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1、光学显微镜的使用方法,实验一,一、光学显微镜构造和使用,目的要求 用品材料 实验内容 复习预习,目的要求 用品材料 实验内容 复习预习,光学显微镜构造和使用,熟悉光学显微镜基本结构和用途； 掌握显微镜维护的基本知识； 初步掌握低倍镜、高倍镜使用方法。,玻片标本 字母装片、头发装片、玻璃纤维 实验材料 显微镜、擦镜纸、载玻片、擦布、香 柏油、二甲苯,重新认识显微镜的结构 显微镜的正确使用方法 显微镜使用的注意事项 其他常用的光学显微镜,机械系统部分 光学系统部分 照明系统部分 图像记录系统,光学显微镜的构造,机械部分,光学系统部分,“5”，“10”的含义。目镜指针,如何计算显微镜的放大倍数？,照
2、明系统部分,光 源,反光镜,聚光镜,光 圈,： 内光源与外光源,： 凹面镜与平面镜,： 升高与降低聚光镜,： 放开与关闭光圈,如何调节观察视野的明暗度？,普通生物显微镜,显微图象系统,生物显微镜(含摄影系统),数码生物显微镜,返回上一层,光学显微镜的使用,取镜 放镜 对光 放片 调焦(粗调焦和细调焦),低倍镜的使用,光学显微镜的使用,定位 换镜 调焦(细调焦),高倍镜的使用,字母装片：观察中注意字母像与实际装片的位置关系，为什么？头发装片：调节推片器定位头发的十字交叉点玻璃纤维：调节推片器定位玻璃纤维的十字交叉点问题思考：对颜色深的标本与颜色浅的标本在观察过程中有何不同？,使用练习,光学显微镜
3、的使用,返回上一层,显微镜使用注意事项,显微镜持取正确姿势 使用前后的镜头维护 注意标本的放置方向 观察时注意双目齐睁 高倍镜不得使用粗调 严禁拆卸任何部件 使用后恢复机器原貌,返回上一层,其他常用光学显微镜,检测显微镜 解剖显微镜 倒置显微镜 偏光显微镜,检测显微镜SFC-86,双筒解剖显微镜,其他几种显微镜介绍,其他几种显微镜介绍,倒置显微镜光路图,倒置显微镜,偏振光显微镜,返回上一层,目的要求 用品材料 实验内容 实验报告 复习预习,二、细胞形态和显微测量,掌握光镜下细胞的基本形态结构； 掌握临时制片和显微绘图的方法； 进一步掌握显微镜的正确使用方法； 了解细胞显微测量的原理。,玻片标本
4、 人口腔上皮细胞、平滑肌装片、牛脊髓横 切片、小鼠肝细胞切片、蛙血涂片 实验材料 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、小镊 子、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、纱布、 擦镜纸、吸水纸、解剖刀、剪刀等,细胞的形态观察 细胞的显微测量,扁平细胞人类口腔上皮细胞 柱状细胞小鼠小肠上皮细胞 星形细胞牛脊髓神经细胞 梭形细胞小鼠平滑肌细胞 圆形细胞蛙血(示红细胞) 小鼠肝细胞切片观察,第一部分细胞的形态结构观察,返回上一层,人口腔上皮细胞制备(临时制片),取口腔上皮细胞,盖上盖玻片,亚甲基蓝染色,观 察,取干净载玻片,滴入0.9%NaCl溶液,人口腔上皮细胞,扁平上皮细胞,扁平上皮细胞,蟾蜍扁平上皮细胞(HE染
5、色),柱状上皮细胞,蝾螈小肠切片 (HE染色),星状细胞,离体培养的新生老鼠脊髓神经细胞(HE染色),平滑肌细胞,小鼠平滑肌细胞,小鼠肝细胞切片,小鼠肝细胞内DNA的显示(Feulgen反应),圆形细胞,人血涂片 (Giemsa染色)(红色箭头示白细胞，兰色箭头示红细胞),细胞的显微测量需要以目镜测微尺来进行，但其分度值随着放大倍数的变化而变化，长度也不一样，因此需要事先进行标定。而镜台测微尺的长度是已知的，目镜测微尺的标定是通过镜台测微尺来进行的。,第二部分细胞的显微测量,返回上一层,目镜测微尺(长度随放大倍数发生改变),镜台测微尺(每一大刻度值为0.1mm，小刻度值为0.01mm),目镜测
6、微尺与镜台测微尺,标定镜台测微尺 蛙红细胞的测量,细胞的显微测量,目镜测微尺的标定,如在低倍镜下重合线之间目镜测微尺的长度为50格 镜台测微尺的长度为68格则： 50:68=1:x x=1.36格，即目镜测微尺的1小格相当于镜台测微尺的1.36格，而镜台测微尺每1小格的长度为10um，则目镜测微尺每1小格的长度为13.6um。,标定时应注意的问题,如何进行蛙细胞的显微测量？,描绘在显微镜下观察到的口腔上皮细胞 记录蛙红细胞显微测量结果,细胞膜,细胞质,细胞核,蛙红细胞示意图,分别记录5个蛙红细胞的长径和短径，并计算平均值。,蛙红细胞测量结果单位：m,目镜测微尺标定（1）标定物镜：40（2）重合线之间， 目镜测微尺 格，镜台测微 尺格（3）求值： 目镜测微尺的每一小格相当于镜台测微尺的 小格 目镜测微尺的标定值为 微米,
