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1、临床微生物学检查,1,引 言,微生物的分类？原核细胞型：细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体。 真核细胞型：真菌 、原虫。非细胞型：病毒和亚病毒。“一虫二毒三菌四体”,2,临床微生物学检查,利用微生物学相关检验技术，快速、准确检验和鉴定临床标本中的病原微生物，并对引起感染的微生物进行药物敏感性试验，指导临床合理使用抗菌药物，为临床对感染性疾病诊断、治疗、流行病学调查研究以及医院感染控制等提供科学依据。,3,崇德 精医 博爱 奉献,主要内容,4,一般原则,在感染的早期或急性期、使用抗生素前或伤口局部治疗前采集。所有标本的采集、运送和保存应在无菌操作、防止污染的原则下进行。采用无菌容器
2、，容器应密封、防止渗漏，不可混入消毒液或添加防腐剂。及时送检：常规细菌学检验室温中不超过1h，如不能及时送检，4保存不能超过8h；特殊细菌检验如血培养、脑脊液、生殖道标本不可以冷藏。,5,血培养,1.采血指征：发热(38)或低温(36)，寒战，白细胞增多，c反应蛋白升高，严重的局部感染如脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、腹部术后感染等，导管介入或血液透析患者；2.采血时间：使用抗菌药之前，对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.51h采集血液，或于寒战或发烧后1h内进行；3.采血部位：推荐肘静脉，疑似细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉为好，避免从导管采集；多次采血时，应在不同部位进行。,
3、6,血培养,4 采血量：成人需氧和厌氧各1瓶为1套，58ml/瓶，短时间内采集23套；儿童仅需氧瓶，采血量15ml;5 采血方法：皮肤消毒：75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上；1%2%碘酊作用30s或10%碘伏60s，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上；75%酒精脱碘，待干。培养瓶消毒：70%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s，待干。用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头直接注入血培养瓶，轻轻颠倒混匀以防血液凝固。,7,8,1 采集指征：,尿液标本,有典型的尿路感染症状；,肉眼脓尿或血尿；,尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性；,不明原因发热，无其他局部症状；,留置导尿管的患者出现
4、发热；,膀胱排空功能受损；,泌尿系统疾病手术前。,9,尿液标本,2 采集时机：用药前、输液或饮水前，并使尿液在膀胱内停留一夜或至少4h以上；3 采集方法：清洁中段尿：用肥皂水清洗尿道口或外阴部，排尿时弃去前段尿，收集中段尿10-20ml送检；留置导尿管：建议更换导尿管后采集,10,无菌体液,脑脊液标本立即保温送检或床边接种（引起脑膜炎的病原体脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌等抵抗力弱）建议：同时送血培养胸水、腹水和心包液含菌量少宜采集较大量标本或注入血培养瓶送检。注意：厌氧菌感染常见,11,化脓及创伤感染标本,先用无菌生理盐水清洗伤口及病灶表面的杂菌；采取伤口及病灶基底部或边缘部（接近肉芽组织）的分泌
5、物；脓肿标本以无菌注射器抽取为好，注意排尽注射器内空气。注意：请务必注明采集部位,12,呼吸道标本,1 咳痰生理盐水漱口，咳出深部痰合格的痰标本:扁平上皮细胞10个/低倍视野且WBC25个/低倍视野。2 气管吸出物气管插管患者出现肺炎症状时3 支气管肺泡盥洗液(BALF),当下呼吸道感染患者伴有高热症状时建议同时做血培养！,13,崇德 精医 博爱 奉献,主要内容,14,一、直接显微镜检查,形态学检查是微生物检验的重要方法之一，根据其形态、结构和染色反应性等，做出快速初步诊断，为临床治疗提供依据。,15,肺炎链球菌,16,念珠菌,七夕知何夕云是牛女期人间轻别离微界念真心（菌）丝作鹊桥引子为河汉星
6、相偎复相依无情胜有情图片来自北京医院陈东科老师,17,新型隐球菌,18,二、分离培养与鉴定,大多数细菌均可以通过人工方法培养，而衣原体和病毒的分离培养往往需要活组织、鸡胚、特殊细胞株及动物接种。,19,肺炎链球菌,图片来自北京医院陈东科老师,20,白假丝酵母菌,21,新型隐球菌,22,三、抗原检测,沙眼衣原体抗原检测,23,四、抗体检测,获得性免疫缺陷综合征（Acquired immune deficiency syndrome，）2015年世界艾滋病日主题：“行动起来，向零艾滋迈进合力抗艾，共担责任，共享未来”。,24,1 初 筛,检测方法：酶联免疫试验（ELISA）免疫胶体金快速试验报告方
7、式：筛查试验（-）“HIV抗体阴性” 筛查试验（+）“HIV抗体待复查”,25,免疫胶体金快速试验,26,2 复 检,初筛（）标本要求：原标本重新采集标本1份 （两份标本同时送检）检测方法：另换筛查试剂盒,27,3 确 认,检测方法：免疫印迹实验（WB）报告方式：HIV抗体确认实验（）：“HIV抗体阳性”,28,五、核酸检测,1、乙型肝炎病毒核酸检测2、丙型肝炎病毒核酸检测3、人乳头瘤病毒核酸检测3、衣原体核酸检测4、淋球菌核酸检测5、单纯疱疹病毒核酸检测6、结核分枝杆菌核酸检测,29,崇德 精医 博爱 奉献,主要内容,30,抗生素敏感试验-K-B法,31,抗生素敏感试验-MIC法,32,谢谢聆听！,33,
