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1、结核菌素,结核菌素简称结素，是由结核杆菌滤液制成的一种试剂，即用人型结核杆菌培养后加热杀死结核菌所提炼的浓缩液，不含任何死菌或活菌，在临床和结核病流行病学调查中广泛应用。,一、目前我国常用的结核菌素种类,1、旧结核菌素（Old Tuberculin OT）： 是从生长过结核菌的液体培养基中提炼出来的结核菌代谢产物.它由结核菌的菌体全部和培养基等成分构成，主要有：（1）菌体蛋白、多糖、核酸、脂类；（2）菌体代谢产物；（3）培养基成分。试验中易产生非特异性反应。80年代前使用，现在已不用。,2、结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）： 结核菌纯蛋白衍生物，它是将旧结素过滤后，再用硫酸铵等加以沉淀而获得的纯
2、度较高的结核杆菌分泌蛋白质。 其制作过程：菌株培养灭菌、滤过浓缩盐析、脱盐干燥、保存分装。 我国从人型结核菌制成PPD（PPD-C），又从卡介苗制成卡介菌纯蛋白衍生物（BCG-PPD），0.1ml为5IU用于临床诊断。 应用中特异性反应更加敏感和准确，90年代后至今一直在使用。,二、结核菌素试验方法,(一）、试验方法分类皮上划痕法（Pirquet）软膏粘贴法（Moro）皮上多刺法（Heaf）皮内注射法(C.Mantoux,（二）、皮内注射的部位和方法 选择1ml一次性注射器，在左前臂掌侧前1/3中央皮肤处，用75%的酒精消毒，注射时绷紧皮肤，针管平放，注射器刻度和针孔斜面一致向上，浅浅地与皮肤
3、平行刺入皮内，不见针孔即可，将0.1mlPPD缓慢注入皮内，剂量准确时，局部可出现直径6-8mm大小的橘皮样皮丘。 不能把皮丘的大小作为衡量剂量的指标（注意：在注射前应询问患者以前曾否做过该试验，如做过应问清时间、部位，以免引起促进反应。同时了解是否存在接种禁忌症。）,三.结素试验禁忌症：a.患有重症或热性疾病，体温超过37.5度，及各种传染病的恢复期，结素试验可能发生不良反应，使其病情加重。b.有器质性疾病如：心血管、肾脏病、胃肠病的急性期。C.有过敏反应史、特别是预防注射过敏史和免疫缺陷的人员。d.明显营养不良，体弱和严重衰弱者。e.正在使用激素等免疫抑制剂治疗者。f.在既往结素试验中出现
4、水泡、坏死等非常强烈反应者。g.患有弥漫性皮肤病者或注射部位有皮肤病。家族皮肤病史。h.有癫痫、癔病等神经系统疾病。,四.结果观察 试验结果需在皮试后4896小时观察，我国通常规定在皮试后72小时为观测反应时间，测量时以硬结（横径+纵径/2）大小为主，不以红晕大小作为判断标准。因为硬结为特异性变态反应，而红晕为非特异性反应。有的情况下硬结和红晕大小一致。反应大小以mm记录，不应记录为+、-号。,硬结示意图,平均直径=横径+纵径/2,五.结素反应结果分类：1）阴性反应：注射部位无硬结或硬结平均直径5mm.2)阳性反应：硬结平均直径5mm_阳性 5-9mm_一般阳性 10-19mm_中度阳性 20
