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1、湖北宏中药业有限公司微生物基本知识培训,2014.08.26,主要内容,一 微生物的定义二 微生物的分类及形态三 微生物的生长规律四 微生物的分布规律五 微生物的相关操作六 微生物在制药企业的应用,一、微生物的定义,微生物:是一些肉眼难以看到的微小生物的总称。 注：1674年荷兰人列文虎克用自己制造的能放大 200-300 倍的显微镜观察了污水、腐败有机物中发现了许许多多肉眼看不见的微小的生物。,微生物特点,个体小：小于0.1mm，肉眼不可见。分布广,种类多(10万多种) ：自然界中到处都有，如水、空气、土壤等, 土壤中的数量最多。代谢强，转化快：例如：发酵乳糖的细菌在1小时内可分解其自重10
2、0010000倍的乳糖生长繁殖快：微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代,显微镜下的微生物,葡萄球菌,酵母菌(芽痕),棒状杆菌,大肠杆菌,弧状菌,链球菌,细胞,细胞是生物体基本的结构和功能单位。 已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。一般来说，细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成，即单细胞生物；高等植物与高等动物则是多细胞生物。,细胞组成,细胞主要由细胞核与细胞质构成，表面有细胞膜。 细胞有运动、营养和繁殖等机能。,二、微生物的分类及形态,按其结构、化学组成及分化程度可分为:原核类微生物:无完整的细胞核的微生物。如细菌、放
3、线菌、蓝细菌、立克次氏体、支原体、衣原体 真核类微生物:有完整的细胞核的微生物。如真菌（酵母菌和霉菌）、 原生动物、藻类非细胞类微生物:体积微小，没有细胞结构，能通过除菌过滤器。如病毒和朊病毒等,典型微生物介绍,细菌：是一类细胞细而短、直径一般为0.55.0m，结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛，生长最适温度为3035,放线菌：是原核生物的一个类群。因在固体培养基上呈辐射状生长而得名。主要以孢子繁殖，其次是断裂生殖。目前广泛应用的抗生素约70%是各种放线菌所产生。,酵母菌：酵母菌是一些单细胞真菌，可在缺氧环境中生存。用于酒类发酵,霉菌：是丝状真菌的俗称。在潮湿温暖
4、的地方，很多物品上长出一些。肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落，那就是霉菌。,病毒：是一类不具细胞结构，具有遗传、复制等生命特征的微生物,三、微生物的生长规律,微生物生长的条件1.营养物质：能源 碳源 氮源 无机盐 水 2.环境条件：温湿度 酸碱度 氧气 等培养基：培养微生物的营养物质。主要分为固体培养基和液体培养基。,菌落(colony)：生长在固体培养基上，来源于一个细胞，肉眼可见的细胞群体。1个菌落记着1cfu。,菌落（群体生长的表现）,微生物生长规律 （群体生长曲线）,微生物整个生长过程可以分为4个阶段：延滞期：细胞变大，细胞内RNA含量增高，培养基不丰富 时延滞期较长。对数期：细胞
5、分裂最快，代谢旺盛，生长速率由营养成分决定。稳定期：总体数量保持不变，开始产生代谢产物或开始形成芽孢。衰亡期：由于代谢毒素的积累，死亡数超过新生数。,四 微生物的分布规律,土壤中微生物分布,五 微生物相关操作,1 消毒与灭菌消毒：杀死物体上病源微生物的方法,并不一定能杀死所有 微生物细菌的芽孢。芽孢是细菌的休眠体，在适宜 的条件下可以重新转变成为营养态细胞，对热力干 燥、辐射、化学消毒等理化因素有强大的抵抗力。灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高， 包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原 微生物。 热力灭菌法(干热灭菌法与湿热灭菌法)辐射灭菌法(波长200300nm紫外线，
6、距离照射物不超过1m)过滤除菌法(除菌器孔径0.22m)超声杀菌法干燥与低温抑菌法,2. 培养基配置,3 无菌操作（接种）,4.微生物培养 设备：生化培养箱 摇床,5 菌种保藏改变其所处的环境条件，例如干燥、低温、缺氧、避光、缺乏营养等，令菌株的代谢水平降低，乃至完全停止，达到半休眠或完全休眠的状态，而在一定时间内得到保存。（1）低温冷藏法 斜面接种培养后置4冰箱保藏（2）低温冷冻保藏法 196液氮保藏 70低温冰箱 2030的普通冰箱 （3）干燥保藏法 冷冻干燥超低温保藏法,六 微生物在制药企业应用,1.微生物发酵制药 生产设备：发酵罐,2. 微生物检测 水的微生物检测 成品的微生物限度检测
7、 无菌室无菌度检测 原辅料微生物相关检测,3 微生物与GMP在药品生产过程中，由于受到各种因素的影响(人员、设备、物料、及环境)都可能导致药品受到微生物的污染，因此GMP对以上各种因素都提出了防止污染的基本要求。,人员与微生物,人员是洁净室中的最大污染源。人在代谢过程中会释放和分泌污染物，人体表面、衣服能沾染、携带污染物，在洁净室内的各种动作也会产生微粒和微生物。GMP对人员有着严格的要求。,设备与微生物,设备的卫生应从设备的设计开始，要求产尘少、脱落粒子少、易清洗、消毒和灭菌。设备与物料的接触面不得与物料反应，不得吸附物料，设备的内表面材质要平整、光滑，凹凸不平的区域不仅不易清洗，而且易存留残液等，它将成为微生物繁殖滋生的场所。管道的安装要避免批与批之间的交叉污染，管道要能定期清洗消毒。防范措施：建立相应的设备清洁保养制度及规程保持一贯的清洁状态，发现污渍、污水、残余物等应立即清除机修人员在线维修设备时，应注意操作尽量减少对药品产生污染对直接接触药品的设备进行清洁验证,1.合理的厂房布局及高效的空气过滤系统2.完善的洁净区日常卫生管理3.每周进行空气消毒(臭氧熏蒸)4.定期对洁净环境进行监测,环境与微生物,谢谢！,
