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1、直接抗人球蛋白试验阳性的意义,红细胞抗原的自身抗体近期输血的受血者血浆中的同种抗体与输入的供血者红细胞抗原反应输入的供血者血液或血液成分中的抗体与受血者红细胞抗原反应孕妇体内的同种抗体通过胎盘致敏胎儿红细胞上抗菌药物（如青霉素）的抗体与药物致敏的红细胞相结合,1,红细胞膜受某些药物（以头孢菌素类最多见）疗法而改变，导致蛋白质（包括免疫球蛋白）非特异性地被红细胞膜所吸收对给予药物（如奎尼丁及非那西丁）的反应形成药物-抗药物复合体，使补体成分、IgG抗体（占少数）与红细胞相结合为减少器官及骨髓移植患者的T细胞群体，应用有嗜异性抗体存在的马抗人淋巴细胞球蛋白时非抗体介导的丙球蛋白过高患者,2,直接抗
2、人球蛋白试验阳性的评价,血液标本的收集初步的血清学研究进一步的研究,3,自身免疫性溶血性贫血,4,一、概念,免疫性溶血 免疫性溶血是指由于免疫反应而使红细 胞破坏加速，寿命缩短的过程。溶血性贫血 溶血性贫血是由于红细胞破坏增多、增 速， 超过造血补偿能力范围，所发生 的一种贫血。自身免疫性溶血性贫血 是由于机体免疫功能异常，产生了抗自 身红细胞的抗体，使红细胞破坏加速造 成的溶血性贫血，在后天性溶血性贫血 中多见。,5,二、分类,免疫性溶血性贫血可分为三类 同种免疫性溶血性贫血 自身免疫性溶血性贫血 药物引起的免疫性溶血性贫血,6,7,8,9,自身免疫性溶血性贫血可分为四种主要类型： 1、 温
3、抗体型自身免疫溶血性贫血（WAIHA） 原发性的 （自发性） 继发性的 （与淋巴瘤、系统性红斑狼疮、 癌症或药物处理有关） 2、冷凝集素综合征（CAS） 原发性的 （自发的） 继发性的 （与淋巴瘤支原体肺炎、传染性 单核细胞增多症 有关）,10,11,混合型自身免疫性溶血性贫血（MTA） 原发性的 （自发的） 继发性的 （与系统性红斑狼疮、淋巴瘤有关） 阵发性寒冷性血红蛋白尿（PCH） 原发性的 （自发性的） 继发性的 （与梅毒、病毒感染有关）。,12,三、血清学特征,13,温抗体型自身免疫溶血性贫血（WAIHA）,常见的自身免疫性溶血性贫血， 约占 所有免疫性溶血性病例的4870%， 与温反
4、应性自身抗体有关,14,WAIHA典型的血清学特征,1、直接抗球蛋白试验 使用单特异性IgG及抗C3试剂时，可有三种 形式的反应： 单独IgG反应、单独C3致敏、IgG+C3致敏，,15,2、在血清中的自身抗体 是IgG型的，与所有的红细胞在间接抗人球蛋白试验中都呈阳性反应。血清中的游离抗体量非常少。3、放散液中 可检到IgG抗体。4、自身抗体特异性 主要是针对Rh抗原复合物，但只有在得到稀有表现型红细胞，如D阴性，或Rhnull时才能明确,16,冷凝集素综合征（CAS）,CAS（也称冷凝集素疾病CHD)，是与冷反应自身抗体有关的溶血性贫血中最常见的一种类型，约占所有免疫性溶血性病例的16-3
5、2%。可有急性和慢性两种情况。,17,CAS典型的血清学特征,1. 直接抗球蛋白试验 补体是红细胞上唯一能被检出的蛋白。多特异性抗球蛋白试剂中抗C3d（C4d）成分是造成DAT阳性的原因。,18,19,2血清 在4温度测定与免疫性溶血有关的IgM冷反应性自身凝集素效价常大于1，000以上；在体外用超过32温度盐水悬浮红细胞时则很少有反应。若在反应介质中加入30%牛白蛋白时，70 % 有临床意义的样本将在37反应,20,2022/11/26,21,3、放散液 若红细胞在37收集和洗涤，细胞上没有 免疫球蛋白，放散液中不会有反应发生。,22,4、自身抗体的特异性 最常见与CAS有关的特异性为抗I。