5、mm(5岁以下儿童15mm)_强阳性反应20mm，但是出现水泡、溃疡、坏死或淋巴管炎-强阳性 阳性和阴性之间不可能有精确的科学分界。但是一般反应越强则结核菌感染的可能性越大，但皮试阳性并不意味着就是结核病人。,六.影响结素反应强度的因素,1.结素试验的假阴性反应a.机体处于变态反应前期感染后3-8周，机体没有形成免疫b.重症或进展期的结核病：传递免疫作用的致敏淋巴细胞减少。结脑 粟粒 干酪性肺炎c.有HIV感染、AIDS、麻疹、猩红热、腮腺炎等急性传染病 免疫机制受到抑制，结素阴性d.某些疾病：白血病、结节病、癌症等，免疫系统受干扰，结素可阴性e.药物因素：应用免疫抑制剂，如激素等结素可阴性f
6、.其他因素：老年、营养不良、高烧等均能使结素反应成阴性g.技术因素：结素效价低、注射剂量不足、判断和记录错误h.非典型抗酸杆菌感染：约占结素阴性病人的50%。,2.结素试验的假阳性a.非典型分支杆菌感染 对结素试验有交叉反应b.结素试验的复强作用 （接种卡介苗或受感染，弱阳性-重复试验-增强过敏反应强度）c.同一部位重叠试验（促进反应）（特点;出现早、反应大，消失快)d.紫外线照射、或因注射引起的非特异性刺激导致判断错误,3.结素试验的促进和复强a.促进反应:当在同一部位反复注射结素时，反应与初次注射相比出现早、程度强，但消退快。6小时出现，12-24小时高峰，持续4-6年，更换注射部位可以避
7、免b.复强作用：不同部位重复注射结素 已经致敏的机体经过一段时间后过敏性已经减弱或消失，当再次注射结素时使减弱的过敏反应恢复，这种现象称为复强作用。 未接种卡介苗，未受自然感染的机体无复强作用,七、结素试验结果的意义,1.阴性的意义 a.未受结核菌感染，非结核病人； b.已受结核菌感染但处于结核感染早期（38周）； c.老年人； d.营养不良、HIV感染、尿毒症、恶性肿瘤接受放、化疗者 等免疫功能低下者（免疫系统受干扰）； f.使用肾上腺皮质激素的患者； g.有发高热的急性传染病（麻疹、猩红热、水痘）或重症结核病（粟粒型肺结核、结核性脑膜炎）患者； h.技术误差注射剂量不足或结核菌素失效。*
8、结素试验阴性并不100%意味着未受结核菌感染。(存在着结素试验假阴性的问题）,2.阳性的意义：人为或自然感染，对结核菌有免疫力（1）接种卡介苗后；（2）结核病病人；（3）无明显临床症状仅呈一般阳性反应，表示曾感染过结核杆菌；（4）婴幼儿尤其是未接种卡介苗者（5岁以下），并伴有发烧等不适，阳性反应多表示体内有活动性结核病灶。年龄愈小，活动性结核可能性愈大；（5）强阳性反应者，表示体内可能有活动性结核病；结合临床（6）由阴性反应转为阳性反应，或反应强度由原来小于10mm增至大于10mm，且增幅超过6mm时，表示新近有感染。 由于广泛推行卡介苗接种，结核菌素试验的诊断价值受到一定限制。接种卡介苗与自
9、然感染阳性反应的主要区别见表1； (7) 技术误差及其他原因引起的假阳性反应,接种卡介苗与自然感染阳性反应的主要区别,八、结素反应的付作用及其处理,1.结素副反应： 1）、全身反应晕厥或晕针 过敏性休克 发热及淋巴细胞减少全身出疹（猩红色丘疹）2）.局部反应：水泡、溃疡、坏死和淋巴管炎,2.副反应的处理水泡:水泡较小用红霉素药膏涂抹即可，如较大，可用一次 性灭菌注射器将液体抽出，再涂上药膏并无菌包扎。溃疡:红霉素药膏,硫磺粉消毒纱布包扎淋巴管炎:每日局部热敷2-3次,减少前臂运动,有感染可用抗生素治疗.晕厥和过敏性休克:取卧位,安静、保温,压刺人中,饮温开水或糖水.如不见缓解,可皮下注射1肾上腺素.关节疼痛、恶心、呕吐、便血或血尿等应请有关科室医生会诊处理。,
