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1、第一节 消毒与灭菌,一、常用术语及概念消毒(disinfection)：杀死物体上病原微生物的方法。用以消毒的药品称消毒剂评估标准：1. 杀灭率(killing rate)：2. 杀灭指数(killing index)：3. D值(decimal reduction value):4. 存活率(survival ratio)：,第一节 消毒与灭菌一、常用术语及概念,灭菌：杀死物体上所有微生物的方法(包括芽胞在内)无菌：不含活菌，多为灭菌的结果。抑菌：抑制体内或体外细菌生长繁殖的方法。用以抑菌的药品称抑菌剂，常为抗生素。防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。用以防腐的药品称防腐剂卫生处理：将被
2、污染的无机物体表面的微生物减少至安全水平。,灭菌：杀死物体上所有微生物的方法(包括芽胞在内),二、物理消毒灭菌法(一) 热力灭菌法：高温对细菌有明显的致死作用。 1. 干热灭菌法(dry heat)：(1) 焚烧(incineration)：彻底的灭菌法，仅使用废弃物及实验动物尸体；(2) 烧灼(flame)：直接火焰灭菌，适用于接种环、试管、瓶口等。,二、物理消毒灭菌法,(3) 干烤：160-170 2h，可杀死芽孢，达到灭菌目的。适用于玻璃器皿、金属器械、陶瓷等；(4) 红外线：0.7-1000mm波长的电磁波，杀菌所需温度和时间与干烤相似。(热效应)。(5) 微波(microwave)：
3、多用于非金属器械、食具、药杯等消毒。,(3) 干烤：160-170 2h，可杀死芽孢，达到灭,2湿热灭菌法(moist heat)：(1) 巴氏消毒法：62 30min 或 71.7 15-30s。主要用于杀死酒类、牛奶及乳制品中的病原微生物，不破坏它们的质量。(2) 煮沸法：100 5min，可杀死细菌繁殖体。主要用于消毒食具、污染的器械、刀、剪等。,2湿热灭菌法(moist heat)：,(3) 流通蒸汽消毒法: 常压，100 15-30min;(4)间歇蒸汽灭菌法：100 15-30min；再37过夜，重复三次。(5) 高压蒸汽灭菌法(autoclaving)： 条件:103.4kPa
4、(1.05kg/cm2)；121.3；15- 20min 对象：金属、玻璃、瓷器、棉布等制品，生理盐水，普通培养基等。,(3) 流通蒸汽消毒法: 常压，100 15-30min;,(二) 辐射杀菌法1. 紫外线(ultraviolet radiation, UV)：波长240-300nm, 260-266nm最强。 干扰细菌DNA的复制与转录，但穿透力弱。2. 电离辐射(ionizing radiation)：高速电子、X射线、射线, 产生游离基，破坏细胞膜，干扰DNA合成。,(二) 辐射杀菌法,(三) 超声波杀菌法： 20千周/s，粉碎细胞 (四) 滤过除菌： 物理方法除去空气或液体中的细菌
5、。细菌：0.22mm(五) 干燥与低温抑菌法 冷冻真空干燥法，保存微生物数年或数十年。,(三) 超声波杀菌法：,(3) 亚单位疫苗(subunit vaccine) 用化学方法裂解和提取制成的细菌保护性抗原成分。(5) 高压蒸汽灭菌法(autoclaving)：产生游离基，破坏细胞膜，干扰DNA合成。氧化剂、重金属盐类等；3环境温度与酸碱度：反应速度随温度升高而加快；(一) 消毒剂的分类：按消毒剂杀灭微生物的能力分三级：(3) 损伤细菌细胞膜或病毒胞膜的消毒剂：表面活性剂、脂溶剂等。四环素类 包括四环素、强力霉素等；20千周/s，粉碎细胞三、化学消毒灭菌法其他抗生素：多肽类，万古霉素，林可霉素
