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1、实验一毛细血管采血法红细胞计数 Hb测定,要求,通过实验熟练掌握毛细血管采血技术，细胞计数板的结构及用法，掌握红细胞计数的原理，方法和临床意义。掌握Hb测定的实验原理和操作方法。,一、毛细血管采血法,实验步骤1.酒精消毒无名指头2.待酒精挥发（疼痛与稀释），皮肤干燥后，左手拇、食指、中指固定病人无名指端，右手持采血针，迅速穿刺指端。3.擦去第1d血（有组织液稀释与易凝），用采血管采集需要血量4.擦净采血管外周的血液（量准确），并尽快将采血管插入已备好的稀释液中，挤出血液到底部，并利用上清洗涤采血管3次，混匀。4.采血完毕，以消毒干棉球压迫伤口，帮助止血。,（1）血红蛋白吸管的使用,1.吸管的构
2、造2.使用拇指与中指握橡皮头，食指堵住橡皮头上的小窟窿，压迫橡皮头吸样（吸时手要缓缓放开，否则血会吸入橡皮头中），吸到需要量时（或稍多）时，将吸管的吸样端抵紧指端皮肤，放开压迫的橡皮头，将吸管擦净后放入试管底部，用上清洗涤吸管3次）,（2）计数板的使用,（3）计数顺序与原则,1.按一定顺序计数2.压线细胞数上不数下数左不数右,(4)显微镜的使用,1.打开光圈，低倍镜下调节光源到合适亮度，然后关闭光圈到最小。2.将计数板放到载物台上，低倍下找到刻度线，再调至高倍计数。,二、红细胞计数,原理将红细胞稀释后进行高倍镜计数，然后换算成每升血液中红细胞的数量。,1.操作,1.先吸取红稀释液2ml.2.末
3、梢采血法采血10微升加入稀释液中.3.混匀后，静置10分钟4.充池到计数板中，静置5分钟5.计数中间大方格四个角上和正中的五个中方格。6.结果计算公式：HBC/L=数得的细胞数*5*10*200*106,2.注意事项,1采第一滴血要擦去，因含组织液（稀释作用和促凝）； 2吸样要准确，不能气泡，管外余血要擦掉； 3 血红蛋白吸管要清洗干净； 4充池要先混匀，充池不能有气泡，否则要重新充池；,二、Hb测定,原理：高铁氰化钾可将Hb氧化成高铁Hb,然后高铁Hb可与CN-络合，形成棕红色的氰化高铁血红蛋白。操作：5ml氰化试剂+20ul末梢血，混匀静置10min，然后540nm比色。Hbg/L= A/(44*1.000cm)*64458mg/1000*251,3.参考值与临床意义,RBC成年男性（4.05.5）1012/L 成年女性（3.55.0）1012/L新生儿（6.07.0）1012/L Hb成年男性：120160g/L;成年女性：110150g/L;新生儿：170g200g/L; 老年人（70岁以上）：男性：94122g/L; 女性：87112g/L。,红细胞和血红蛋白增高 生理性增高 代偿性 精神因素 病理性增高: 相对性增多 原发性红细胞增多症 继发性红细胞增多症 红细胞和血红蛋白减低 生理性减低 病理性减低:红细胞丢失过多 红细胞破坏增加 造血原料不足 骨髓造血功能减退,