6、 较不常见的抗i特异性则与感染性单核 球症有关。 在及稀有的情况下，血清中冷反应性 自身凝集素具有Pr特异性或其他特异性。,23,阵发性寒冷性血红蛋白尿（PCH）,是DAT阳性的自身免疫性溶血性贫血症最少见的类型，成人中很少见，儿童中占32%。 较为常见PCH是急性暂时的情况，继发于病毒感染症，尤其在幼童当中。它也能出现在老年人中，为一特发性的慢性病。,24,PCH典型的血清学特征1、直接抗球蛋白试验 PCH中的自身抗体是IgG，它和IgM冷自身凝集素一样，在身体较冷的部位，PCH的IgG自身抗体与红细胞起反应，使补体成分（C3及C4）与红细胞发生不可逆的结合，然后在较温暖的部位IgG分离。所
7、以直抗阳性是补体造成的。,25,2、血清免疫球蛋白类型 在PCH中IgG自身抗体，习惯上称为双相性溶血素，因为它在低温与红细胞相结合，在37时使致敏红细胞溶血。DonathLandsteiner(DL)试验是诊断这种疾病的基础。,26,3、释放液免疫球蛋白类型 由于补体成分是循环红细胞上唯一存在的球蛋白，因此从PCH病人红细胞上得到的洗脱液一般是没有活性的。,27,4、自身抗体的特异性 PCH的自身抗体大部分呈现抗-P特异性，与所有的红细胞（包括病人自己的红细胞）起反应，与罕见p或Pk表现型不反应。亦有例子报告具有抗-I、抗-i和抗-Pr等特异性。,28,29,30,病人的红细胞是抗体还是补体
8、致敏？ 血清中有抗体吗？ 如果有，这些抗体是凝集 还是非凝集性抗体？体外溶血吗？ 最适反应温度是暖（37 ）还是冷（4 ）？是自身抗体还是同种抗体？ 洗脱液中有抗体活性吗？,31,四、具有自身抗体的患者的血清学检查,（一）、输血前试验中可能存在的问题 1、 冷型反应性自身抗体能引起自身凝集 反应，致使ABO及Rh分型试验结果发 生矛盾。自身抗体亦凝集血清分型试 验所用的A型和B型试剂红细胞。,32,2、 被球蛋白致敏的红细胞在接触到高蛋白含 量的商品化的抗-Rh 血清试剂时，可发生 自发性的凝集反应，致使 Rh 定型试验的 结果发生矛盾。,33,3、 血清里存在游离的自身抗体时，不可能获 得在
9、血清学上完全相配合的血液。这种情 况下要考虑自身抗体可能掩盖有临床意义 的同种抗体的存在。倘若时间允许，在输 血前应测定是否存在同种抗体,34,解决ABO定型中的问题,1 、采集标本后，立即将标本放入37 并在试验前用温盐水（3745 ）洗涤红细胞。 2、用硫醇类试剂（2-Me、DTT等）处理红细胞。 3、反定型中，可将血清和A、B红细胞在37 预热进行试验。 4、用吸收后血清进行试验（自身吸收的或用纯合子O型红细胞吸收的,35,解决Rh定型中的问题,1、由冷自身抗体造成可用解决ABO定型问题的方法来避免。 2、由IgG致敏的红细胞，试验必须要进行适当的对照试验。 或使用使用有盐水反应活性的试剂。,36,（二）在有自身抗体存在时检测同种抗体1、有温型反应性抗体存在时检测同种抗体 自身吸收 异体吸收法 稀释技术,37,38,2、有冷型反应性抗体存在时检测同种抗体 用病人本身红细胞在4 吸收血清试验应严格掌握在37 禁止使用小牛白蛋白和其它增强介质 使用EDTA抗凝血浆或加EDTA的血清 使用抗-IgG试剂，不用多特异性抗蛋白血清,39,五、自身免疫溶血性贫血病人的输血指南 为患WAIHA病人选择血液为患CAS病人选择血液为患PCH病人选择血液,40,41,2022/11/26,42,