6、，抗结核药物(利福平、异烟肼、乙胺丁醇、 吡秦酰胺等),人工被动免疫：注射抗毒素、丙种球蛋白、细胞因子等。将能编码引起保护性免疫应答的病原体免疫基因片段和质粒重组，重组体直接注入宿主机体，使体内持续表达该抗原，进而诱导出保护性体液免疫和细胞免疫的新型疫苗。合成疫苗 利用化学试剂分解病原体，经提取纯化得到的有效免疫原或化学合成的短肽链。在低温状态下真空抽去水分防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。磺胺类(sulfonamide)：磺胺甲基异噁唑,滤菌过程,(3) 亚单位疫苗(subunit vaccine) 用化学,低温与干燥,在低温状态下真空抽去水分,用途：保存菌种,冷冻真空干燥法：,低温与
7、干燥在低温状态下真空抽去水分用途：保存菌种冷冻真空干燥,三、化学消毒灭菌法 (一) 消毒剂的分类： 1. 按消毒剂杀灭微生物的能力分三级： (1) 高效消毒剂：可杀灭所有种类的微生物； (2) 中效消毒剂：能杀灭除芽胞以外的微生物 (3) 低效消毒剂：可杀死细菌繁殖体和亲脂性病毒,三、化学消毒灭菌法,2. 按杀菌机制分为三类：致蛋白变性或凝固的消毒剂：酚类、醇类、醛类、酸碱类、氧化剂等；(2) 干扰酶系统和代谢的消毒剂：氧化剂、重金属盐类等； (3) 损伤细菌细胞膜或病毒胞膜的消毒剂：表面活性剂、脂溶剂等。,2. 按杀菌机制分为三类：,在低温状态下真空抽去水分,(二)常用消毒剂化学性质与用途,
8、在低温状态下真空抽去水分类别作用机制常用种类酚类蛋白变性，细,各种消毒剂的应用,各种消毒剂的应用种类使用浓度用途石炭酸3%-5%地面、器具表,(三) 影响消毒剂消毒效果的因素1消毒剂的化学性质、作用浓度与时间消毒剂的理化性质及浓度不同，对微生物的作用大小不同。 2微生物种类、性质和数量不同微生物对不同化学消毒剂的敏感性不同，真菌细菌有胞膜病毒无胞膜病毒分支杆菌芽胞 3环境温度与酸碱度：反应速度随温度升高而加快；有一定的pH值范围。 5有机物：可影响消毒剂的效果。,(三) 影响消毒剂消毒效果的因素,影响消毒剂作用的因素,消毒剂,细菌,环境,种类,浓度,作用时间,菌龄,种类,有机物,温度,酸硷度,
9、影响消毒剂作用的因素消毒剂细菌 环境种类浓度作用时间菌龄种类,选择适当的消毒剂,低毒,价廉,低破坏,易贮藏,方便,有效,选择适当的消毒剂低毒价廉低破坏易贮藏方便有效,一、微生物感染的特异性防治(一) 微生物感染的特异性防治原则特异性免疫获得方式 自然主动免疫：患病、隐性感染。 自然被动免疫：通过胎盘、初乳。 人工主动免疫：接种菌苗、类毒素等。 人工被动免疫：注射抗毒素、丙种球蛋白、细胞因子等。,第二节 抗感染防治原则,一、微生物感染的特异性防治第二节 抗感染防治原则固有免疫,1. 人工主动免疫(artificial active immunization) 是用人工接种的方法给机体输入抗原性物
10、质(菌苗、疫苗、类毒素)，刺激机体产生特异性免疫力。主要用于疾病的特异性预防。2. 人工被动免疫(artificial passive immunization) 指给机体注射含特异性抗体的免疫血清或其他细胞免疫制剂，使机体立即获得特异性免疫力。主要用于治疗或紧急预防。,1. 人工主动免疫(artificial active i,(二) 人工主动免疫常用的生物制品： 1. 疫苗(vaccine) (1) 死疫苗(killed vaccine)：收获经培养增殖的免疫原性强的细菌，用理化方法灭活而制成。如百日咳菌苗。(2) 减毒活疫苗(attenuated vaccine）：从自然界发掘或通过人工
