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1、药理学实验,实验一药理学实验的基础知识,考核方法,一、实验操作考核占10 小鼠 1.抓持 2.灌胃 3.腹腔注射 4.皮下注射 家兔：抓持 剂量换算二、自主探索性设计占总成绩的60：1. 实验准备考核及实验准备程度。占总成绩的102. 实验基本操作的正确程度以及认真程度。占总成绩的202. 平时实验报告的书写以及实验的成功率或者失败分析。占总成绩的30三、综合设计性实验占30：1.实验设计前准备及PPT制作，占10%2.实验实验报告，占10%3.自主实验操作，占10%,实验具体扣分项目,无故旷课（-5分）上课迟到2min（-2分）实验不认真（玩手机、利用电脑娱乐等）（ -1分）白大褂不穿（ -
2、1分）数据造假（ -5分）实验准备不充分，考试成绩60 （ -3分）值日生卫生打扫规范（ -5分）违反实验室规范（ -1分）,实验室规范,书包存放规范；操作完成后，打扫台面、器械及规范归还相关实验器械；动物尸体和活体规范归还；值日生卫生包括：地面打扫、凳子摆放整齐、动物尸体存放、门窗关闭、仪器设备关闭、垃圾清理；乱用U盘。注射器使用规范。,一、药理学实验课程目的和要求,掌握药理学实验的基本方法和基本操作技能验证药理学的重要基本理论了解新药临床前药理学研究的方法、药物生 物检定法等培养严肃认真的工作态度和实事求是的工作作风，并训练大家观察、分析和解决问题的能力,实验前 认真预习实验时 认真操作
3、仔细观察并详细记录实验后 认真书写实验报告,按时上交 整理实验器材(清洗、消毒、摆放整齐并物归原处)、动物处理 实验室的清洁卫生,实验记录,实验记录是将实验内容如实地记录下来，长期保存备用。其基本原则是真实、及时、准确、完整，实验过程中应认真做好实验记录。内容一般应包括：时间、温度；实验标本：动物的种类、体重、标记和标号及如何分组等。实验药物：药物的来源、批号、剂型、浓度、剂量及给药途径。实验进程、步骤和方法的详细记录。观测指标的变化和原始的描记图纸。,二、实验结果的整理和报告撰写,实验目的 简要实验材料 包括仪器、药品和动物实验方法 写清楚关键环节或简要步骤实验结果 将实验获得的数据进行整理
4、、归纳、分析和对比，尽量总结出图表或曲线，进行正确的统计学处理结论 是从实验结果归纳出来的概括性判断讨论包括对实验结果的分析、实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等 及思考题的探讨,三、基本操作技术训练,常用实验动物,实验动物是药理学研究最重要的和不可替代的实验材料动物实验是研究药理学规律的的基本手段常用实验动物如小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猫、犬、猴等，分别用于不同目的,小鼠（Mouse ),用量最大、用途最广、品种最多的实验动物，繁殖力强，被广泛的用于药理学、毒理学的科研、生产和教学，如药物筛选、毒性试验、药物效价检定，避孕药、营养试验、多种疾病模型、免疫学、肿瘤、遗传性疾病等研究,大鼠（
5、Rat）,广泛用于药物的毒理试验、消化系统、心血管及老年病药物、抗炎药物研究，以及免疫学、内分泌学、神经生理、营养和代谢、传染病、肿瘤等方面的研究,豚鼠（Guinea pig）,对某些药物、毒物非常敏感，用于过敏性和变态反应、微生物感染试验。,兔（Rabbit）,广泛用于生殖、遗传药理学和毒理学、肿瘤、免疫学实验研究和教学,猫（Cat）,神经系统和循环系统较发达，可以耐受麻醉与脑的部分破坏手术，保持正常血压，常用于神经、循环和呼吸方面的实验,犬（Dog）,常用于基础医学、药理、毒理学、实验外科学、行为学、肿瘤学等方面研究,猴（Monkey）,主要用于传染病学、药理学和毒理学、生殖生理、口腔医学
