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1、实验一 细胞凝集反应和细胞膜的渗透性,【课前预习】,1土豆凝集素的本质及其使红细胞凝集的原理？2在等渗溶液中细胞一定能维持正常形态吗？3预测红细胞在各种溶液中的溶血速度？,一、实验目的,1 了解细胞膜的表面结构；2了解细胞糖被的特点和功能，了解植物凝集素的作用3了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度,二、实验的原理,1. 细胞凝集反应细胞膜表面的有分支状糖外被，细胞间的联系、细胞的生长和分化、免疫反应、肿瘤的发生等都和细胞表面的分支状糖分子有关。凝集素（lectin）是一类含糖并能与糖分子专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，
2、在细胞表面间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。,2. 细胞膜的渗透性在低渗液中，红细胞很快吸水胀裂，称为溶血。在等渗液中，由于有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同,三、实验用品,1. 器材: 显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、烧杯、10ml移液管、试管、试管架2. 材料: 土豆块茎3. 试剂: 鸭血红细胞、抗凝血剂、PBS、土豆块茎、0.85生理盐水、2鸡红细胞、PBS缓冲液、Alsever溶液、等渗液：0.17 mol/L氯化钠、0.17 mol/L氯化铵、0.17 mol/L醋酸胺、0.17
3、mol/L硝酸钠、0.12 mol/L草酸铵、0.12 mol/L硫酸钠、0.32 mol/L葡萄糖、.0.32 mol/L甘油、.0.32 mol/L乙醇、00.32 mol/L丙酮低渗液 ：0.032 mol/L葡萄糖 0.017 mol/L 氯化钠,四、实验步骤,(一) 细胞凝集反应1. 2鸡血红细胞悬液制备新鲜鸡血加抗凝剂，生理盐水洗5次，每次2000r/min，离心5min，按红细胞压积用生理盐水配成2鸡血红细胞悬液。(为什么）2. 土豆凝集素制备 土豆2克，加10ml PBS，浸泡2h。3. 细胞凝集反应土豆凝集素1滴、2鸡血红细胞液1滴。载玻片上混匀，静置20min。4. 对照
4、分别用肉眼观察和显微镜下观察PBS1滴、2鸡血红细胞液1滴。,（二）细胞膜的渗透性1、50 的鸡红细胞悬液的制备 新鲜鸡血加抗凝剂，生理盐水洗5次，每次2000r/min，离心5min，按红细胞压积用生理盐水配成50鸡血红细胞悬液。1. 溶血现象的观察试管3支：分别加入0.032 mol/L葡萄糖 0.017 mol/L 氯化钠、水10ml 再加入鸡血红细胞液1ml；观察现象结果溶血，溶液变透明。2. 红细胞对不同物质的渗透性（1）取一只试管加入0.17 mol/L氯化钠10ml ，再加入鸡血红细胞液1ml；观察现象颜色变化（2）分别在以下几种等渗液中进行实验，步骤同上0.17 mol/L氯化
5、铵、0.17 mol/L醋酸胺、0.17 mol/L硝酸钠、0.12 mol/L草酸铵、0.12 mol/L硫酸钠、0.32 mol/L葡萄糖、.0.32 mol/L甘油、.0.32 mol/L乙醇、00.32 mol/L丙酮,未溶血,溶血,【实验结果】,1土豆凝集素能使鸡红细胞凝集，PBS对照液中红细胞分散均匀,未凝血,凝血,2细胞膜渗透性实验结果比较和分析,【实验报告】1简图表示凝集素使血细胞凝集原理2怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确定物质进入细胞的速度？物质进入细胞的快慢有什么规律？3、记录观察到的现象，并列表对实验结果进行分析和比较,【实验报告】1简图表示凝集素使血细胞凝集原理2怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确定物质进入细胞的速度？物质进入细胞的快慢有什么规律？,
