实验二 人类染色体核型分析ppt课件.ppt

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1、正常人G显带核型分析,代课老师:五且昆,Company Logo,实验目的,熟悉人类染色体G显带的带型特征初步掌握G显带核型分析的基本方法,Company Logo,G显带(G banding)是最常见的显带技术,它是将染色体标本用碱、胰蛋白酶或其它盐溶液处理后,再用Giemsa染液染色,在普通显微镜下,可见深浅相间的带纹,称G带(G band)。G显带方法简便,带纹清晰,染色体标本可以长期保存,因此被广泛用于染色体病的诊断和研究。,Company Logo,关于G显带的机理目前有多种说法,较常见的有:1. Lee等(1973)认为染色体上与DNA结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉,染色后这些

2、区段成为浅带,而那些组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。,Company Logo,2. 有人认为,染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。比如用相差显微镜观察未染色的染色体时,就能直接观察到带的存在。用特殊方法处理后,再用染料染色,则带更加清楚,随显带方法不同,显出来的带特点也不一样,说明带的出现又与染料特异结合有关。,Company Logo,3. 一般认为,易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段,相反,含GC多的染色体段则不易着色。总的来说,G显带的机理还未搞清。,Company Logo,染色体的类型:按着丝粒在染色体长轴的位置,分成: 中央着丝粒染色体:1/25/8亚中着丝粒

3、染色体:5/87/8近端着丝粒染色体:7/8至末端,Company Logo,正常人类G显带染色体的核型特征,定义: 核型(Karyotype)又称染色体组型,是指将人体体细胞内的全部染色体,按其不同的大小、形态、特征排列起来所构成的图像。 核型分析( Karyotype analysis) 制备核型图像并对其进行观察分析以确定正常与否的全过程。,Company Logo,根据染色体大小和着丝粒位置不同分为AG七组,X列入C组,Y列入G组,并决定将副缢痕和随体作为识别染色体的辅助指标。核型的表示方法:正常男性核型:46,XY 正常女性核型:46,XX,Company Logo,染色体中期分裂相

4、照片的剪贴分析,1】用剪刀将每一条染色体小心剪下;2】将剪下的染色体按照Denver体制的特征进行分组、排号【、组(形态最大)、组(近端着丝粒染色体)、组(较小,中央、亚中央着丝粒染色体)组】,按顺序从长到短排列;3】粘贴时短臂向上,长臂向下,如两条染色体长度相等,短臂较长者排前,每组的着丝粒在一条横线上;4】分析结果,记录下核型。,Company Logo,实验用品,解剖剪、培养皿、胶水、镊子等人类染色体G显带照片,Company Logo,实验内容与方法,(一)认识正常人体细胞各染色体 显带的带型特征(二)正常人体细胞染色体数目观察(三)正常人显带核型分析,Company Logo,染色体

5、观察及核型分析,Company Logo,染色体观察及核型分析,一秃二蛇三蝶飞,四象鞭炮五黑腰。 六号短臂小白脸,七上八下九苗条。 十号长臂三条带,十一低来十二高。 十三十四十五号,三个一样一二一。 十六长臂近点深,十七远端带脚镣。 十八人小肚皮大,十九中间一点腰。 二十头重脚底轻,二十一象葫芦瓢。二十二一点Y黑腰,X pq 一肩挑。,Company Logo,A:1,2,3对染色体,体积大,易于区别,有中央着丝粒。第2对的着丝粒略偏离中央。无随体,1号常见次缢痕。B:4,5两对,体积大,有亚中部着丝粒,无随体,彼此不易区分。C:包括612对常染色体和X染色体,中等大小,为亚中部着丝粒染色体。

6、第6对的着丝粒靠近中央,X染色体大小接近介于第6,7对之间。第9对染色体长臂上有一次缢痕,第11对染色体的短臂较长,第12对染色体的短臂较短。,D:13,14,15中等大小,有近端着丝粒,有随体,彼此之间不易区分。E:16,17,18较小,第16对有中央着丝粒,长臂上有次缢痕,易于区别。第17,18对有亚中部着丝粒,难以区分,后者的短臂较短。F:19,20体积小,有中部着丝粒,无随体,彼此之间难以区分。G:21,22常染色体和Y染色体。第21,22对染色体体积最小,近端部着丝粒,有随体,长臂常呈分叉状,彼此不易区分。Y染色体较前两对略大,近端部着丝粒,无随体,长臂常常彼此平行。,Company

7、 Logo,中央着丝粒染色体,短臂有两条深带;长臂远侧段有4条深带,一号染色体,一秃,Company Logo,亚中着丝粒染色体短臂可见4条深带,中段的两条深带稍靠近。长臂有58条深带,二号染色体,二蛇,Company Logo,三号染色体,中央着丝粒染色体3号染色体着丝粒染色浓。在短臂和长臂的中短各有一条明显而宽阔的浅带,呈蝴蝶结状,三蝶飞,Company Logo,四号染色体,亚中着丝粒染色体短臂:可见1-2条深带长臂: 可见均匀分布的4条深带,四象鞭炮,Company Logo,五号染色体,亚中着丝粒染色体长臂上有四条深染带,其中间三条深带常集中在一起,五黑腰,Company Logo,

