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1、人ABO血型反定型标准操作程序【项目名称】人ABO血型反定型【实验用途】用于ABO血型的反定型检测【实验原理】用已知的Al,B,0细胞测定被检查血清中有无相应的抗A或抗B抗体,结合正定型结果判断ABO血型。【样本种类】新鲜血清或血浆,被检者无需特殊准备【仪器和材料】仪器:无特殊专用仪器材料:人ABO血型反定型用红细胞试剂盒,即开即用,无特殊准备试剂主要组成成份:Al型、B型、。型红细胞,葡萄糖,枸椽酸,核甘酸,抗生素等试剂稳定性:原装试剂在28。C避光保存,有效期2个月试剂性能指标:用已注册上市的抗A抗B血型定型试剂和抗H试剂与本试剂盒相应细胞反应达到如下标准:抗血清待检ABO细胞凝集3+抗血
2、清最高稀释度凝集1+抗血清最高稀释度抗AAl8264抗BB8264抗H02原液22试剂稳定性试验:37。C放置24小时,外观、溶血率%、特异性抗原性均符合检定规程要求。【注意事项】、如果在反定型试验中,受检者的血清或血浆与0型红细胞试剂产生阳性反应则需要添加自身对照试验。如果自身对照为阳性,表明是自身冷凝集素导致。如果自身对照为阴性,则表明被检查血清或血浆中可能存在ABo系统以外的其他系统的抗体干扰定型。请按照相关试验方法解决上述定型Q、本品如出现红细胞颜色变成暗紫色或红细胞发生凝集,出现菌落或严重溶血,则不能使用。若开瓶使用时间较长,最好用已注册上市的抗A抗B试剂检测,结果是否与已知血型相符
3、,以防制品污染,变质失效而造成检定错误。【试验步骤】1试管法、取被检者血清(或血浆)各一滴分别加于3支标记好的小试管中;、分别各加1滴ALB、0试剂红细胞;、摇动试管,离心,速度和时间可选以下二种之一;(a)转速1000rPm,时间1分钟;(b)转速340OrPnb时间15秒、先观察是否溶血(溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染),然后轻轻摇晃,使细胞再悬浮起来;、观察凝集状况,并立即记录结果。必要时可借助显微镜。2微量板法(U型板)、在U型板三个孔内分别加入25-3OUl被检查血清(或血浆);、每孔内分别加入与血清等量的Al、B、0试剂红细胞;、混匀(手工振动混匀或机器混匀);、离心,转速200OrPnb时间30秒(650G);注:不同的离心机、不同的微量板所需要的离心条件有所区别,正确实验的结果需要适当的离心,反应板产生清晰的细胞扣及透亮的上清液。、检测溶血情况(溶血可能是阳性结果,或者是细菌污染)。、用振荡仪振荡微量板,振动能使阳性反应出现凝集细胞扣,而若是阴性反应很快则细胞扣消除。、记录结果,亦可使用酶标读标仪,与电脑相连可实现自动化检测。【试验结果的解释】ABO血型表现型反应格局表正定型反定型血型抗A试剂抗B试剂Al细胞B细胞。细胞+A+B+0+AB【试验方法的局限性】本试验必须与正定型一起进行,正反定型不一致须做进一步研究。单独反定型结果不能作为判断血型的依据。