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1、练习题,名词解释 菌落、培养基 思考题 细菌生长繁殖的条件有哪些? 与细菌致病性有关的细菌结构和代谢产物有哪些?,1,消 毒 与 灭 菌,2,基本概念,消毒(disinfection) 灭菌(sterilization),杀灭物体和机体体表病原微生物的方法 杀灭物体上所有微生物的方法,3,抑菌(bacteriostasis)防腐(antisepsis) 无菌(asepsis) 无菌操作,抑制体内或体外细菌的生长繁殖 防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法 不存在活的微生物 防止细菌进入人体、物品、手术或实验区间的操作技术,4,物理消毒灭菌法,热力灭菌法 高温对细菌有明显的致死作用,也能灭活病毒 蛋白
2、质变性、核酸断裂 干热灭菌法和湿热灭菌法 同一温度下湿热效力大于干热效力 湿热中菌体蛋白较易凝固 湿热的穿透力比干热大 湿热的蒸汽有潜热存在,5,干热灭菌法,焚烧 废弃物品、动物尸体烧灼 接种环、试管口等干烤(160-170/2h) 高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品 红外线,6,巴氏消毒法 61.162.8 ,30min或71.7 ,1530s 用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物,而仍保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法高压蒸气灭菌法 最常用,效果最好 121.3 1520 min,湿热灭菌法,7,辐射杀菌法,紫外线杀菌 265266nm 手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒
3、,或不耐热物品的表面消毒电离辐射 、射线(60Co) 医用塑料制品的消毒 食品、药品、生物制品的消毒,8,用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,达到无菌目的 滤膜孔径: 0.22 m 不耐高温无菌的血清、毒素、抗生素、药液以及空气的除菌 仅能除去细菌,不能去除病毒、支原体和L型细菌,过滤除菌法,9,10,通过破坏细胞壁裂解细菌 用于粉碎细胞,提取细胞组分以及制备Ag 等干燥与低温抑菌法 冷冻真空干燥法(lyophilization)是保存菌种的最好方法,超声波杀菌法,11,12,13,14,15,16,化学消毒剂的杀菌机制 使菌体蛋白质变性或凝固 酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类等 干
4、扰细菌的酶系统和代谢 氧化剂、重金属盐类 损伤细菌细胞膜 酚类、表面活性剂、脂溶剂等,化学消毒法,17,消毒剂的主要种类,18,消毒剂的选用原则,有 效安 全便 宜,19,影响消毒灭菌效果的因素,性 质,浓 度,作用时间,种类,数量,生命状态,温度,有机物,酸碱度,20,练习题,名词解释 消毒、灭菌、无菌、防腐、无菌操作思考题 举例说明干烤法和高压蒸汽灭菌法在灭菌条件、时间及适用范围等方面的区别,21,细菌的遗传与变异,22,遗传 子代与亲代性状的相似性变异 子代与亲代性状的差异性基因型变异 基因结构的改变;可遗传表型变异 基因结构未改变;不可遗传,23,细菌的变异现象,形态结构的变异 L型细
5、菌、荚膜变异、鞭毛变异等,24,毒力变异耐药性变异菌落变异抗原性变异,25,26,细菌的遗传物质,细菌的染色质质粒(plasmid)噬菌体(bacteriophage/phage)转位(座)因子整合子,27,质粒(plasmid),质粒DNA的特性 具有自我复制能力 编码的基因产物赋予细菌某些性状特征 可自行丢失与消除 可在细菌间转移 分相容性与不相容性两种,28,重要的质粒,F质粒R质粒Vi质粒细菌素质粒代谢质粒,29,噬菌体bacteriophage/phage,分布广泛,有严格的宿主特异性,30,毒性噬菌体(virulent phage),能在宿主细胞内增殖,产生许多子代噬菌体,并最终裂
6、解细菌,31,噬菌体溶菌过程,吸 附,32,噬菌体溶菌过程,穿 入,33,噬菌体溶菌过程,生物合成,34,噬菌体溶菌过程,成熟释放,35,噬菌体溶菌过程,36,温和噬菌体,溶原性噬菌体(lysogenic phage) 感染细菌后,噬菌体的基因组能与宿主菌基因组整合,并随细菌分裂传至子代细菌的基因组中,不引起细菌裂解,37,整合在宿主菌基因组中的噬菌体的基因组,带有前噬菌体基因组的细菌,38,溶原性周期和溶菌性周期,39,溶原性周期和溶菌性周期,40,溶原性周期和溶菌性周期,41,溶原性周期和溶菌性周期,42,转位因子,是存在于细菌染色体或质粒DNA分子上的一段特异性核苷酸序列片段,它能在DN
7、A分子中移动,不断改变它们在基因组的位置,能从一个基因组转移到另一个基因组中,43,插入序列(insertion sequence,IS) 是最小的转位因子,2kb,不携带任何已知与插入功能无关的基因区域转座子(transposon,Tn) 2kb,除携带与转位有关的基因外,还携带耐药性基因、抗金属基因、毒素基因及其他结构基因 可能与细菌的多重耐药性有关,44,45,基因突变 细菌遗传物质的结构发生突然而稳定的改变,导致细菌性状的遗传性变异基因突变的规律 突变率:自发突变低;诱发突变高 随机性和选择性 回复突变 野生型突变型野生型,细菌变异的机制,46,基因的转移与重组,基因转移(gene t
8、ransfer) 外源性遗传物质由供体菌(donor)转入某受体菌(recipient)内的过程基因重组(gene recombination) 转移的基因与受体菌DNA整合在一起的过程,47,转化(transformation),供体菌裂解游离的DNA片段被受体菌直接摄取,使受体菌获得新的性状,48,感 受 态,受体菌能摄取外源DNA片段的生理状态,转化因子,游离的DNA片段分子量小于107 ,最多不超过10-20个基因,49,细菌通过性菌毛,将遗传物质从供体菌转移给受体菌的过程,接合(conjugation),50,51,F质粒可整合到受体菌染色质上,与染色质一起复制,由于整合后的细菌能以
9、高效率转移染色体上的基因,故称高频重组菌 Hfr,52,53,Hfr 中的F质粒可从染色质上脱离下来,终止Hfr状态,从染色质上脱离的F质粒有时可带有染色质上几个邻近的基因,这种质粒称F质粒,带有F质粒的细菌为F菌,54,55,耐药传递因子( RTF),耐药(r)决定子,R质粒与耐药性有关,尤其与多重耐药性有关,56,以温和噬菌体为载体,将供体菌的一段DNA转移到受体菌内,使受体菌获得新的性状普遍性转导(generalized transduction)局限性转导(restricted transduction),转导(transduction),57,普 遍 性 转 导,完全转导,流产转导,58,局 限 性 转 导,59,普遍性转导与局限性转导的区别,60,当噬菌体感染细菌时,宿主菌染色体中获得了噬菌体的DNA片段,成为溶原状态,细菌获得新的性状,溶原性转换(lysogenic conversion),61,将两种不同的细菌经溶菌酶或青霉素等处理,失去细胞壁成为原生质体后进行相互融合的过程,原生质体融合(protoplast fusion),62,63,