6、、营养、代谢、行为学和高级神经活动研究及老年病、器官移植、眼科、内分泌病和畸胎学、肿瘤学研究,实验动物的分类,根据遗传特性分为近交系、杂交一代、封闭群、突变品系等按微生物控制标准又分为普通级（一级）、清洁级（二级）、无特殊病原体级（三级）和无菌级（四级）等一级：要求不带有动物烈性传染病和人畜共患病原体二级：除不带有普通动物应排除的病原体外，还不应携带对动物危害大和对科学实验干扰大的病原体三级：不带有普通动物、清洁动物应排除的病原体外，还应排除有潜在感染或条件性致病的病原体，以及对实验干扰大的病原四级：采用当前的技术手段无法在动物体表、体内检出一切其他生物体,实验动物的选择,同一品系的实验动物，
7、对同一刺激物反应存在着个体差异。年龄、体重、性别、生理状态和健康情况不同，往往导致对同一刺激的不同结果敏感性：幼年老年成年如氯丙嗪对1028周龄小鼠引起血糖升高，对老年小鼠引起血糖降低又如麦角新碱对56周龄的雄性大鼠有镇痛效果，对该龄的雌性大鼠无镇痛效果,药理实验的基本操作技术,实验动物的编号实验动物性别的辨别实验动物的处死法实验动物的捉持与常用给药方法实验动物给药量的计算,可用35苦味酸溶液（黄色）涂于大鼠、小鼠和兔皮毛不同部位以标号,1. 动物的编号,小鼠（左为雄性，右为雌性）,2. 动物性别的辨别,3. 实验动物的处死法,颈椎脱臼法常用于小鼠。用左手拇指、食指或镊子用力压住小鼠的后头部，
8、同时用右手抓住鼠尾用力向后上方牵拉，使之颈椎脱臼死亡。空气栓塞法常用于兔。用注射器将空气快速注入静脉使动物死亡。击打法可用于兔、大鼠和小鼠等。提起动物的尾部，用力敲击动物头部，或用用木锤打击头部，使动物死亡。断头法用于小鼠和大鼠。用剪刀将动物头部剪断，由于脊髓离断且大量失血，使动物死亡。,4. 实验动物的捉持与常用给药方法,双手法：右手提鼠尾，放在鼠笼盖或粗糙面上，向后方轻拉鼠尾，使小鼠前肢固定在粗糙面上。迅速用左手拇指和食指捏其双耳间颈背部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤和尾部，便可将小鼠牢固捉持,小鼠的捉持,单手法：小鼠置于笼盖上，先用左手食指和拇指抓住鼠尾，后手掌尺侧和小指夹住鼠尾，
9、然后左手拇指与食指捏住颈部皮肤,大鼠的捉持,捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手套，并应动作轻柔用右手捉住鼠尾，放在鼠笼盖上，向后轻拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可,兔的捉持,用一手抓住家兔的项部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐式姿势。,常用的给药方法,小鼠的给药方法,灌胃（ig）：将小鼠固定后，使颈部拉直，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，压其头部，使口腔与食道成一直线，沿上腭壁向鼠口腔的后下方轻轻插入食道。如遇阻力，可将针头抽出再插，以免刺破食管或误入气管。一般给药量为
10、0.10.3ml/10g体重,皮下注射（sc）：常在背部皮下。轻轻捏起背部皮肤，将注射针头刺入皮下，稍稍摆动针头，若容易摆动则表明针尖位于皮下。然后注入药液。一般给药量为0.050.2ml/10g体重,腹腔注射（ip）：左手固定动物，右手持注射器，从下腹部外侧，呈45角刺入腹腔，进针约35mm，一般给药量为0.10.3ml/10g体重,大鼠的给药方法,方法基本同小鼠。给药容量一般为：灌胃12ml/100g皮下注射0.51ml /100g腹腔注射0.51ml /100g肌内注射0.10.2ml/100g尾静脉注射0.20.5ml/100g,兔的给药方法,灌胃法：将兔置于固定箱内，用开口器插入兔口
