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1、负一楼动物房实验人员培训,建设原因：1. 笼位紧张2. PI增加3. 学生增加,保种区 区,饲养实验区 区,饲养实验区 区,一. 进入实验动物中心进行动物实验前必需履行的手续,二. 实验动物中心标准操作规范,三. 尊重动物的权利与福利,四. 常见违规现象和处罚措施,五. 动物数量登记,一. 进入实验动物中心进行动物实验前必需履行的手续,实验动物伦理委员会已经批准实验方案和使用动物的种类、数量等, 实验人员接受实验动物中心培训，并且考核合格具体考核程序如下：1.实验人员填写实验动物中心人员考核申请表并提前交到1005室同时提供有关资料学习 , 另外所有申请人员必须提前去129室询问下学院门禁卡是
2、否需要修改时间还有导师名字前加数字等问题否则考核通过后将无法授权。2.按照申请表相应日期到场接受实验动物中心老师的培训并且通过闭卷考试和现场模拟考试达到合格（闭卷考试分数不低于90分为合格，未通过者将继续学习并再另外安排时间重新考试，直至通过考核）。3.考核通过的人员将有培训号，进入资格将直接授权在学院门禁卡上。(注意:如果是生命学院本科生或者是别的学院学生都需要在申请表上有导师签名后再递交) 。,培训号： ,进动物前已经预先签订并提交动物实验合作协议,提前！一周或3天提交,需要导师签字,消毒液,笼具、饮水、垫料,动物的来源,a. 从国内新引进的动物必须从具有实验动物生产许可证的大型实验动物供
3、应基地购买，每批动物都附有实验动物质量合格证，可进入负一楼新动物房,区饲养或实验。,b. 从国外知名实验动物机构（如Jackson实验室）引进动物，必须附有该批动物的animal health report才可进入负一楼,区饲养。,二. 实验动物中心标准操作规范,获得授权,入口刷卡,换上鞋套,更衣室更衣,洁净通道,饲养室或实验室,离去通道,缓冲间更衣,出口换鞋,出去,1.人员进出负一层流程,(1).所有人员必须经实验动物中心培训、考核，获得授权后方可进入。(2).人员进入：在门口刷卡进入后脱鞋，穿上鞋套，进入走廊。在、或区的“人员入口”(一更门口)刷卡，进入“男更衣室”或“女更衣室”，穿上连体
4、洁净服和手套等，进入“洁净通道”。进入“饲养室”或“动物实验室”进行操作。(3).人员出去：工作结束后，着连体洁净服，从“饲养室”或“动物实验室”进入“离去走道”，从“缓冲间”出去。在“缓冲间”出口处脱下连体洁净服和手套等，返回走廊，在门口穿上自己鞋子等，走出实验动物中心。,各区一更门口刷卡,刷卡,脱衣,a.在门口的鞋柜处脱下鞋子,放入鞋柜，穿上鞋套。,b. 尽量穿单薄的衣服进入动物房,衣柜无锁,请自己保管好物品。,更衣室空间小,c. 在更衣室按下列顺序穿戴:一更室取出超净服，在二更室超净服放桌上后手消毒（I区、区男更衣室是拿超净服后手消毒再进二更），站在红色警示线靠门一侧打开超净服外包装，戴
5、帽子,戴口罩,戴手套,取出超净服并在有箭头洁净一侧上方抖开，抬一只脚穿入超净服并踏到有箭头的洁净的一侧随后再穿好另一只脚并双脚站在有箭头的一边注意不要再走回没有箭头的红色线进门的一边,最后用橡皮筋绑住袖口(注意：10楼，11楼穿戴程序中没有手消毒和红色警示线）,d. 进入实验室或饲养室进行相应操作。,e.经离去通道进入缓冲间3，脱下超净服和口罩帽子等,注意:,进出时不得同时开启双门房间的两扇门口罩、帽、超净服、手套、鞋套要穿戴严实，尽量不露出自己的衣物和皮肤。动物房内有固定电话，禁止使用手机。,动物,大型物品入口喷雾消毒,饲养室,离去通道,出去,2. 动物进出流程,(1). 进入动物房的动物必
