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1、,冬虫夏草知识介绍,冬虫夏草,什么是冬虫夏草？,什么是冬虫夏草？,冬虫夏草是一种昆虫和真菌的复合体。被寄生的虫体是虫草蝙蝠蛾的幼虫。寄生的真菌是冬虫夏草菌（cordyceps sinensis (BerK.)Sacc.），它属于真菌门，子囊菌纲，肉座目，麦角科，虫草属，虫草种。,8月左右雪线以下，阴坡半阴坡,5月5-15日,8-9月间3-10摄氏度,子囊孢子,感染蝙蝠蛾幼虫,菌核（10月到次年五月,菌丝束）,子座,7月下旬,子囊成熟,分生孢子,长出牙管,僵虫,冬虫夏草的有性型生活史,形成僵虫过程,一公斤冬虫夏草逐年价格,八十年代以来冬虫夏草价格上升趋势图,天然冬虫夏草生长在海拔较高的山顶部位，
2、如青藏高原和云贵高原海拔30005000米高原上，雪线下的山地阴坡、半阴坡的灌木丛和草丛中。,冬虫夏草的生长环境,冬虫夏草分布很不均匀。但根据学者的考察，认为它主要分布川青藏高原峡谷，产量最多的是青海、四,川和西藏，其中冬虫夏草质量较好的是青海的玉树州。,冬虫夏草的分布,地下虫体部分六月份开始尾部渐渐变空，失去药用价值。,所以一年中只有五月中旬到六月中下旬的二三十天时间是挖冬虫夏草的季节。,冬虫夏草的采集,冬虫夏草主要通过露出地面的子座识别。采摘时通常在子座的周围挖一个坑，将虫体包含在内，连土一起取出，破坏大量的植被，掠夺式采挖生态环境破坏极其严重。国家制定实施了有关虫草资源采集管理的相关法规
3、。,冬虫夏草的采集,冬虫夏草的采集,冬虫夏草的采集,冬虫夏草的药用价值,天然冬虫夏草性温、味甘，归经入肺、肾二经。,历部 中华人民共和国药典记载其功用为：补肺益肾，化痰、平喘，主治久咳虚喘，劳嗽咯血，阳痿遗精，腰膝酸软，食欲不振，老人畏寒，病后久虚不复，及治诸虚百损等病症。,冬虫夏草的药用价值,古代70多部中药学文献把冬虫夏草的功用归纳为:能阴阳并补，治劳嗽膈症，诸虚百损；功与人参、鹿茸同，但药性温和，老少病虚者皆宜食用。,同时，冬虫夏草由于仅分布于中国，又是数百年来我国和亚洲人民视为与天然人参、鹿茸相媲美的名贵滋补中药材，享有极高的声誉。新中国建立以来，我国有200多部药书详细记载了冬虫夏草
4、的药效与用途。,冬虫夏草的药用价值,20世纪以来科学研究证实虫草的药用部位是菌丝体,冬虫夏草的药用部位,冬虫夏草含有的有效成分有：虫草酸（甘露醇）、虫草素（腺苷）、虫草多糖、腺嘌呤、尿嘧啶、多球壳菌素、维生素B1、B2、B12、E等，还有人体必需的微量元素锌、锰、钾、磷等，以及多种必需的氨基酸等。,冬虫夏草的有效成分,冬虫夏草能人工栽培，但价格非常昂贵，技术难度大,冬虫夏草能否人工栽培？,冬虫夏草菌的生活史,分生孢子梗直接从子囊孢子上长出顶生分生孢子,生活史：全型 有性型无性型,冬虫夏草无性型菌的分离和鉴定难点,温度的要求,冬虫夏草产区分布海拔3000-5000米青海玉树州杂多县（4600米）
5、,为何冬虫夏草生长在如此高海拔地区呢？冬虫夏草菌喜欢低温有关寄生虫（蝙蝠蛾幼虫）的分布低温、高湿、光线和特殊缺氧条件,温度的要求,冬虫夏草无性型菌的分离和鉴定难点,培养基的要求,冬虫夏草菌是特异性寄生的真菌:,自然条件下蝙蝠蛾幼虫的体液是冬虫夏草菌最喜欢的培养基。,在高海拔地区从未发现冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾幼虫以外的别的昆虫上，如地老虎等。,冬虫夏草无性型菌的分离和鉴定难点,表面消毒,新鲜冬虫夏草表层消毒很难掌握！,极易污染杂菌5月化冻，子座伸出(5CM)，僵虫体表层组织疏松，体表杂菌大量进入虫草组织体内。,因此，分离培养时，随便怎么消毒总会有大量杂菌先于虫草菌长出。,冬虫夏草无性型菌的分离和
