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1、微生物生长曲线的制作及特点、原因,主讲人：杨雪璇,什么是微生物的生长曲线？,微生物生长曲线是以微生物数量（活细菌个数或细菌重量）为纵坐标，培养时间为横坐标画得的曲线。一般说，微生物（细菌）重量的变化比个数的变化更能在本质上反应出生长的过程。曲线可分为三个阶段即生长率上升阶段（对数生长阶段）、生长率下降阶段及内源呼吸阶段。,生长曲线,怎样绘制微生物的生长曲线？,微生物生长曲线的绘制方法主要分为：生长量测量法、微生物计数法、还原糖测定法、氨基酸测定法以及其他生理物质的测定。其中生长量测量法又分为测菌丝浓度法、称干重法、比浊法等；微生物计数法又可分为血球计数板法、染色计数法、液体稀释法等。接下来我以
2、大肠杆菌为例给大家简单介绍一下比浊法测定微生物生长曲线的方法。,1)接种：取13支装有牛肉膏蛋白胨培养液的试管，贴上标签，按无菌操作法用吸管向每管准确加入0.2mL的大肠杆菌培养液，接种后，轻轻摇荡，使菌体混匀。另一支不接种的培养管用作对照。 2)培养：将接种后的培养管置于摇床上，在37下振荡培养。其中9支培养管分别于培养的0、15、3、4、6、8、10、12和14h后取出，放冰箱中贮存。,3)比浊：将培养不同时间、形成不同细胞浓度的细菌培养液进行适当稀释，使光密度值在0.0-0.4范围内，以未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基调零点，在光电比色计上，选用400-440nm波长的滤光片进行比浊，从最
3、稀浓度的菌悬液开始，依次测定。最后，以细菌悬液的光密度值(OD)为纵坐标，培养时间为横坐标，绘制大肠杆菌的生长曲线。,微生物生长曲线的特点？,典型的微生物生长曲线包括四个时期：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。下面我带大家依次了解一下这四个时期的特点以及形成的原因。,迟缓期,特点：生长速率常数为零、菌体粗大、RNA含量增加、代谢活力强、对不良环境的抵抗能力下降。成因：微生物刚刚接种到培养基之上，其代谢系统需要适应新的环境，同时要合成酶、辅酶、其他代谢中间代谢产物等，所以此时期的细胞数目没有增加。,对数期,特点：生长速率最快、代谢旺盛、酶系活跃、活细菌数和总细菌数大致接近、细胞的化学组成形态理化性质基本一致。成因:经过调整期的准备，为此时期的微生物生长提供了足够的物质基础，同时外界环境也是最佳状态。,稳定期,特点：活细菌数保持相对稳定、总细菌数达到最高水平、细胞代谢产物积累达到最高峰、是生产的收获期、芽孢杆菌开始形成芽孢。成因：营养的消耗使营养物比例失调、有害代谢产物积累、PH值EH值等理化条件不适宜。,衰亡期,特点:细菌死亡速度大于新生成的速度、整个群体出现负增长、细胞开始畸形、细胞死亡出现自溶现象。成因：主要是外界环境对继续生长越来越不利、细胞的分解代谢大于合成代谢、继而导致大量细菌死亡。,总结,谢谢大家,