6、须从正规的、有资质的实验动物供应基地购买，每批动物进入都必须具备实验动物质量合格证。(2). 动物必须经妥善包装，动物包装箱破损或滤膜破损者不得进入洁净区。(3). 动物进入：将动物包装箱从外走廊端放入“大型物品入口”，用百毒杀溶液喷雾消毒，将包装箱外表面喷一遍即可。从“洁净通道”端进入“大型物品入口”拿到动物包装箱，进入“饲养室”，“饲养室”内的超净工作台需预先紫外灯照射15分钟。在超净工作台内打开动物包装箱，取出动物放入饲养盒，加饮水、饲料，悬挂卡片等。将饲养盒装上IVC笼架。废弃的动物包装箱推入“离去通道”，待工作人员处理。(4).动物传出：将动物连同笼盒从“离去通道”传至外面。动物一旦
7、敞露于非洁净区则不能再进入动物房。,注意： a.引进的小鼠必须是SPF级动物；且该单位必须有该种动物的生产许可证；同时附带实验动物质量合格证以及动物的品系、性别、年龄等信息经实验动物中心工作人员审查后方可准备进入动物房。,b.动物运输时必须有合格的运输盒,清洁级和SPF级的动物运输盒必须以高效滤膜封闭窗口，同时以胶带封口，封口破损或滤膜破损者不能进入屏障系统。,a. 将包装箱移入用紫外灯预先照射15min的超净工作台中b. 在超净台内去封条并用消毒过的大镊子或用75%酒精喷洒过的带着手套的双手，捏住动物尾根,将动物移入IVCc.加饲料和饮水后将IVC笼盒放在IVC架上固定位置，最后填写并悬挂卡
8、片,注意卡片上最后一行需要标记位置,请按照笼架上横坐标和纵坐标相对应的字母进行标记,这样每个笼盒都有自己的位置不至于乱放,方便同学做实验和工人师傅换笼,外来引进动物放进IVC程序：,动物拿出实验的特殊情况：11楼进行辐照：动物始终处于辐照筒中，可以继续放到负一楼、区饲养。10楼小动物成像仪检测：运输过程中始终放在IVC笼盒内，检测时短时间敞露在屏障环境中。 3天内的短期观察不再放到负一层动物房内饲养，如果长期观测可以继续放到10楼动物房DIRTY ROOM饲养。10楼现设有DIRTY ROOM,动物一旦进行了敞露在外界的实验，则不能放回负一层动物房饲养！,注意:,a. 包装盒或滤膜是否破损，如
9、有破损绝不能进入动物房，将有动物房工作人员予以监督。 b. 注意动物进入时的卫生消毒。,小型物品,传递窗紫外线消毒,饲养室实验室,离去通道,出去,需高压灭菌物品,双扉高压灭菌器,饲养室实验室,离去通道,出去,仪器设备,大型物品入口 紫外线消毒,饲养室实验室,离去通道,出去,3.物品进出流程,(1). 所有物品进入洁净区内都要经过消毒、灭菌。物品进入通道有三：“传递窗”、“大型物品入口”和“高压灭菌器”。洁净物品传出通道有二：“传递窗”和“离去通道”。(2). 所有物品必须走单独的进出通道，不得跟随人员进入。(3). 以下列举常用物品进入、传出程序，其他物品可参照执行。小型物品如注射器和手术器械
10、进入：在“外准备间”放入“传递窗”紫外灯照射15分钟后，从“内准备间”拿入。小型物品的拿出：从离去通道跟随人员一起出去。细胞或需要避光的药物进入：通过75%酒精擦拭容器表面后经“传递窗”进入。细胞或药物容器拿出：从离去通道跟随人员一起出去。小型仪器的进入：从外走廊推入“大型物品入口”，经里面的紫外灯照射30分钟，从“洁净走道”拿入。小型仪器的传出：从“动物实验室”推入“离去通道”，从“缓冲间”拿出。,紫外消毒,注意：不准将物品直接从缓冲间和更衣室随人带入动物房！,IVC(Individually VentilatedCages)是独立通风笼盒的简称.它的特点是具有一定的密闭性,同时让经主机中H
11、EPA过滤的洁净空气流入盒内,使盒内保持正压,减少了可能的感染来源,适合于饲养SPF级动物,以及一些免疫缺陷动物,IVC的操作要点和操作程序,操作要点: 对IVC中的动物进行的一切操作均在动物超净工作台中进行,操作程序：a.使用超净工作台前15min用75%酒精喷雾工作台内表面，同时放入经表面消毒的各种灭菌物料和实验用品，并打开紫外灯和风机 b.15min后用75%酒精喷雾IVC的外表面、工作车、双手手套，将笼盒移入工作台后进行换窝，喂饲，喂水，实验等工作,注意:,把IVC笼盒放回笼架固定位置的时候要检查下笼架上红色指示物是否消失。,4.动物处死、解剖和取样,10楼或11楼在1004房间或动物
