《细胞培养污染ppt课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《细胞培养污染ppt课件.ppt（21页珍藏版）》请在三一办公上搜索。
1、,细胞培养污染,CELL CULTURECONTAMINATION,凡混入细胞培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染细胞污染不能完全被消除，但能减少其发生的频率和后果的严重性,细胞污染的分类物理污染化学污染生物污染（支原体污染）,控制污染掌握良好的无菌操作技术建立细胞库合理应用抗生素保持工作区清洁建立良好的规章制度检测细胞污染,温度孵箱放在温度较恒定的房间中培养液从冰箱取出后在室温放置放射线试剂周围不能放同位素振动孵箱周围不能放引起振动的设备辐射试剂不要放在带有玻璃门的冰箱中,物 理 污 染,Physicalcontamination,化学污染血清培养液及试剂水培养用器
2、皿孵箱,chemicalcontamination,chemicalcontamination,培养液及试剂选用纯度最高的试剂经过权威机构认定正确的储存方法,血清新购买的血清用之前要试应选用同一批次的血清,水用来配液和清洗容器传统用双蒸和三蒸水现在用纯水仪millipore超纯水放置过久纯度下降,chemicalcontamination,容器生产过程中有毒物质残留消毒剂和清洗剂的残留铝箔和包裹纸残留,chemicalcontamination,孵箱co2混有有毒气体消毒剂和清洗剂的残留,biologicalcontamination,生物污染容易发现的生物污染包括细菌、霉菌和酵母不容易被发现
3、的生物污染包括病毒、原虫、昆虫、支原体和其它细胞系,biologicalcontamination,对实验人员是一个潜在的危险因素细胞系交叉污染污染在这是个错误的用词难于发现若出现传代细胞的生长速度异常，考虑交叉污染同一时间只传同一种细胞每种细胞要有单独的液体建立细胞库每三个月更换一次细胞,细菌、霉菌和酵母无抗生素污染易被发现抗生素存在易造成隐性污染隐性污染引起严重后果,病毒最难发现和清除严格的宿主性自限性,支原体（杂草）,biologicalcontamination,污染严重,难发现 难去除显微镜看不到不引起培养液浑浊和PH改变营养要求高不容易用传统的微生物培养法检测到不能通过过滤清除大多
4、数抗生素对其无效,支原体检测方法,biologicalcontamination,分子量对照2 阴性对照3-8 原有细胞的悬液9 阳性对照,分子量对照2 阴性对照3-8 新细胞的悬液9 阳性对照,VenorGeM试剂盒,biologicalcontamination,支原体,树 立 “预 防 为 主” 的 思 想,保证细胞来源干净确保基质和器材无菌严格无菌操作细胞培养时避免交谈操作结束时消毒台面每船15代的细胞应更换所有细胞培养材料丢弃前应高压消毒,controlcontamination,良好的无菌操作,合理利用抗生素,建立细胞库,保持工作区清洁,良好的规章制度,细胞污染的检测,良好的无菌操
5、作所有玻璃器皿和培养液与试剂的配制应严格无菌避免溢出、溅出和气溶胶；吸入或吸出液体时避免倾倒；吸入或吸出液体时，不要触碰细胞培养瓶的瓶口；液体应分装并置4-8oC保存；每种细胞应使用单独的液体；清洁区和污染区的材料应单独处理；,controlcontamination,合理利用抗生素过度依赖抗生素会使人们忽略无菌操作滥用抗生素常导致耐药菌的产生牢记抗生素不能代替无菌操作,controlcontamination,建立细胞库减少从主管单位获得细胞的运输费 冻存的细胞生物性状不发生改变消除了隐蔽污染的潜在危害,controlcontamination,良好的规章制度只有相关人员才可进入细胞培养区
6、细胞培养区必须和其他区域分开 每个细胞培养区应布局合理，保证所需物品就近放置，在处理细胞时避免不必要的走动 细胞培养区应避免使用水池，从而避免微生物污染,controlcontamination,controlcontamination,保持工作区清洁,常规清洗地面和台面,CO2孵箱每2-3个月消毒清洗孵箱所有溅出或溢出的液滴应立即擦拭并消毒 每周孵箱内水盘需彻底消毒清洗,定期清洁水浴箱,生物安全柜每次使用后应清洁和消毒安全柜的内表面定期消毒安全柜工作面下层的盘子；,及时清理废弃物，高压感染材料,controlcontamination,细胞污染的检测,支原体的检测,其它生物污染的检测使用传统的微生物学检测方法,化学污染的检测常被误认为生物污染要靠逐一替换的方法确定化学污染的来源,
