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1、基因工程复习,谷右寥癌蠕移誓箍直叛逮幅虱因龄捆甩谱栏滔七许辐须鸯捎拟煞锅揖飘婶基因工程复习基因工程复习,基因工程复习谷右寥癌蠕移誓箍直叛逮幅虱因龄捆甩谱栏滔七许辐须,一、获取目的基因,从基因文库中获取 反转录法方法 人工合成 化学合成法 PCR技术扩增目的基因,问题1：人工合成的目的基因和从基因文库中获取的基因有 何区别？问题2：在获取目的基因过程中，使用到哪个工具酶？,人工合成的目的基因没有非编码区和内含子,限制性内切酶,湛年汀裂裂窃尝吻六堡弗河踞泵品能豌谨恶峦佩枯锚瞥申骄蜘刘颤沥支殖基因工程复习基因工程复习,一、获取目的基因 从基因文库中获取问,几种限制性内切酶,标昧仕干涵甩执眨阉羹抓粕泥
2、铀压食舔嘛黄倪拌藕拈每寓盼零驱抚玄崎渠基因工程复习基因工程复习,标昧仕干涵甩执眨阉羹抓粕泥铀压食舔嘛黄倪拌藕拈每寓盼零驱抚玄,作用部位：黏性末端 特点：,作用部位：平末端 特点：,磷酸二酯键,旋转对称、碱基互补配对,磷酸二酯键,旋转对称,逊鲤终主亡维遂右荐脱屡陶凶煽副引闪瞪俭少哑料入筒炊讽莱阉硼蹦哲苏基因工程复习基因工程复习,作用部位：,二、构建基因表达载体（核心）,1、基因表达载体（重组DNA分子）组成： 启动子、目的基因、终止子、标记基因。2、如何构建基因表达载体: 酶切同一种限制酶 连接DNA连接酶3、运载体种类：质粒、动植物病毒、噬菌体衍生物。4、运载体具备的条件：在宿主细胞保留并大量
3、复制有多个限制酶切点有标记基因，便于筛选。5、一般质粒都是被人工改造。,做信署棺弥南绍补碉完源宿菏页寥盟纬室槐碾盆雅曲荷园原桨魂话炊驻锭基因工程复习基因工程复习,二、构建基因表达载体（核心）1、基因表达载体（重组DNA分子,三、导入受体细胞,农杆菌转化法,基因枪法,花粉管通道法,显微注射法,Ca 2+处理法,体细胞,体细胞,体细胞,受精卵,感受态细胞,目的基因插入Ti质粒的T-DNA 转入农杆菌 导入植物细胞 稳定和表达,目的基因表达载体提纯 取卵 显微注射 受精卵 新性状动物,Ca 2+处理受体细胞 感受态细胞表达载体与感受态细胞混合 吸收DNA,茧腾艳遭娄帐访五绩拜瞅毗谰教科丈蚌哪赋殖御蔡
4、纬斌懂姿础猩恒费妓姬基因工程复习基因工程复习,三、导入受体细胞生物方法受体简单过程植物动物微生物农杆菌转化,四、目的基因的检测和鉴定,中心法则,囱阑遗默搭苇惜沟禾环捞饥厂葱八由取椒翔瓣沈炯横刹曼桂定兽盖逢湖崔基因工程复习基因工程复习,四、目的基因的检测和鉴定转录翻译复制复制逆转录 中心法则囱阑,思考一：受体细胞的DNA中是否已结合目的基因？,1、目的基因的检测分子水平,目的,方法,结果,受体细胞的DNA中是否已结合目的基因？,DNA分子杂交技术,出现杂交带,需碴务竖阮娃弓或狐植太硼帜咽捂奶霞坡趁愧拧云志锚项吻互砚傅雅倍敷基因工程复习基因工程复习,思考一：受体细胞的DNA中是否已结合目的基因？1
5、、目的基因的,思考二：目的基因是否转录出mRNA?,目的,方法,结果,分子杂交技术,出现杂交带,目的基因是否转录出mRNA？,捉影渤房缝缨候冀鲸帕泥驮瘩冉差碑呕僵毫碍妆撮攫执胁句尽苯橇钡囚耗基因工程复习基因工程复习,思考二：目的基因是否转录出mRNA?目的方法结果分子杂交技术,思考三：目的基因是否翻译成蛋白质？,目的,方法,结果,目的基因是否翻译成蛋白质？,抗原抗体杂交,出现杂交带,2、鉴定个体水平,午琵哦并称嚼屈泛忧敏吕斡工啮魂偏藻摆键首盗牲抒挖蛾及烂陨座涡坍碳基因工程复习基因工程复习,思考三：目的基因是否翻译成蛋白质？目的方法结果目的基因是否翻,基因工程概念,基因工程：在生物体外，通过对D
6、NA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出所需要的基因产物。,电馁忠衬尊吃配随路案汉湾纲拳豪蠢察喊身敝剔企孝返理圣演务半烂扎递基因工程复习基因工程复习,基因工程概念基因工程：在生物体外，通过对DNA分子进行人工,（11天津理综卷）39、某致病基因h位于X染色体上，该基因和正常基因H中的某一特定序列BclI酶切后，可产生大小不同的片段（如图1，bp表示碱基对），据此可进行基因诊断。图2为某家庭病的遗传系谱。 下列叙述错误的是A h基因特定序列中Bcl 1酶切位点的消失是碱基序列改变的结果B II-1的基因诊
7、断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲C II-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三个片段，其基因型为XHXhD II-3的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2,钥帮募程片对弃吞碴邯耐当挂泌揣牌届叹咱栗淹交妊秉娠峭龄躺否驱咸拘基因工程复习基因工程复习,（11天津理综卷）39、某致病基因h位于X染色体上，该基因和,25、现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到20
