《DCCIK细胞的制备及在肿瘤治疗中的应用ppt课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《DCCIK细胞的制备及在肿瘤治疗中的应用ppt课件.ppt（38页珍藏版）》请在三一办公上搜索。
1、DC-CIK细胞的制备及在肿瘤治疗中的应用,恶性肿瘤的治疗现状,恶性肿瘤的多学科综合治疗,恶性肿瘤各种治疗手段各具优势与不足,肿瘤外科学肿瘤放射治疗学肿瘤化学治疗学肿瘤生物学治疗,侧重点不同局部与全身早、中、晚期,肿瘤免疫学治疗的优点,可以有效地杀灭患者术后和放化疗后体内残存的肿瘤细胞，达到治疗肿瘤、预防复发与转移和最终根治肿瘤的目的。具有特异性强、适用性广、副作用轻等优点。,肿瘤免疫学治疗,非特异免疫刺激剂及细胞因子治疗：IL2、IL6、IL12、GM-CSF、TNFa、IFNa、IFNr等体内应用，装载有细胞因子基因的细胞治疗。治疗性疫苗：肿瘤抗原或多肽抗原疫苗、装载肿瘤抗原基因的病毒疫苗
2、、基因修饰的肿瘤细胞疫苗、APC细胞疫苗、抗独特性疫苗。Mab导向治疗：Mab、Mab-毒素、Mab-同位素、鼠-人单抗、人源单抗、双特异性抗体。过继性免疫细胞治疗：供者淋巴细胞输注、LAK、TIL、CIK、多种方法诱导的CTL、DC-CIK等。,过继免疫疗法,通过把在体外扩增的大量特异性效应细胞回输给患者后，产生直接杀伤肿瘤细胞的作用。,DC-CIK培养及其应用,CIK细胞：Cytokine Induced Killer CellDC：Dendritic Cell,CIK细胞特性,分布：肝脏和外周血来源：CD3+CD56+T细胞和CD4-CD8+T细胞一群以CD3+CD56+T为主的异质细胞
3、包括/T细胞,/T细胞与LAK、CD3AK细胞相比高效、广谱杀伤、非MHC限制,DC与T细胞,DC高表达MHC-类、类分子，MHC分子与其捕获加工的肿瘤抗原结合，形成肽-MHC分子复合物，递呈给T细胞，从而启动MHC-I类限制性CTL反应和MHC-类限制性的CD4+Thl反应；DC还通过其高表达的共刺激分子(B7-1、B7-2等)提供T细胞活化所必须的第二信号，启动了免疫应答。,DC负载肿瘤抗原,肿瘤杀伤作用,DC在DC-CIK杀伤肿瘤细胞中的作用,诱导抗原特异性CTL反应增加CIK细胞的扩增倍数增强CIK肿瘤杀伤效力,MHC：抗原提呈自分泌细胞因子：INF,IL-12等抑制CD4+CD25+
4、调节T细胞生长,CIK细胞的制备,PBMNC(CS3000 Plus),In a 3000ml Baxter bag,Serum free culture mediumIFN 第一天Il-2 第二天CD3 mAb 第二天IL 1 第二天,14 days,CS-3000采集PBMNCFicoll分离PBMC,洗2次1-2106/ml接种至含无血清培养基的培养袋中，1000ml/袋，加入IFN-1000U/ml，放置37，5%的CO2孵箱中培养24h加入IL-1 100U/L，CD3单抗50ng/ml，重组人IL-2 300U/L，继续培养，每3天半量换液，并补加IL-2 300U/ml。分别于第
5、5，7，9天取细胞做细胞表型分析（FCM检测），细胞杀伤实验（MTT法）收集细胞，含0.5%白蛋白的生理盐水洗涤回输,CD3主要促CIK细胞增殖，促IL-2自分泌，也提高CIK杀伤活性IFN-r/IL-1，上调细胞表面IL-2R表达，IFN-r先于IL-2加入，有效激活效应细胞，增强抗肿瘤活性,DC的培养,BMDC,Serum free culture mediumIL-4,GM-CSFTNF,成熟DC,79 days,IL-4,GM-CSFTNF,PBDC,Tumor antigen,DC-CIK共培养,成熟DC,CIK细胞,+,CIK细胞的增殖,62.%,84.7%,89.5%,28.2%
6、,43.1%,52.3%,CIK细胞对自体原代白血病细胞的杀伤作用,CIK细胞对自体原代白血病细胞有明显杀伤作用，且其细胞毒作用随着效靶比的增加而进一步增强，在效靶比为20：1时，其中位杀伤率分别为51.33%,52.95%,肿瘤细胞冻融物肿瘤细胞坏死物正常生长的肿瘤细胞无肿瘤细胞无DC,DC-CIK对肿瘤杀伤作用,DC-CIK对肝癌细胞的杀伤活性,*DC与CIK共培养后，CIK增殖能力和杀伤活性明显增强,DC/CIK治疗结肠癌血源性肺转移的实验研究,DC-CIK治疗乳腺癌,CIK/DC-CIK治疗恶性血液病合并丙肝,HCV-RNA转阴例数 14/18 治疗2疗程以上HCV-RNA持续阴性 6
7、/9ALT/AST/TBIL明显下降或正常例数 10/10,CIK治疗1例白血病合并丙肝后肝功的变化,新技术,RetroNectin activated killer cell（RAK）DC相关的技术,RetroNectin activated killer cell（RAK）,重组人纤维蛋白片段(RetfoNectin)可参与细胞的附着、伸展、分化和增殖。该产品已注册美国药典和国际专利。当包被在培养皿和培养瓶中时，RetroNectin能显著提高逆转录病毒转染入哺乳动物细胞内的效率。RetroNectin还可参与细胞的附着、伸展、分化和增殖，可增加体外CIK细胞扩增倍数，及肿瘤杀伤活性。,RetroNectin activated killer cell（RAK）,zoledronate acid/唑来膦酸,转染AFP质粒的腺病毒感染DCDC-CIK共培养杀伤活性检测,健康供着DC和CIK,肝癌患者DC和CIK,CIK/DC-CIK治疗后的不良反应,寒战发热疲乏无力关节肌肉酸痛一般24小时内消失,小 结,体外实验证实DC-CIK肿瘤杀伤活性强，并具有肿瘤特异性；被认为是新一代免疫治疗的首选方案，已经进入I、II期临床实验；临床实验时间短，病例数尚不多；治疗方案和标准尚待进一步规范和统一。,Thank you!,