11、培育筛选的减毒或无毒力的活病原菌。如卡介苗。重组载体疫苗 将编码蛋白抗原的基因转入减毒的病毒或细菌而制成的疫苗。,(二) 人工主动免疫常用的生物制品：,(3) 亚单位疫苗(subunit vaccine) 用化学方法裂解和提取制成的细菌保护性抗原成分。 合成疫苗 利用化学试剂分解病原体，经提取纯化得到的有效免疫原或化学合成的短肽链。 基因工程疫苗 获得带有病原体保护性抗原表位的目的基因，将其导入原核或真核表达系统，从而获得该病原的保护性抗原, 研制成疫苗。安全，高效，经济，可批量生产。,(3) 亚单位疫苗(subunit vaccine) 用化学,(4) 核酸疫苗(nucleic acid v
12、accine): 又称基因疫苗或DNA疫苗。将能编码引起保护性免疫应答的病原体免疫基因片段和质粒重组，重组体直接注入宿主机体，使体内持续表达该抗原，进而诱导出保护性体液免疫和细胞免疫的新型疫苗。2. 类毒素(toxoid) 细菌外毒素经0.3-0.4甲醛处理后，毒性消失而仍保持其免疫原性，即成类毒素。如破伤风，白喉类毒素等。,(4) 核酸疫苗(nucleic acid vaccine),如破伤风，白喉类毒素等。(3) 流通蒸汽消毒法: 常压，100 15-30min;(三) 超声波杀菌法：放线菌产生的抗生素：主要来源。氧化剂、重金属盐类等；(一) 热力灭菌法：高温对细菌有明显的致死作用。(2)
13、 减毒活疫苗(attenuated vaccine）：从自然界发掘或通过人工培育筛选的减毒或无毒力的活病原菌。抗生素(antibiotics)：由真菌、放线菌或细菌等微生物产生。(2) 烧灼(flame)：直接火焰灭菌，适用于接种环、试管、瓶口等。合成疫苗 利用化学试剂分解病原体，经提取纯化得到的有效免疫原或化学合成的短肽链。在低温状态下真空抽去水分,(三) 人工被动免疫常用的生物制品： 1. 抗毒素 用类毒素多次给马注射，待马产生高效价抗毒素后采血，分离血清、纯化制成。 2. 抗菌血清 仅用于多重耐药菌株所致疾病的治疗。 3. 免疫球蛋白(胎盘、血清球蛋白)一般用于预防。 4. 细胞免疫制剂
14、 现试用的有转移因子(TF)，免疫核糖核酸(iRNA)，胸腺素(thymosin)，干扰素(IFN)，白细胞介素-2(IL-2)，细胞毒性T细胞(CTL)和LAK细胞等。,如破伤风，白喉类毒素等。(三) 人工被动免疫常用的生物制品,二、微生物感染的治疗 (一) 细菌感染的治疗：主要采用抗菌药物治疗。 1. 抗菌药物的种类 (1). 抗生素(antibiotics)：由真菌、放线菌或细菌等微生物产生。80%来源于放线菌。 放线菌产生的抗生素：主要来源。链霉素，卡那霉素，四环素，红霉素等。 真菌产生的抗生素：青霉素，头孢素。 细菌产生的抗生素：多粘菌素、杆菌肽等。,二、微生物感染的治疗,常用抗生素
15、的种类：(1). -内酰胺类(-lactams) 青霉素及头孢霉素；(2). 大环内酯类 包括红霉素、螺旋霉素；(3). 氨基糖苷类 包括链霉素、庆大霉素等；(4). 四环素类 包括四环素、强力霉素等；(5). 氯霉素类 包括氯霉素、甲砜霉素等；(6). 人工合成的抗菌药物：喹诺酮及磺胺类；(7). 其他抗生素：多肽类，万古霉素，林可霉素，抗结核药物(利福平、异烟肼、乙胺丁醇、 吡秦酰胺等),常用抗生素的种类：,(2) 化学合成抗菌药物种类： 奎诺酮类(quinolone)：环丙沙星 磺胺类(sulfonamide)：磺胺甲基异噁唑 硝酸呋喃类(nitrofurantion)：呋喃唑酮 硝酸咪唑类(nitromidazole)：甲硝唑,(2) 化学合成抗菌药物种类：,2. 抗菌药物的主要作用机制(1) 影响细胞壁的合成：如青霉素(2) 影响细胞膜的功能：如多年菌素；(3) 影响蛋白质的合成：(4) 影响核酸的代谢：,2. 抗菌药物的主要作用机制,病原微生物感染的防治原则课件,
