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1、第五组 组长： 组员：指导教师：,生化分离工程三级项目,蛋黄中卵磷脂的分离纯化,第一部分 背景卵磷脂,第二部分 实验部分,01,PART ONE,卵磷脂,卵磷脂,卵磷脂被英美科学家喻之为“健脑的黄金，养心的极品”，被日本营养学家称为“本世纪最伟大的保健品”。确切的卵磷脂是磷脂酰胆碱Pc，但商业“卵磷脂”是一类含磷酸根脂质的总和，包括磷脂酸PA、磷脂酰胆胺(脑磷脂)PE、磷脂酰胆碱(卵磷脂)PC、磷脂酰丝胺酸PS 、磷脂酰甘油PG和磷脂酰肌醇PI 6种。1844年法国人Gohley从蛋黄中发现卵磷脂，并以希腊文命名为Lecithos（卵磷脂），通用药品名称为Lecithin，也自此揭开了其神秘的
2、面纱。卵磷脂是磷脂的一种，又名磷脂酰胆碱，简称PC。磷脂酰胆碱由甘油基，脂肪酸基和胆碱构成。,卵磷脂的功效,卵磷脂的分布,卵磷脂存在于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要器官。存在于油料作物种子和蛋黄中，尤其在蛋黄中含量最高。牛奶、动物的脑、骨髓、心脏、肺脏、肝脏、肾脏以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。卵磷脂在体内多与蛋白质结合，以脂肪蛋白质(脂蛋白)的形态存在着，所以卵磷脂是以丰富的姿态存在于自然界当中，所以建议人们尽量摄取足够多种类的食物。,提取卵磷脂的方法,02,PART TWO,实验部分,实验原理,卵黄中的甘油三酸酯占全部脂类的60%，磷脂约
3、占28%,甾醇脂及其他约占6%。磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿，部分溶于乙醇，极难溶于丙酮；卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂，但不溶于丙酮；丙酮能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。因此本实验采用化学试剂从蛋黄中提取卵磷脂时，先采用丙酮脱水去其他脂类，再用乙醇对丙酮粉进行溶解，抽滤浓缩干燥最终获得卵磷脂。,实验材料和仪器,实验材料：鸡蛋、无水乙醇、丙酮仪器：电子天平、真空抽气机、干燥箱、恒温水浴锅、旋转蒸发仪、抽滤漏斗、厚壁烧瓶、磨口瓶,实验步骤,05,04,03,02,01,蛋黄的分离：将鸡蛋打人培养皿中用小烧杯分离成蛋白和蛋黄 。称量蛋黄重量（G）及小烧杯重量（G0）,丙酮脱水去油：选用分析
4、纯的丙酮， 丙酮的体积与蛋黄的克数(mLg) 比例为 3：1静置15min后真空抽滤，水分和溶于丙酮的其它脂质在滤液中， 而蛋黄卵磷脂则留于滤渣即蛋黄粉中。称量滤渣重量（G1)。,乙醇溶解丙酮粉提取卵磷脂:用分析纯的无水乙醇配制出99.7%的乙醇溶夜,将丙酮粉溶于其中（每克丙酮粉加9.5ml乙醇），在40下静置（水浴锅），再用真空抽滤装置过滤至残渣较干不粘手。,浓缩：水浴的温度控制在80-85为宜 。浓缩至冷凝管口不再滴 出乙醇，圆底烧瓶中的物液泛起细小较密的泡沫时去除热源，继续在水浴中存放半小时后即可。,干燥：浓缩后所得的物液流动性很强，含有较多水分。考虑其抗热性较差，故放在不高60 的烘箱
5、中，至其不再呈流动性，具有粘稠感时取出。称量干燥后质量（G2）并计算得率。,数据,得率计算,卵磷脂得率=（127.965-111.077）/35.402*100%=47.703511%,结果分析与讨论,卵磷脂得率高于一般水平11%左右，可能原因如下： 1.在最初蛋黄与蛋白的分离过程中，蛋白去除不彻底。 2.丙酮脱脂时间不足 导致提取物中含有大量杂质。其他产生误差原因： 1.丙酮去油抽滤后在弃去残夜液的过程中存在样品损失。 2.乙醇溶液配制浓度存在误差,改进与优化,一、蛋黄粉丙酮脱脂效果优化方案 丙酮与卵磷脂料液比优化 1、 尝试各种不同料液比情况下的脱脂效果，分为1:3、1:6、1:9、1:1
6、2、1:15 2、 尝试脱脂时间下的脱脂效果：0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h(考察指标：丙酮不溶物质量，越小表示除杂越多，效果越好)二、 丙酮不溶物乙醇萃取效果优化方案 1、试验不同乙醇浓度下的萃取效果 分成四组进行单因素试验来进行验证 乙醇浓度分别为50%、60%、70%、80%、90%、100% （料液比1:7，水浴时间1.5h，水浴温度35%）2、试验不同萃取时间下的萃取效果 分成八组进行单因素试验来进行验证 萃取时间分别为0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h (料液比1:7，乙醇浓度选取已优化参数，水浴温度35)3、
7、试验不同萃取温度下的萃取效果 分成八组进行单因素试验来进行验证 萃取温度分别为15、20、25、30、35、40、45、50（前两个因素选用已优化参数，；料液比1:7）,参考文献,1张珍. 鸡蛋黄中提取卵磷脂的最佳操作工艺J. 甘肃农业大学,2003.2郁军, 裘爱泳, 刘元法. 磷脂的研究进展J.西部粮油科技, 2002,25(1):26-29.3 迟玉杰.加快禽畜中高附加值天然产物高效提取与产品开发J.食品科学 1992, 13(4): 349-364.4宋国安.磷脂的开发和应用前景J.辽宁化工，1999，258(4):235-2375李亚琴，吴守一.乙醇溶剂与CO2相结合提取高纯度卵黄磷
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