6、鉴定难点,8月下旬到9月中旬僵虫已经形成，用僵虫来分离冬虫夏草菌，成功率一般都可超过90。,最佳分离材料是虫草还是僵虫期？,华东为什么能得到真正的菌种,要得到真正的冬虫夏草菌种，关键是在于分离菌种的场所、温度和方法。,目前世界上已发现同属“虫草属”的虫草已有三百五十种之多，其中在中国已发现过六十余种，包含：,冬虫夏草和虫草,冬虫夏草（C.sinensis） 北冬虫夏草(C.militaris)大团虫草（C.ophioglossoides） 亚香棒虫草(C.hawkesii) 古尼虫草(C.gunnii) 珊瑚虫草(C.martialis)镰刀状虫草(C.falcata) 泰山虫草(C.tais
7、hanensis）山西虫草(C.shanxiensis) 凉山虫草(C.liangshanensis)新疆虫草(C.gracilis) 香棒虫草(C.barnesii)等,冬虫夏草和虫草,冬虫夏草和虫草,冬虫夏草和虫草,金龟子虫草,黄蜂虫草,大团囊虫草,珊瑚虫草,虽然已发现的品种繁多，但其中具有药用价值的品种却并不多；有些还具有毒性，错误服用后可能会直接破坏人体的肌体功能。,冬虫夏草和虫草,购买冬虫夏草时要注意外观色泽，表面深黄色至黄棕色。,冬虫夏草的真伪,有些空壳冬虫夏草，提取有效成分后再出售，这种补品内容物少，外观不饱满，掰开后也不难鉴别。,掰开细看，还可排除虫草中插入的铁丝等异物。,断面
8、为类白色，气微腥，味微鲜。以完整、虫体丰满肥大，外色黄亮、内色白者为佳。,不同品质的冬虫夏草混合。冒称高品质冬虫夏草。,不法伎俩,销售提取过有效成分的冬虫夏草。,以次充好。断的冬虫夏草中插入铁丝、牙签等异物。,用面粉、玉米、石膏等材料加水后，用特制模具压制成冬虫夏草形状。然后上色晾干，冒充冬虫夏草进行销售。,蝙蝠蛾 (Hepialus spp.) 幼虫上的一种子囊真菌。真菌界Kingdom Fungi子囊菌门 (Ascomycota)子囊菌纲 (Ascomycetes)（粪壳菌亚纲）肉座菌目 (Hypocreales)麦角菌科 (Clavicipitaceae) 虫草菌属 (Cordyceps
9、 (Frey) Link.) 之一种Cordyceps sinensis (Berkeley) Saccardo, Michelia 1: 320 (1878).Sphaeria sinensis Berkeley in Hooker, Lond. Journ. Bot. II:207 (1843).,冬虫夏草菌,法则双名法 合格发表优先律 冬虫夏草头孢菌不合格发表 （专利） 蝙蝠蛾多毛孢 不合格发表（陈庆涛） 中华束丝孢 迟后发表 （印院士） 中国被毛孢 Hirsutella sinensis Liu, Guo et al.,植物学命名法则,莫明和, 迟胜起, 张克勤 2001,中国被毛孢=
10、冬虫夏草菌无性型,通过个体发育生物学,刘锡琎，真菌学报8（1）,谁是真正的冬虫夏草菌种？,天然冬虫夏草子座与人工冬虫夏草子座的形态完全一样,生活史一致,在培养基中长出的人工子座,生活史一致,蝙蝠蛾多毛孢菌与天然冬虫夏草一致的生物学证据,生活史一致,氨基酸分析仪,性状比较,基因决定性状,物种由DNA决定,分子水平一致,为了证明冬虫夏草的无性型的确切种类, 采用分子生物学手段, 以rDNA 18S 和25S 之间的转录间隔区( ITS 区) 为分子指标, 通过对冬虫夏草及相关种类有性和无性阶段材料的ITS 区序列进行比较分析, 从基因水平对冬虫夏草的无性阶段进行分子鉴定 。,rDNA gene 结
