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1、输血科微柱凝胶法交叉配血试验标准操作规程1目的建立微柱凝胶抗人球蛋白检测卡交叉配血试验标准操作规程,确保微柱凝胶抗人球蛋白检测卡交叉配血试验操作的准确性和规范性。2原理微柱凝胶卡采用分子排阻层析原理在微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶颗粒中，而未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。3适用范围适用于建立微柱凝胶抗人球蛋白检测卡交叉配血试验4操作程序4.1 试剂：4.1.1 0.9%生理盐水；4.1.2 微柱凝胶抗人球蛋白交叉配血试验检测卡4.2 器材：4.2.1 LDZ4-1.2台式普通离
2、心机4.2.2 微柱凝胶法专用孵育箱：FYQ型免疫微柱孵育器4.2.3 微柱凝胶法专用离心分离机：TD-3A型血型血清学离心机4.2.4 IOU1、50Ul的微量移液器。4.2.5 玻璃或塑料试管（IOXI2mm或12X15mm）4.2.6 一次性枪头4.3 样本要求：抗凝全血3ml,本实验室为EDTA-K2抗凝。4.4 方法4.4.1选择微柱凝胶抗人球蛋白交叉配血试验检测卡，观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，然后将卡平行至室温（15C-28）,平衡后用TD-3A型血型血清学离心机离心2-3mino做好标记：填写病人姓名、血型和配血日期，去除卡中微柱凝胶管上的密封铝膜。4.4.2制备红细
3、胞悬液：分别将受血者及供血者的抗凝血标本使用LDZ4-1.2台式普通离心机IoOOXg60SeC（3479转/分离心60SeC）,将红细胞吸出后，用0.9%生理盐水稀释成1%的溶液【10UI红细胞沉淀溶于InIIO.9%生理盐水中工取50Ul1%受血者或供血者红细胞悬液加于相应的微管。4.4.3 将已达室温的待检的全血标本使用LDZ4-1.2台式普通离心机离心IOOOXg2-3min（3479转/分离心2-3min）,确保加入反应体系中的血浆不含有任何颗粒性成分，取50UI受血者及供血者血浆加于相应的微管。主反应管：受血者血浆+供血者1%红细胞悬液付反应管：供血者血浆+受血者1%红细胞悬液4.
4、4.4 将卡置于37孵育箱中孵育15min04.4.5 将卡置于TD-3A型血型血清学离心机中离心5mio4.4.6 自身对照：取50Ul1%病人红细胞悬液加于相应的微管，加50Ul病人血清，在37C孵育15min,将卡置于TD-3A型血型血清学离心机中离心。4.5结果判定：100%的红细胞位于柱的底部；土：100%的红细胞位于柱的下1/3；+：80%的红细胞位于柱的下2/3；2 +：80%的红细胞位于柱的上2/3；3 +：80%的红细胞位于柱的上1/3；4 +：红细胞凝集在胶的顶部；DP：底部和顶部均有；H：溶血。4.6注意事项4.6.1 将送检的试验标本即刻离心，仔细检查标本质量，挑出严重
5、溶血、脂血等影响检测结果的标本，及时通知临床科室重新采集，暂不使用的标本置于4冰箱保存。4.6.2 受血者的标本最好是新近抽取的；也可在2-8C储存48小时（如果用血浆的话，补体依赖的溶血反应可能检测不到）。4.6.3 严格遵守推荐的程序，检查仪器设备是否处于良好状态，如有异常应及时调整或报修。4.6.4 仔细检查试剂质量，不可使用变质、过期的试剂。4.6.5 在一些情况下，由于血清中残留的凝块、纤维残渣可能将非凝集的红细胞包裹在胶的顶部，表现为桃色到红色的分层，容易产生假阳性的结果。由于大多数红细胞在柱的底部，可能干扰阴性结果的判定。推荐将血清在37孵育10分钟，离心，再重复试验。4.6.6 完全或部分的溶血应该被认为是阳性结果。5 .参考文献5.1 中华人民共和国卫生部.中国输血技术操作规程-血站部分,天津科技出版社，1997.79-815.2 中华人民共和国卫生部医政司。全国临床检验操作规程.第二版.东南大学出版社997.5.3 长春博得微柱凝胶库姆斯氏卡操作说明书