8、六号染色体,亚中着丝粒染色体短臂有两条深带,在近侧、远侧深带之间有一条宽阔而明显的浅带,比拟为“小白脸”,六号短臂小白脸,Company Logo,七号染色体,亚中着丝粒染色体长臂上有三条深染带,短臂有三条深带,中间一条较浅,远侧深带最深,犹如“瓶盖”,七上,Company Logo,八号染色体,亚中着丝粒染色体长臂上有三条深染带,远侧深带最深,八下,Company Logo,九号染色体,亚中着丝粒染色体长臂上有两条深染带,在近着丝粒区有次缢痕,显示出特有的“苗条”,九苗条,Company Logo,十号染色体,亚中着丝粒染色体长臂上有三条深染带,近侧的第一条深带最深,十号长臂三条带,Comp

9、any Logo,十一号染色体,亚中着丝粒染色体短臂近中段有一条深带;长臂上有两条深染带,近侧紧靠着丝粒有一条深带,远侧一条深带,中间有一条宽的浅带。,十一低来,Company Logo,十二号染色体,亚中着丝粒染色体短臂中段有一条深带;长臂上近侧紧靠着丝粒有一条深带,远侧有34条深带,中间一条较宽的 浅带。,十二高,Company Logo,十三号染色体,近端着丝粒染色体长臂上有比较均匀分布的四条深染带,中间两条最清楚,十三十四十五号,三个一样一二一,Company Logo,十四号染色体,近端着丝粒染色体着丝粒区深染,长臂上有四条深染带,中间一条深带和远侧一条深带最清楚。,Company

10、Logo,十五号染色体,近端着丝粒染色体着丝粒区深染,长臂上可见一条清楚的深染带。,Company Logo,十六号染色体,中央着丝粒染色体长臂上靠近着丝粒区深染可见一条清楚的深染带。,十六长臂近点深,Company Logo,十七号染色体,亚中着丝粒染色体着丝粒区深染,长臂远侧段有一条深染带,与着丝粒之间有一条宽的 浅带。,十七远端带脚镣,Company Logo,十八号染色体,亚中着丝粒染色体短臂有一条浅带,长臂近侧段与远侧段各有一条深染带,它们之间有一条宽的浅带。,十八人小肚皮大,Company Logo,十九号染色体,中央着丝粒染色体着丝粒区深染,其余全为浅带。,十九中间一点腰,Com

11、pany Logo,二十号染色体,中央着丝粒染色体着丝粒区深染,短臂有一条深带,长臂着色较浅。,二十头重脚底轻,Company Logo,二十一号染色体,近端着丝粒染色体短臂末端有时可见随体,长臂中段可见一条宽的清楚的深染带。,二十一象葫芦瓢,Company Logo,二十二号染色体,近端着丝粒染色体着丝粒区深染,长臂近中段可见一条较宽的浅带。,二十二一点,Company Logo,X染色体,亚中着丝粒染色体短臂和长臂中段以着丝粒为中心各有一条深染带,像“照镜子”。,Company Logo,Y染色体,近端着丝粒染色体短臂末端没有随体,两长臂靠拢,有时在远侧段可见两条深带,有时整个长臂深染,像

12、“小砝码” 。,Company Logo,Y黑腰Y 染色体:形态和大小,跟G 组染色体相似。它有以下几个特征:它的两条染色单体一般不作分叉状,几乎是平行的;在许多细胞中,在其长臂上可见到次缢痕;,一般来说,它比第21、22染色体要长一些;没有随体;长臂的端部模糊不清,呈“细毛状”。,Company Logo,46,XY,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,Company Logo,46,XY,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,13,13,22,2

13、2,14,14,15,15,16,16,17,17,18,18,19,19,20,20,21,21,X,Y,Company Logo,46,XX,1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8,9,9,10,10,11,11,12,12,13,13,14,14,15,15,16,16,Company Logo,46,XX,X,X,17,18,18,19,19,20,20,21,21,22,17,22,Company Logo,Company Logo,实验步骤,取显带中期分裂相显微镜照片,计数染色体总数。用解剖剪沿各染色体边缘,稍留空隙,剪下每条染色体,放在培养皿内。再计数一次。按各号染色体显带带性特点,在培养皿内将同源染色体一一配对,再按染色体分组标准,分成组。将配对好的染色体排列并粘贴在纸上,在各组染色体应在的位置上画横线,让各组染色体的着丝粒压在横线上。短臂在上,长臂在下。性染色体可贴在组染色体之后。,Company Logo,作 业,每人剪贴分析一张正常人体细胞显带中期分裂相显微镜照片,进行性别诊断并且写出核型。,Company Logo,

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