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1、交流：大鼠-PK-取血操作,交流：大鼠-PK-取血操作,交流提纲,实验环境实验材料,动物处理,取血容量时间安排,具体操作,.,血样处理,问题讨论,交流提纲实验环境动物处理取血容量具体操作.血样处理问题讨论大,环境 材料,B 毛细管,0.9mm 100mm，看个人习惯使用，经常一管三断，30mm/管，弃去中间段。,EP 管 加入0.1% 肝素钠 （150U/mg） 0.1 mL，均匀润湿， 50以下干燥；适用 1mL 全血的抗凝，效果良好。 取血时必须提前检查管的质量，标号分组，适当多备。,C 抗凝EP管,D 计时工具,A 通风台面,长时间操作，透气通风 宽敞台面，便于多组多步骤同时操作,Pag
2、e 3,环境 材料B 毛细管 0.9mm 100mm，看个人,Page 4,动物处理,实验期间 ，补充体液 ，目前常规为：取血后灌胃给予等统计生理盐水/葡萄糖溶液。,动物 体重要求 一般 不低于250g,给药前 禁食12-24h，给药前 提前 0.5-1.0h 按0.5-1.0%（V/W）给水,实验之后，外用消炎药涂布眼部,Page 6动物处理 实验期间 ，补充体液 ，目前常,Page 5,容量 时间,注射 一般 呈现 降低 趋势，给药后较短时间内采集的点数适当增加；灌胃 存在Cmax-tmax，需通过考察tmax，根据一般原则，适当调整时间间隔。,取血 容量 时间 安排,选点一般原则,预实验
3、建立,药物性质,给药途径,分布相 3-4个点,吸收相 3-4个点,吸收相 3-4个点,一般12h内取血 不超过动物质量 2.0% （v/w）,每次0.25- 0.5 mL,Page 7容量 时间 注射 一般 呈现 降低 趋势，给,Page 6,大鼠眼眶取血流程,6样品摇匀,1.将大鼠按压在鼠笼上，拇+中+食指固定住头部,3.右手持毛细管从眼内眦部，与鼠面成45 夹角，旋转刺入,2.紧握颈部，压迫颈两侧，使眼突出，眶后静脉丛充血,4.固定身体，压住后肢，放松手指，调整毛细管，流畅出血。,5.取血完成，立即除去颈部压力，将采血器拔出，按压止血。,6血样管轻轻混匀，防止凝血、溶血。,2压迫颈部,3旋
4、转刺入,4固定采血,5去管止血,1左手保定,Page 8大鼠眼眶取血流程6样品摇匀1.将大鼠按压在鼠,Step 1A 建议笼子内放置重物 防止摇晃；B 一定要带手套；C 开始必须牢牢固定住头部 头部乱动，扎位置容易得偏离，且易被咬伤； D 可在此时将大鼠取血侧的胡须剪掉，防止接触凝血。,Page 7,大鼠眼眶取血流程,1左手保定Step1.将大鼠按压在鼠笼上，拇+中+食指固定住,Step2A 可用管试探性触碰眼球是否已经突出；B 此时大鼠反抗挣扎最厉害，保证抓紧的同时，不能太过，使其窒息死亡。,Page 8,大鼠眼眶取血流程,2压迫颈部Step2.紧握颈部，压迫颈两侧，使眼突出，眶后静,Ste
5、p3 A 针头斜面先向眼球，刺入后再转一定角度使斜面对着眼眶后界； B 刺入深度，小鼠约2-3mm，大鼠约4-5mm。当感到有阻力时即停止推进，同时，管退出约0.1-0.5mm，边退边旋转； C 不要使用管的尖锐锋利端插入，易留玻璃碎片在眼内，造成持续伤害，使得下次反抗增加； D 拿管的手要保持干净，带血渍的手指不要接触管的两端，易造成凝血，可用醇水擦洗。,Page 9,大鼠眼眶取血流程,3旋转刺入Step3.眼内眦部，45 夹角，旋转刺入，旋转,Step 4A 一般血流速度快，证明插破了眼眶动脉，如果血流速度慢，证明要调整毛细管的位置，血液都流到组织中了，没顺毛细管流出来；B 出血过程中如遇
6、到出血不畅 不用着急拔毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深或浅的挑正一下 血会重新流出；C 如看见血液已经在毛细管中凝固 必须迅速拔除毛细管，再搽干净眼睛，重新换管扎针；D 等到出血后 将力道转移到大鼠的身体上 大鼠出现乱动的情况很大的一部分力是他的后肢使出来的 保证她的后肢无法乱蹬就能很好的保定大鼠，然后将中指和食指处解除一半的力道，可以保证血液的顺畅,Page 10,大鼠眼眶取血流程,4固定采血Step4.固定身体，压住后肢，放松手指，调整毛细,Step 5 A 当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。 B 尽量把眼睛周围的血渍搽干净，避免
7、结块影响下次取血。,Page 11,大鼠眼眶取血流程,5去管止血Step5.取血完成，立即除去颈部压力，将采血器拔,大鼠眼眶取血流程,Page 12,大鼠眼眶取血流程Page 14,大鼠眼眶取血流程,Page 13,大鼠眼眶取血流程Page 15,大鼠眼眶取血流程,Page 14,大鼠眼眶取血流程Page 16,Page 15,Page 17,大鼠眼眶取血流程,Page 16,大鼠眼眶取血流程Page 18,Page 17,大鼠眼眶取血流程,Page 19大鼠眼眶取血流程,Page 18,大鼠眼眶取血流程,Page 20大鼠眼眶取血流程,Page 19,大鼠眼眶取血流程,Page 21大鼠眼眶
8、取血流程,大鼠眼眶取血流程,Page 20,大鼠眼眶取血流程Page 22,大鼠眼眶取血流程,Page 21,大鼠眼眶取血流程Page 23,血样处理,血样处理,血清 不抗凝,血浆 肝素钠抗凝,A全血37水浴0.51h，,短时间内（ 30 min）,低速（ 4000） 离心（10min）,离心，取上清液， 低温保存,B全血 室温静置 0.5-1h，低温冰箱 过夜）,离心，取上清液， 低温保存,Page 22,血浆/全血（V/V）前五点低于40%-后续60%,血样处理 血样处理血清 不抗凝血浆 肝素钠抗凝,汇报完毕，谢谢！,汇报完毕，谢谢！,你只闻到我的香水，却没看到我的汗水。你否定我的现在，我决定我的未来！你嘲笑我一无所有，不配去爱，我可怜你总是等待。你可以轻视我们的年轻，我们会证明这是谁的时代。梦想是注定孤独的旅行，路上少不了质疑和嘲笑，但那又怎样？哪怕遍体鳞伤，也要活得漂亮！,你只闻到我的香水，却没看到我的汗水。,你只闻到我的香水，却没看到我的汗水。你否定我的现在，我决定我的未来！你嘲笑我一无所有，不配去爱，我可怜你总是等待。你可以轻视我们的年轻，我们会证明这是谁的时代。梦想是注定孤独的旅行，路上少不了质疑和嘲笑，但那又怎样？哪怕遍体鳞伤，也要活得漂亮！,你只闻到我的香水，却没看到我的汗水。,感谢聆听,感谢聆听,