12、房内实验室进行。,不准带到PI实验室解剖和取样!特殊实验需向实验动物中心申报（如动物在大型仪器上的活体观测）,负一楼在动物房内实验室进行或到1004房间。,小动物麻醉机,二氧化碳处死装置,负一楼动物房配备,冷冻离心机,冰箱,动物尸体处理,动物尸体和动物器官应和实验卡或繁殖卡一起密封在塑料袋中，塑料袋口要扎紧。 放到动物太平间的冰柜中。,动物实验废弃物品的处理,垫料等废弃物与动物笼盒一起从离去通道出系统小的注射器连同针头套上套子放入空的酒精瓶,大的注射器的针头单独套上套子放入空的酒精瓶,针管可扔到小垃圾桶,其他小刀片等尖锐物品也放入空的酒精瓶以防刺伤工作人员,酒精瓶满后盖上盖子待工作人员清理动物
13、房内无排水系统,液体废弃物请传出系统后再处理废弃的动物包装盒从灭菌系统推入离去通道传出去口罩、手套、帽子、鞋套为一次性物品,用过后就应丢弃,灭菌工作服可放在缓冲间,中心工作人员会对其进行处理。,The Three Rs: Replacement: Substitution of non-living material (i.e. tissue cultures) or methods (i.e. computer modeling) for animals, or substitution of a lower species, which might be less sensitive to
14、 pain and distress, for a higher species. For example using brain tissue slices in culture for studying neuro-epileptic agents. Reduction: Reductions in the numbers of animals used to obtain information as achieved by statistical analysis. Refinement: Decrease in the incidence or severity of pain an
15、d distress in those animals that are used. For example using inhalant anesthesia instead of injectable so that animals recover consciousness more rapidly.,三. 尊重动物的权利与福利,四.常见违规现象以及惩罚措施,常见违规现象：未经实验动物中心工作人员审核就直接引进动物，所有动物进入必须有工作人员在场审核签字后才能进入。,2. 有进入资格的同学带领没有资格的同学进入，或一人刷卡多人进入。,3. 被取消资格的同学取别人的卡进入。,4. 每笼的小
16、鼠超过5只（哺乳期除外,哺乳期为4周）。,5. 没有每2天探视动物一次。,6. 将动物拿出试验后又放入动物房饲养（特殊试验除外，如小动物成像仪长期观测试验，观测后可放于10楼动物房内饲养，但不能放到负一楼动物房饲养）。,7. 小物品未经传递窗消毒进入动物房。,8. 进入更衣室未按正确顺序穿戴或者未穿洁净服进入动物房。9.把IVC笼盒带出动物中心。10.有咳嗽、打喷嚏、呕吐、腹泻症状者及皮炎、传染病活动期患者仍然进入动物房。,惩罚措施,1.人员第一次违规应做出深刻检讨，并从发现当天起取消进入动物房实验资格2周，到动物中心义务劳动2周。2.人员第二次违规从发现当天起取消进入动物房实验资格2个月期满后重新参加实验动物中心培训考核直至考核通过。3.人员第三次违规从发现当天起，无限期取消进入动物房实验资格。对于接到动物中心通知未及时整改的，动物中心有权自行处理，对于其它特殊违规情况将视其情节严重程度给予相应惩罚,15,
