常用光学显微镜课件.pptx

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1、常用光学显微镜,常用光学显微镜,常用光学显微镜,2,一、普通生物显微镜二、荧光显微镜三、暗视野显微镜四、倒置显微镜五、相衬显微镜六、偏光显微镜,返回目录,常用光学显微镜 2一、普通生物显微镜返回目录,一、普通生物显微镜,普通生物显微镜具有不同规格的物镜、目镜、聚光镜和光源等光学构件,它们通过镜筒、物镜转换器、载物台、调焦装置和镜座等连接、固定和调节,放大物体,观察物体的细微结构。根据目镜结构的不同,有单目和双目之分。目前检验工作中普遍使用双目显微镜,它有两个目镜,可用双眼同时观察。使用双目显微镜时应调整目镜间距以适应观察者瞳距,在重合视野中观察物像。,3,返回目录,一、普通生物显微镜普通生物显

2、微镜具有不同规格的物镜、目镜、聚,一、普通生物显微镜,4,双目显微镜,单目显微镜,返回目录,一、普通生物显微镜4双目显微镜单目显微镜返回目录,二、荧光显微镜,荧光显微镜是以紫外光或蓝紫光作为激发光源来照射待检标本,通过荧光物质,放大观察细微结构。激发光源照射标本,滤色系统和光学系统形成标本的荧光放大物像,在暗场下直接观察或摄像观察。荧光显微镜可观察固定的标本,也可观察活体荧光染色的标本。 使用要点:规范操作;观察的对象应有荧光;光路中不能含有荧光杂质;正确使用激发汞灯;观察者做好眼睛防护。,5,返回目录,二、荧光显微镜 荧光显微镜是以紫外光或蓝紫光作为激发光源来照,落射式荧光显微镜,6,激发光

3、源(汞灯),激发光选择滤片,阻断滤片,分色镜,照明光源,标本,返回目录,落射式荧光显微镜 6激发光源(汞灯)激发光选择滤片阻断滤片,三、暗视野显微镜,暗视野显微镜的聚光镜中央有档光片,使照明光线不直接进入物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能观察到线距离小于0.1m的微粒(普通光镜的分辨极限是0.2m )。 暗视野显微镜观察到的物像只是物体的轮廓,不能分辨细微结构。,7,返回目录,三、暗视野显微镜 暗视野显微镜的聚光镜,暗视野显微镜,8,暗视野显微镜照明方式,返回目录,暗视野显微镜8暗视野显微镜照明方式返回目录,四、倒置显微镜,设计

4、倒置显微镜的目的是为了增加工作距离,观察处于培养瓶或培养皿中的活体标本。倒置显微镜的物镜与照明系统颠倒,物镜在载物台之下,照明系统在载物台之上。,9,物镜,目镜,聚光镜,返回目录,四、倒置显微镜 设计倒置显微镜的目的是为了增加,五、相衬显微镜,人眼通过颜色差异感知可见光波长变化,明暗不同感知可见光波的振幅变化。但光波的相位变化不能被肉眼观察到。光波通过透明的细胞时,虽然细胞细微结构的折射率和厚度不同,但这种不同仅使光波的相位发生变化,人眼无法观察。相衬显微镜就是利用光的衍射和干涉现象,把相位差变为振幅差,观察无色、透明、活细胞中的微细结构。相衬显微镜和普通显微镜的区别是用环状光阑代替可变光阑,

5、用带相位板的物镜代替普通物镜,从而把看不到的相位差变为可观察的明暗(振幅差)变化。,10,返回目录,五、相衬显微镜 人眼通过颜色差异感知可见光波长变化,明暗不同,相衬显微镜原理,11,返回目录,相衬显微镜原理 11返回目录,六、偏光显微镜,光是一种电磁波,电磁波是横波。 通常光源所发光的振动面在各个方向上均匀分布的。这种光叫做自然光。光的偏振现象可以借助于实验装置进行观察,P1、P2是两块同样的偏振片。通过一片偏振片p1直接观察自然光(如灯光或阳光),透过偏振片的光虽然变成了偏振光,但由于人的眼睛没有辨别偏振光的能力,无法察觉。如果我们把偏振片P1的方位固定,而把偏振片P2缓慢地转动,就可发现

6、透射光的强度随着P2转动而出现周期性的变化,而且每转过90就会重复出现发光强度从最大逐渐减弱到最暗;继续转动P2则光强又从接近于零逐渐增强到最大。,12,返回目录,六、偏光显微镜 光是一种电磁波,电磁波是横波。 通常光源所发,六、偏光显微镜,偏光显微镜是利用光的偏掁特性,对具有双折射性(即可以使一束入射光经折射后分成两束折射光)的晶体、液晶态物质进行观察和研究的光学仪器。,13,偏光显微镜可以观察到纤维丝、纺锤体、染色体、活细胞的结晶或液晶态的内含物等的细微结构,可以分析细胞、组织的变化过程。例如,正常细胞对偏振光是左旋性的,许多肿瘤细胞却是右旋性的,通过偏光显微镜观察标本的旋光性可以初步鉴别正常细胞与肿瘤细胞。偏光显微镜更为广泛用于药物化学、无机化学中各种结晶物质分析。,返回目录,六、偏光显微镜 偏光显微镜是利用光的偏掁特性,对具有双折射性,偏光显微镜原理及结构,14,返回目录,偏光显微镜原理及结构 14返回目录,

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