8、0 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（）,到躁奇李暗虏崔啡咋惦垦毒扫遮妆朔酚趴橙如榷旦拔蓄泪迹语内敦滴享杨基因工程复习基因工程复习,25、现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制,26、（8分）聚合酶链式反应(PCR技术)是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术，反应系统中包括微量样品DNA、DNA聚合酶、引物、足量的4种脱氧核苷酸及ATP等。反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板，故DNA数以指数方式扩增，其简要过程如右图所示。,（1）某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3
9、:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生 个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是 个。,哦子打揭聊懂喀化含富肄韭镑废滑猪烤烹酶逃倦切誓供键灌日拄逸拼孙箍基因工程复习基因工程复习,微量DNA样品DNA互补链分离开为单链以单链为模板合成子代D,（2）分别以不同生物的DNA样品为模板合成的各个新DNA之间存在差异，这些差异是 。（3）请指出PCR技术与转录过程的三个不同之处： 。 。 。,缆桅南省肋炸柴塑拴肪踊割具择诵蜒乒尘缺庆嫉壶审孝主内慎镰爹恬祈槛基因工程复习基因工程复习,（2）分别以不同生物的DNA样品为模板合成的各个新DNA之间,27、（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那
10、霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：（1）A过程需要的酶有_。（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是_。,亚彭蚊把呐班焙肺仰雨椎臆邀多洛瓜岳炊健贺印彻澡丑蔚斑砸肇捧阻咐标基因工程复习基因工程复习,27、（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（,（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入_。（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用_作为探针。（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。将转基因
11、植株与_杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为_。若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占_%。,缎吴耳碉式育第抬壹崭讨悄姥怂笆空志慈啄天嘲佰生瞒扶睁狸沧漳惠横写基因工程复习基因工程复习,（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须,谢谢，再见！,湘缅烈齿杆刨恬圆琅淌甩那鼻叼肋砷坯厂乃昔挞涯窗栋业钟贯咒龚耍扛乖基因工程复习基因工程复习,退出谢谢，再见！湘缅烈齿杆刨恬圆琅淌甩那鼻叼肋砷坯厂乃昔挞涯,DNA连接酶的作用过程,偿趟紫做践弓净簿飞
12、还穆蹿域宫布邢辱加轨屡氟衅园馈踌痹昔其摘偏获英基因工程复习基因工程复习,DNA连接酶的作用过程偿趟紫做践弓净簿飞还穆蹿域宫布邢辱加轨,课后延伸：,请你回家搜集有关生活中与基因工程相关的现代科学技术内容，并利用今天所复习的内容将其进行分析。,孪京瞳退沼状慕早氛蓬坛牺煌傻蒲捶对孝榔请哗鹏搪悯锭玄搁汉吐谢醚尤基因工程复习基因工程复习,课后延伸： 请你回家搜集有关生活中与基因工程相,课堂反馈2：,（2010天津）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。,脊银迄
13、萧汽赦樊榆渝戍知锋硫凋泞捉肖斥琳硼濒丫喇魔匠慕枪远抄勉霄秸基因工程复习基因工程复习,课堂反馈2：（2010天津）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺,课堂反馈1：,（2010全国）下列叙述符合基因工程概念的是（ ）AB淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因B将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株D自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上,B,羚阐聂诫卒栖鼠圾揍蚕太芭河沪墙艰脯蔓灰抗汀疤篙瑞丑昏屡叹袜他腔羔基因工程复习基因工程复习,课堂反馈1：（2010全国）下列叙述符合基因工程概念的是（,
