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1、扫描共聚焦显微镜原理及应用,激光共聚焦显微镜的原理及应用张毅然31159908,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM是目前应用最广泛和光学图像分辨率最高的分子细胞生物学分析仪器,它是在荧光显微镜成像基础上加装了瀲光扫描装置,利用计算机进行图像处理,使用紫外光或可见光区激发荧光探针,得到细胞或组织內剖微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察pH值、钙离子、膜电位等生理信息及细胞形态的变化,是分子细胞生物学研究领域中的新工具,LSCM的发展历史SCM的原理和构造目录M的势及缺点SCM的应用结论与展望,那些斯史,共聚焦显微皖的发明起源于L发展1987年, White等用免疫荧57年 Minsky Marvi
2、n首次光标记法使得胚胎的大分子物在他的专利中阐明了瀲光扫描共年Wson在前人研究的基质成功显示,这标志着LSCM聚焦显微镜技术的某些基本工作已经成为进行科学研究的重要原理。1967年 Egger第一次成的基砒理论,首次箝述了光与被照工具功地用共聚焦显微镜产生了明物体的原子之间的非线性关系和学横新面。它的成功源自尼普激光扫猫器的拉曼光谱学。1978夫盘的发明和拉曼光谱学理论年, Brankenhoff等发明了一种有着较高数值孔径的透镜,并将这种高数愷孔径的透镜应用在激光共聚LM起源LSCM的9成熟,那些。细微,原理及结构LSCM用于激发荧光的激光束(aser透过入射ight source pin
3、hole)被二向色镜Dichroic mirror反射,通过显微物镜Objective lens)汇聚后入射于待观察的Fluor escence light焦点(o处。激光照射所产生的荧光Objective lenfluorescence light和少量反射激光一起,被物镜重新收集后送往其中携带图像信息的荧光由于波长比较长,直接通过二向色镜并透过出射小孔Detection pinhole到达光电探测Detector)(通常是光电倍增管(PM)或是雪崩光电二极管(APD),变镜反射,不会被探测到共聚焦显微镜简化原理图,原理及结构LSCM只有焦平面上的点所发出的光才能透过出射小孔;焦平面以外的点
4、所发出的光线在出射小面是离焦的,绝大部分无法通过中心的小孔。因此,焦平面上的观察目标点呈现亮色而非观察点则作为背景呈现黑色,反差增加,图像清晰。在成像过程中,出射小孔的位conjugate)因而被称为共聚焦(con-ocal)显微技术探测针孔的作用示意图,原理及结构LSCM光学成像系扫描系统计算机系统LSCM是在传统的光学显微镜基础上加装了激光扫描装置利用激光扫描束通过针孔形成显微成像系统点光源,在焦平面上逐点扫描采集点的光信号通过探测针傲发滤光片孔聚集后,被光电倍增管(PMT探测收集经过信号处理维构建输出到计算机上成像光强度SCM基本结剂,那些选择,30,26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。卢梭27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。罗曼罗兰28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。孔子29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。达芬奇30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。叔本华,谢谢！,
