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1、专题三 胚胎工程,知识网络构建:,胚胎工程,胚胎工程的应用,胚胎移植,胚胎分割,基本程序,移植的生理学基础,体外受精和早期胚胎培养,试管动物技术,体外受精,早期胚胎培养,体内受精和早期胚胎发育,精子的发生,卵子的发生,受精,早期胚胎发育,胚胎干细胞,一、体内受精和早期胚胎发育,(一)、精子和卵子的发生,(二)、受精,(三)、胚胎发育,(一)1、精子的发生,1)、场所:,2)、时期:,3)、过程:,睾丸(的曲细精管),从初情期开始直到生殖功能衰退,发生的过程大体可分为三个阶段,精原细胞,有丝分裂,初级精母细胞,次级精母细胞,精子细胞,精子,M,第一阶段,第二阶段,第三阶段,M,精子发生的过程,多
2、个精原细胞,染色体复制,变形,精子细胞变形中的主要变化:,1.细胞核2.高尔基体3.中心体4.线粒体5.细胞内其他物质,精子头的主要部分,头部的顶体,精子的尾,线粒体鞘(尾的基部),原生质滴(球状,最后脱落),2.卵子的发生,1)发生部位:卵巢2)时间:胚胎性别分化以后直至生殖机能衰退减数第一次分裂在雌性动物排卵前后完成; 减数第二次分裂在精子和卵子结合的过程中完成。,卵原细胞,有丝分裂,多个卵原细胞,染色体复制,初级卵母细胞,M,第一极体,次级卵母细胞,两个第二极体,第二极体,卵子,退化消失,(3、卵子发生过程,M,排卵前后完成,在受精过程完成,被卵泡细胞包围,形成卵泡,胎儿期完成,(二)受
3、精,1、受精部位:,2、受精标志:,在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时。,输卵管,3、过程,受精前的准备阶段,受精阶段,精子获能(在雌性动物生殖道),卵子获能(达到减数第二次分裂中期时才具备与精子受精的能力),受精阶段:1)精子穿越放射冠和透明带 顶体反应使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞之间的物质 透明带反应是防止多精入卵受精的第一道屏障2)精子进入卵黄膜 卵黄膜封闭作用是防止多精入卵受精的第二道屏障3)原核形成: 雄原核形成和雌原核形成4)配子结合: 雌雄原核融合形成合子(受精卵),发生顶体反应,穿越放射冠,穿过透明带,发生透明带反应,形成受精卵:,精、卵相遇,顶体反应,
4、顶体酶释放,顶体酶溶解透明带,接触透明带,穿越放射冠,溶解卵丘细胞 (放射冠),穿越透明带,接触卵黄膜,产生透明带反应,形成第一道屏障(作用 ),精子被微绒毛抱合,精子外膜与卵黄膜融合,精子进入卵,精子进入卵后,变化,变化,变化,产生卵黄膜封闭作用,形成第二道屏障 (作用),尾部脱离核膜破裂,形成雄原核,形成雌原核,激活卵子完成减数第二次分裂,排出第二极体,发育 移动 接触 合并,形成受精卵,(三)胚胎发育,受精卵,卵裂期,桑椹胚,囊胚(内含囊胚腔),原肠胚(内含原肠腔),胎儿形成,由具有全能性细胞构成,细胞数在32个左右,排列紧密,形似桑椹,内细胞团:发育成胎儿各组织,滋养层细胞:发育成胎膜
5、和胎盘,:最初发育在输卵管进行有丝分裂,1、胚胎发育过程,二、体外受精和早期胚胎培养,(一)、试管动物技术,(二)、体外受精,(三)、早期胚胎培养,是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。,(一)试管动物技术,(二)、体外受精,过程,采集精子,采集卵母细胞,获能,培养,受精卵,1.卵母细胞的收集和培养,2.精子的收集和获能,3.受精,在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。,-超数排卵处理,发育培养液: 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。,(三)、胚胎的早期培养,胚胎发育到适宜的阶段时,可取出向受体
6、移植或冷冻保存,试管动物与克隆动物的区别,有性生殖,无性生殖,试管动物技术,动物细胞核移植技术,遵循,不遵循,三、胚胎工程的应用及前景,(一)、胚胎移植,(二)、胚胎分割,(三)、胚胎干细胞的培养,(一)、胚胎移植,1、概念:将雌性动物的早期胚胎,或者通过其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。,2、胚胎移植的生理学基础,1)供体和受体相同的生理环境2)早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能3)受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥4)胚胎与受体建立正常的联系,但遗传物质没有改变,选择,供体母牛,受体母牛,同期发情处理,超数排卵,供体
7、公牛,配种或人工受精,冲卵,质量检查、培养,胚胎移植,妊娠检查,分娩(胚胎移植的犊牛),3、胚胎移植的基本程序,4、胚胎移植的条件和时间,(1)胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进行。(2)进行胚胎移植的供体和受体的生理状态要相同。,5、胚胎移植的意义,可充分发挥优秀个体的繁殖潜能, 缩短繁殖周期,增加一生繁殖的后代数量,1.概念:采用机械方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。2.特点:后代具有相同的遗传物质(无性繁殖或克隆)3.选择的胚胎:发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。4.分割要求:内细胞团均等分割,(二)、胚胎分割,1.概念:简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。,(三)、胚胎干细胞的培养,2.来源:,囊胚期的内细胞团细胞或原始性腺细胞。,4.主要用途(1)治疗人类的某些顽症(2)培育出人造组织器官,用于器官移植(3)是研究体外细胞分化的理想材料,3.特点:1)形态:体积小,细胞核大,核仁明显。2)功能:具有发育的全能性。可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。3)在体外培养的条件下,ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存,也可以进行遗传改造。,胚胎移植的正常程序:,