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1、荧光相关光谱（ Fluorescence Correlation Spectroscopy ）,一、概念,FCS通过测定溶液中微区内（fL）发光粒子因布朗运动或化学反应而产生的荧光涨落现象，分析荧光涨落的相关函数而获得单个粒子（如分子）的浓度、化学动力学参数等信息。概念于20世纪70年代提出，90年代开始发展。（计算机技术、光学检测技术、激光共焦技术）,Rhodamine green488nm激发,相关公式,微区内荧光分子数在任一时间t的变化导致荧光强度的涨落值为：用归一化自相关函数将荧光涨落与延迟时间相关：,二、相关实验技术,激光器共焦显微镜高数值孔径物镜,1.单光子激发2.双光子激发3.荧
2、光互相关光谱：分子量之差小于8倍，扩散系数之差小于2倍。标记两种不同荧光试剂，两个独立激光器激发，两个检测器分别检测。,三、应用,1.生物分子相互作用金环蛇毒素和乙酰胆碱受体的作用组氨酸标记肽与金属螯合脂的作用转铁蛋白与人转铁蛋白受体的作用秋水仙碱与微管蛋白的作用,2.活细胞相关研究,A.细胞膜磷脂双分子层4nm厚，可按二维模型处理胰岛素原C-肽与人细胞膜的相互作用表皮增长因子与膜结合受体的特异结合神经肽在胰腺癌细胞细胞膜的结合作用,B.胞内线粒体中NADH、黄素蛋白有自发荧光乳胶微球在细胞内的扩散行为寡聚核苷酸在细胞核内的分子运动-半乳糖酶融合蛋白在胞内的运动,3.核酸研究,DNA PCR扩增动力学研究DNA单个分子构象波动,4.疾病诊断,结合PCR扩增或其他扩增HIVHBV、HCV、SARS朊病毒,