11、构模式图,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,细菌,古菌,真核生物,保守区(相似性70%以上),高变区,16S,16S,ISR,23S,ISR,23S,17S-18S,5.8S,ITS1,ITS2,25S-28S,材料和方法,分子水平一致,结果和分析,分子水平一致,结果和分析,分子水平一致,（赵锦等，1999；刘作易，1999；李增智等，2000；王宁等，2000；黄勃，2001；Chen et al., 2001；Liu et al., 2001；章卫民等，2002）,通过分子系统生物学,（赵锦等，1999；李增智等,2000；黄勃,2001）,通过分子系统生物学,中科院微
12、生物研究所开展了冬虫夏草及其相关类群的分子系统学分析的课题（创新经费赞助(编号0110)）。由魏鑫丽博士、印象初院士、郭英兰研究员、沈南英研究员、魏江春院士进行了该课题。,分子水平一致,实验背景,同年10月22-24日中国菌物学会理事会在上海召开期间，魏江春院士与李增智、梁宗琦、郭英兰诸先生分别交谈了上述学术争议问题。,药用真菌的物种科学名称是否准确,是一个国家真菌科学水平的标志,更是能否保护我国自主知识产权的关键。,中华束丝孢与中国被毛孢是否等同？印象初院士于2001年10月18日上午约魏江春院士交谈上述问题，建议魏江春院士能主持澄清上述学术争议问题。,中国科学院真菌与地衣系统学开放实验室1
13、990年的学术委员会年会上立项问题。,Hirsutella hepiali chen et shen,sp.nov 中国被毛孢（百令）Paecelonvyces hepiali 蝙蝠蛾拟青霉（金水宝）Mortierella hapialia 蝙蝠蛾被孢霉（至灵）Cephalosporium dongchongxiacao 虫草头孢菌（宁心宝）等等。,市场上冬虫夏草菌种很多，也很混乱,人工虫草,利用PAUP分析6条引物的RAPD图谱所得的树型图（Distance method；bootstrap=1000；UPGMA），节间数字代表bootstrap值(50%以下未显示)。,分子水平一致,冬虫夏
14、草及其相关类群的分子系统学分析中采用DNA随机扩增多型性（RAPD）分析。分析表明：冬虫夏草菌、中国被毛孢(H.sinensis)和中华束丝孢(S.sinensis)的各菌株为同一物种，其相似率为99%。,分子水平一致,PCR扩增、测序及分析：通过PCR从供试菌株总DNA中进行核rDNA ITS区 (ITS1-5.8S-ITS2)碱基序列的扩增；引物选用ITS4和ITS5 (White et al., 1990)；PCR产物由上海博亚和基康公司测序。测序结果利用软件DNAMAN 4.0进行比对；利用Mega 2进行系统学分析（Kumar et al., 2001）；采用Kimura 2-parameter模式，存在缺失时成对删除；构建系统关系树采用NJ 法，重复运算1000次（bootstrap=1000）。,nrDNA间隔区(ITS)序列分析,中间省略,分子水平一致,分子水平一致,冬虫夏草及其相关类群的分子系统学分析中采用核糖体RNA基因(nrDNA)间隔区(ITS)碱基序列分析。分析表明：蝙蝠蛾拟青霉菌Cs-4并非冬虫夏草及其无性型。,分子水平一致,冬虫夏草无性型同种异名,中国被毛孢 Hirsutella sinensis Liu, Guo, Yu et Zeng,The END,谢谢!,
