计算LDw时只用中间组，所以设计浓度时，生存组和死亡组反应试虫数目越少越好。
4、中间组又分生存部分和死亡部分。2（中间组活虫剂量）Z件间组死虫剂圜A=中间组活虫总数B=中间组死虫总数A+8致死中量（LDso）=2（单位：mg或微g/g体重）药剂对昆虫的剂一反应纪录表试验报告：写出供试药剂对供试昆虫剂量反应的试验报告。试验八杀虫剂内吸作用毒力测定基本原理:将药剂接触到植物的某一部分（如根、茎、叶、种子），药剂可渗入植物体内，并随体液传导到全株或植株的某一部分，在肯定时间内，让昆由取食没有直接用药的植物组织，观看其致毒反应。本试验采纳包扎法和药液培育法，目的是通过试验了解药剂的内吸性能并初步把握内吸杀虫剂的测定原理及方法。试验材料:供试昆虫：花生蛇虫：供试植物：花生苗供试药剂
5、：50%乐果EC,25%螟蛉畏EC,50%杀螟松EC用具：烧坏（250ml）,试管（2X180）,移液管，试管架、药棉、塑料布、剪刀、纸套等。试验方法：药剂配制：将三种供试药剂配成有效含量为0.5%的乳液各50mlo内吸测定方法：1、涂抹包扎法：选择生长发育全都，叶片带蜥量较全都（20-25头）的花生苗12株，每株在颈部包扎一圈脱脂棉，用移液管吸取上述药液0.2ml滴于脱脂棉上。外部用塑料布缠绕后，用线结扎，防止药剂蒸汽挥发，每一药剂重复三次，每处理一株，对比用清水、重复三次，将已施药的花生苗用纸袋套住，插在盛有清水的试管中，排列在试管架上，各处理间不要接触，24小时后解开纸袋，统计蜥虫平均死
6、亡率，比较各药剂的内吸毒效。2、药液培育法：先将供试药配成IOPPnl水溶液，分别注入试管内，每管20ml,对比用清水,重复三次,挑取生长发育全都,叶片带场量较全都（2025头）的花生苗12株，插入液面IOCm处，精确计算苗上蛛虫的数目后，用纸套住，24小时后统计平均死亡率。试验报告：将试验结果整理成表，并比较几种药剂的内吸作用，推断哪种药剂不是内吸剂。试验九杀虫剂熏蒸作用毒力测定基本原理：在适当气温下，采用有毒的气体、液体或固体挥发产生的蒸气毒杀害虫（或病菌），称为熏蒸。熏蒸时，毒剂主要以气态从昆虫的气门进入气管，再分布到全身的气管，然后到达神经作用部位.因此测定熏蒸毒力的装置都必需基于同一
7、原则，即试虫在一密闭容器中不能和固态或液态的毒剂直接接触。毒剂只能以气态和试虫接触。常见熏蒸作用的测定方法有二重皿法、干燥器法、广口瓶法、药纸熏蒸法和三角瓶法：试验材料：供试药剂；（1）50%敌敌畏EC、（2）50%马拉硫磷EC,（3）90%敌百虫结晶。试应；赤拟谷盗用具：培育皿12个，干燥器4个，移液管0.2ml13支，滤纸、量筒、烧杯、纱布等。试验方法：1、二重皿熏蒸法：虫上皿纱布药 一下皿药剂配制：每组试验药剂稀释成有效成分含量0.5%药液，各20ml（用水稀释）。处理；在培育皿底内加入5d供试药液，皿口盖纱布或纱网盖1张，将试虫20-30头放在纱布或纱网上，再盖相同口径的培育皿底，使其
8、密闭对合（如图），各药剂重复3次，对比用清水，半小时、1小时、5小时后，观看计算平均死亡率。2、干燥器熏蒸法：取供试虫60头分放三个小烧杯中，杯口用纱布扎紧（三个重复）放在干燥器磁板上，再将供试药剂稀释成有成分含量为0.1%药液20ml,放入干燥器底部，对比用清水，盖好干燥器盖，肯定时间后，在通风处快速取出试虫，统计死亡率。3、广口瓶法：用两个广口瓶（250ml）,在一个广口瓶中放入肯定数量的目标昆虫，另一个广口瓶中放入定量药剂，用橡皮塞和多个玻璃管把广口瓶连接，震荡，使药剂挥发，气体匀称分散，作用肯定时间后，将目标昆虫移入洁净器皿中，放入新奇饲料，盖上纱布，规定时间内观看目标昆虫的中毒死亡状
