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1、抗人球蛋白试验,1,抗人球蛋白试验,抗人球蛋白试验,2,1945年，英国免疫学家库姆斯（Coombs）等人发明了能检测红细胞表面抗体的一种新试验，即抗人球蛋白试验。别名： Coombs试验(库姆斯试验) 。 Coombs试验是利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。,抗人球蛋白试验,3,抗人球法是检测不完全抗体的经典方法，分为直接试验(直接反应)和间接试验(间接反应)。 直接Coombs试验：是检查被检红细胞上 有无不完全抗体。 间接Coombs试验：是检查血清中游离的不完全抗体。,抗人球蛋白试验,4,直接抗人球蛋白试验,直接抗人球蛋白试验原理：患者体内
2、若有与红细胞抗原不相合的不完全抗体存在，可与红细胞结合形成抗原抗体复合物。但因不完全抗体分子量小，不能有效地连接抗原抗体复合物，仅使红细胞处于致敏状态。加入抗球蛋白血清，与红细胞上吸咐的不完全抗体结合，在致敏红细胞之间搭桥，出现肉眼可见的凝集。这种直接检测体内被抗体或（和）补体致敏红细胞的试验称之为直接抗球蛋白试验。,抗人球蛋白试验,5,直接抗人球蛋白试验,直接抗人球蛋白试验操作：（65%凝胶，35%抗人球蛋白试剂）1.撕开检测卡的封膜于反应腔中加入待检1%RBC生理盐水悬液50ul；2.将检测卡于离心机1800r/min 1min, 2500r/min 1min离心；3.取出，结果判读；,抗
3、人球蛋白试验,6,结果判读,抗人球蛋白试验,7,直接Coombs试验,抗人球蛋白,自身抗体,致敏RBC,可见凝集,抗人球蛋白试验,8,4.结果解释阳性：待检标本RBC已致敏IgG不完全抗体或补体；阴性：待检标本RBC未致敏不完全IgG抗体。,抗人球蛋白试验,9,间接抗人球蛋白试验,间接抗人球蛋白试验原理：用已知抗原的红细胞检测受检者血清中相应的不完全抗体；或用已知的不完全抗体检测红细胞上相应的抗原。在37条件下，若被检血清或红细胞有对应的不完全抗体或抗原，则抗原抗体作用使红细胞致敏再加抗人球蛋白试剂，与红细胞上不完全抗体结合，出现肉眼可见凝集。这种通过体外将红细胞致敏后，再检测红细胞有无不完全
4、抗体或抗原的试验称为间接抗人球蛋白试验。,抗人球蛋白试验,10,间接抗人球蛋白试验,间接抗人球蛋白试验操作：（65%凝胶，35%抗人球蛋白试剂）1.撕开检测卡的封膜于反应腔中依标记分别加入相应的0.5%筛选细胞LIM悬液100ul，各管再加入待检血浆或血清25ul；2.将检测卡37孵育10 min，取出，置离心机1800r/min 1min, 2500r/min 1min离心；3.取出，结果判读；（方法同上）,抗人球蛋白试验,11,间接Coombs试验,抗人免疫球蛋白,同种异型抗体,抗人球蛋白试验,12,4.结果解释阳性：待检血浆或血清中含有不完全抗体IgG或完全抗体IgM ；阴性：待检血浆或
5、血清中不含不完全抗体IgG或完全抗体IgM ；,抗人球蛋白试验,13,抗人球蛋白试验意义,1.本试验是诊断自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的重要依据，特别是IgG型引起的溶血性贫血，直接反应常呈强阳性，间接反应大多阴性，但亦可阳性。（血肾科有一病例）2.新生儿同种免疫溶血病：因Rh血型不合所致溶血病，直接及间接反应均强阳性，持续数周、换血输血后数天内可变为阴性，由于“ABO”血型不合引起 的溶血病，直接常为阴性或弱阳性，间接反应为阳性.,抗人球蛋白试验,14,3.药物诱发的免疫性溶血性贫血 -甲基多巴型：直接及间接反应均阳性。 青霉素型：直接反应阳性，间接反应阴性 福阿亭型：（奎宁等药物）抗体
6、通常为IgM，偶有IgG型者，直接反应为阳性，间接反应阴性4.冷凝集素综合征： 直接反应阳性，间接反应阴性（ 37）。由于本病红细胞膜附着的是补体C4和C3而不是IgG或IgM，如果用抗IgG或抗IgM抗血清做试验时则结果阴性，如以抗补体的抗血清做试验则直接反应阳性。,抗人球蛋白试验,15,5.红细胞血型不合引起的输血反应6.ABO或Rh血型不合输血，供者的红细胞被受者的血型抗体致敏，在供者被致敏的红细胞完全破坏以前，直接反应阳性7.Rh阴性者如过去不曾接受过Rh阳性者的血或曾没有妊娠Rh阳性胎儿者，间接反应阳性，第一次输血后（Rh阳性的血），数天之内间接反应也会变为阳性,抗人球蛋白试验,16,8.在传染性单核细胞增多症、SLE、恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、癌肿、铅中毒、结节性动脉周围炎、EVan氏综合征等，病人直接反应亦可阳性9.阵发性寒冷性血红蛋白尿症患者中，急性发作后用抗补体血清做试验直接反应常为阳性。,抗人球蛋白试验,17,我们科室Coombs试验已开展，报告方法：1、接收标本；2、完成试验；3、免疫组中免疫手工中报告结果。,抗人球蛋白试验,18,谢谢,抗人球蛋白试验,19,Bye Bye,