11、，使兔舌伸直并固定之。另一人将胃管（可用导尿管代替）从开口器中央孔插入口内，再慢慢插入食管和胃，深1518cm。插管时感觉顺利，动物不挣扎也无呼吸困难出现，表示导尿管在胃内。将导尿管外端插入水中，如有气泡吹出，表示已误入气管内，应拔出重插。如未见气泡出现即证实在胃内。然后将药液注入。灌药量一般为10ml/kg体重,耳缘静脉注射：将家兔置于固定箱内，沿耳后缘拔去兔毛，用干棉球擦兔耳或用手指轻弹，使耳缘静脉扩张。 以手捏在耳根部压住静脉，使其充血，然后进针，见回血后注入药液。推注时如有阻力，局部肿胀变白，表明针头不在血管内，须重新穿刺。注射量一般为 0.22mlkg,5. 实验动物给药量的计算,药
12、物浓度一般用百分浓度（%）（w/v）给药剂量一般按mg/kg(或g/kg)计算。为方便，大鼠和豚鼠可按每100g计算，小鼠可按每10g计算给药剂量=药物浓度给药体积已知动物体重，给药剂量、药物浓度和给药体积（ml）中任意一个都可由其余两个推算而得,例题,小鼠体重22g，腹腔注射盐酸吗啡10mg/kg, 药物浓度为0.1%，应注射多少毫升?药物浓度：0.1%=0.1g/100ml=100mg/100ml=1mg/ml给药剂量：10mg/kg22g小鼠药量： 10mg/kg 0.022kg0.22mg 0.22mg 1mg/ml =0.22ml,溶液PH值对某些药物吸收速率的影响,实验二,【目的】
13、通过对不同PH值的阿托品溶液滴眼后 作用快慢的比较，了解溶液的PH值对弱碱（或弱酸）性药物穿透生物膜速率的的影响【动物】家兔1只【药品】1% 硫酸阿托品（PH9）1% 硫酸阿托品 （PH5）【器材】兔固定箱，滴管，测瞳尺，手电筒,阿托品可阻断瞳孔扩约肌的M 受体，使扩约肌松弛，导致瞳孔散大,M-胆碱受体激动剂,瞳孔括约肌收缩，引起缩瞳,阿托品是一个生物碱（弱碱性）,BH+ BH+根据Handerson-Hasselbalch公式 BH+ B 10 PKa PH,方法,1. 取兔1只，置兔固定箱内，给药前于适度的光照下，用测瞳尺测量两眼瞳孔的大小（以mm表示）。另用手电筒光照试验对光反射，即用闪
14、射光照射兔眼，如瞳孔随光照而缩小，即为对光反射阳性，否则为阴性,给药前 1min 2min 3min 4min 5min,瞳孔直径（mm）,2. 剪去兔眼的睫毛，在其左右眼结膜囊内分别滴药，观察两眼瞳孔变化，用直尺测量直径并测对光反射，直至两眼瞳孔不在扩大，对光反射消失，结果记入下表,对光反射,注意事项,1动物瞳孔大小可因光强不同而变化，故比较给药前后瞳孔变化，要在同一光强条件下比较2滴药液时，将兔下眼睑拉开，使其成杯状，并在结膜囊内保留30秒，再将手放开3测瞳时不能刺激角膜，测量角度须前后一致，否则将影响结果的精准度4观察对光反射只能用闪射灯光5.两药液的作用差异在滴药后25min最明显,经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量Study Constantly, And You Will Know Everything. The More You Know, The More Powerful You Will Be,写在最后,感谢聆听不足之处请大家批评指导Please Criticize And Guide The Shortcomings,结束语,讲师：XXXXXX XX年XX月XX日,