9、况。4、药纸熏蒸法：在三角瓶（50（MOoomD的瓶塞上，用大头针固定0.5-1.Ocm的滤纸片，在滤纸片上滴加l-2ul的敌敌畏原油或其他,熏蒸剂，然后将麻醉的家蝇放入瓶内，盖上瓶塞，25C温度下，肯定时间后，观看试虫的击倒中毒反应。5、三角瓶法：在三角瓶底部放入含有肯定量熏蒸剂的滤纸片（44cm）,用纱布袋包肯定数量的试虫，然后，把布袋固定在瓶塞上，让布袋悬挂在三角瓶中，25温度下，肯定时间后，观看试虫的中毒和死亡状况。试验报告：列表纪录试验结果，比较各种药剂的毒力并分析哪种供试药剂没有重蒸作用第四部分除草剂生物测定除草剂的生物测定技术是指采用生物体（主要指有害生物）对除草剂的反应，来测定
10、除草剂的毒性及效果的基本方法，是进展除草剂生产和使用不行缺少的工作，是讨论除草剂特性的重要手段，也是水中、土壤中残留除草剂分析的有用工具。试验十九种子萌发鉴定指示植物的种子（常用黄瓜、高粱、燕麦）在药剂处理过的砂土内萌发，一般不以萌发率作为评判指标，而是在萌发后肯定时间内测定根和茎的长度，并以此作评判标准。激素型除草剂，如2,4-D类，一般采纳这种方法。在肯定范围内，根和茎的伸长和除草剂的浓度呈相关性，因而可用作除草剂的定量测定，灵敏度较高。属于这类的测定方法如下：1、除草剂培育皿法培育皿法简洁易行。国内大多采纳琼脂、土、砂、滤纸为培育基质，用敏感植物的根长抑制率或芽长抑制率与药剂浓度进行回归
11、，从而测出药剂的EC50。试验中发觉培育皿测定土壤处理剂较为合适，但对茎叶处理剂的测定结果与田间试验结果有较大的差异。本试验通过用培育皿法测定土壤处理剂的活性。试验材料培育皿、滤纸、稗草种子、保鲜膜、光照培育箱、乙草胺试验方法1、 将稗草种子催芽34d,待稗草种子露白后备用。2、 把甲草胺用水按系列浓度稀释法，稀释成6个不同浓度的药液。3、 在铺有一张圆滤纸、直径为9cm的培育皿中加入各个浓度的待测药液5m1o4、 精选整齐刚露白的稗草种子8粒于培育皿中,盖好保鲜膜。每个处理重复3次。5、 将培育皿放入LRH-250G型光照培育箱（广东省医疗器械厂）,在27下培育4do6、 用空白作对比。结果
12、整理用直尺测量稗草的芽长，精确到毫米。对照组芽（根）长-处理组芽（根）长0抑制率（%）=对照组芽（根）长试验报告：纪录试验结果，完成试验报告。求出抑制率，并计算EC5002、黄瓜幼苗形态法黄瓜幼苗形态法是测定激素型除草剂和植物生长调整剂活性的经典方法。测定原理是以不同剂量的药剂所引起黄瓜幼苗形态上的不同变化来测定样品活性。该法具有操作简洁，灵敏度高（可测出0.05PPm）的特点。将样品配成一系列浓度的丙酮溶液，用直径IlCm的滤纸在其中浸透，取出吹干，放入直径12Cm的培育皿中，再在滤纸上铺二张同样大小的未浸药的滤纸。选择饱满度全都黄瓜种子，在5%的漂白粉液中消毒半小时，取出晾干，每皿排放20
13、粒，并加入12ml蒸储水（据该方法建立者SUdi测定，此时皿内样品的实际浓度比原来浸滤纸时降低10倍），盖好皿盖，置25C恒温下黑暗培育6天，取出观看黄瓜幼苗的形态。将2,4-D的一系列浓度下黄瓜幼苗形态画成“标准图谱”（就象化学分析中的标准曲线一样），然后用测定样品的黄瓜幼苗形态去和标准图谱对比，就可确定2,4-D类除草剂的含量或比较待测样品的除草活性大小。3、高粱法（皿内法）高粱法适合于非光合作用抑制剂的生物测定。它具有操作简便、培育期间不用管理、周期短，测定范围广，重现性好等优点，因而被国内外很多试验室采纳。先将高粱种子放在湿滤纸上，24C温度下萌发1520h,待长出胚芽l2mm时取用。
14、配制一系列浓度的待测样品溶液，将16mm某浓度的样品溶液放入124g石英砂中，认真拌均。将此湿的石英砂装入9cm直径的培育皿中，刮平使与皿边对齐。选10粒预备好的萌动高粱种子，排列于砂表面，胚部向上而幼根沿同一方向排成一行，盖上皿中,将培育皿直立倾斜15度放入24C温箱,黑暗中经1618h,将根尖的位置用蜡笔标于皿盖上,经过24h,取出培育皿,从标记处测量根延长的长度,精确到毫米。上海植物生理所对此法作了些改进：用直径9cm的培育皿，装满干燥黄砂，刮平，每皿加入30ml药液，正好使全皿干砂浸透，然后用有10个齿的“齿板”在皿的适当位置轻轻压出10个小坑，以便每皿能排10粒根长12cm（选用根尖
15、尚未长出根鞘者）的萌发高粱种子。为了缩短时间，在排种培育的前1天，让上述预备好的培育皿，置于34C保温过夜，使砂温提高，8h后即可划道标记幼根起点，再过1476小时，待对比根长30mm左右即可测量。吴文君采纳小麦种子代替高粱，亦取得满足结果，但对2,4-D类除草剂来说，小麦不如高粱敏感，其灵敏度比高粱差1个数量级。4、小麦根长法在直径为9cm的培育皿内铺满一层小玻璃球（直径为0.5cm）,移入IOml不同浓度的待测药液，放入10粒露白的小麦种子，重复三次，以蒸馀水为对比，在2025C培育箱中培育57d后取出，测量根长，计算抑制率和IC50值。本法可用来比较杀单子叶杂草的除草剂间的活力，如叙乐灵
16、、除草通、绿麦隆等。5、稗草胚轴法在50ml烧杯中，加入5ml不同浓度的除草剂溶液，放入10粒发芽整齐、大小全都的稗草籽，在种子四周撒些洁净石英砂，以防幼苗浮起。以蒸储水为对比，重复3次，置于28.30C恒温箱中培育，4d后测定稗草胚轴长度，计算IC50。本法适于测定氯乙酰胺类除草剂，如甲草胺、异丙甲草胺等，灵敏度可达0.0IppmO6、玉米法选取玉米种子在20C下黑暗催芽48h,得胚根长达15mm时，选匀称全都的种子，放人装有含除草剂土样的烧杯或培育皿中，保持相宜湿度，在20下暗处培育5d后取出，测定根长。以系列标准浓度除草剂处理得到的根长制出标准曲线，将样品处理过的玉米所测结果与之比较，可测出样品中除草剂含量，灵敏度可达O.OOlug/g土壤，此外，也可以用玉米根鲜重或干重为指标进行测定。本法用来测定嗪草隆（Glean）等。7、琼脂测定法：该法在40年月末提出，国内80年月才有报道，90年月才有采纳。琼脂测定法适用于酰胺类，二硝基苯胺类，氨基甲酸脂类,均三氮苯类等多种除草剂的测定，也可用于农药混用试验。方法：将药剂定量地混入溶化的琼脂液中，倒入试管或培育皿中，待其凝固后再播入供试植物的种子，生长到肯定程度后再测定。该法的伏点是以琼脂代替土壤，既可与药剂匀称混合，又可起到固定供植物的作用。
