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1、“1893年的一天，在演奏完第六交响曲（悲恸交响曲）之后，柴可夫斯基来到大街上散步，忽然感到口渴，就进了一家饭店，要了一杯冷水喝，谁知就是这样一杯水要了他的命。是情杀、仇杀还是另有原因呢？凶手是谁呢？”,当时俄罗斯发生霍乱大流行，最后医生确认，这杯水中含有霍乱弧菌，致使天才音乐家柴可夫斯基染上致命的霍乱而死去。为什么这个故事中特别指出是“冷水”？霍乱可能通过什么途径传播？冷水中有多少霍乱弧菌才可能使柴可夫斯基发病？“千军万马过胃部”“集团作战”。,1883年，埃及发生了一次瘟疫大流行，成千上万的病人一批批死亡。患者往往起病急，出现严重的腹泻和呕吐，米泔样大便。若得不到及时救治，常常在短时间内因
2、全身脱水、肌肉痉挛和周围循环衰竭，造成休克而死。,一名在印度某水电站工作的44岁工程师，突发大量水样泻，由于每小时约0.5L液体的丢失，患者很快出现紫绀及重度脱水症状，肠鸣音减弱，低血压，血容量减少，其排出物呈等渗，暗视野显微镜检查，发现逗点状微生物。Q1、患者最有可能患有何种疾病？Q2、如何确诊？,病例分析,形态与染色：革兰染色阴性，弧菌，单端鞭毛，运动活泼。,扫描电镜,霍乱弧菌,一、生物学特性,鱼群状排列,病人米泔水样粪便涂片GS镜检，可见大量弧菌首尾相互衔接，平行排列如鱼群状。,霍乱弧菌 Vibrio cholerae-vibrio-shaped prokaryote that caus
3、es cholera,霍乱弧菌（鞭毛染色）,霍乱弧菌（扫描电镜）,一、生物学特性,抗原构造与分群：H抗原：无特异性 O抗原：分群,培养特性：耐碱怕酸，pH 8.8-9.2，可在无盐环境中生长,古典生物型 O-1群 EL Tor 生物型 非O-1群 引起散发性胃肠炎。O-139型，1992年起引起 霍乱流行。,一、生物学特性,与人类感染有关的主要弧菌,抵抗力：较强，但100 1-2 分钟可 灭活，怕酸（1份漂白粉加 4份水，1小时）,一、生物学特性,致病性与免疫性,致病物质：鞭毛与菌毛：运动并粘附至小肠粘膜 肠毒素：AA1：毒性组分，使腺苷酸环化酶活 性增高，cAMP 大量增加。A2：与 B 结
4、合 B与小肠上皮细胞神经节苷脂受体结合,霍乱肠毒素结构：1A、5B,霍乱肠毒素（CT）：由一个A亚单位和5个相同的B亚单位构成的一种聚合蛋白。,致病物质-霍乱肠毒素:,激活腺苷环化酶，使细胞内cAMP水平升高，主动分泌Na+、K+、HCO3和水，导致重的腹泻与呕吐,B亚单位,A亚单位,与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合，介导A亚单位进入细胞,（结合亚单位）,（毒性亚单位）,B亚单位与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合,A亚单位裂解为A1和A2两条多肽，A1亚单位进入细胞发挥毒性作用,A1活化AC(腺苷环化酶)，使ATP转化成cAMP(环磷酸腺苷)，使之在细胞内含量增高,cAMP水
5、平升高，导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进，大量水和电解质在肠腔堆积，引起剧烈腹泻,霍乱肠毒素的作用机制,传染源：患者及带菌者人类是唯一易感者 摄入108-1010个细菌可造成感染，引起霍乱传播途径：经水传播经食物传播经生活接触传播经苍蝇传播,霍乱：一种残忍的瘟疫,霍乱病人,重型 腹泻次数一日20次以上，极度烦躁甚至昏迷，皮肤弹性消失，眼窝深凹，明显发绀，严重肌肉痉挛，脉搏微弱而速，甚或无脉，血压下降或测不到，尿量每日少于50ml或无尿，脱水程度儿童相当于体重10%以上，成人8%以上。,霍乱,剧烈的喷射状呕吐 休克、电解质紊乱及酸中毒 腹泻物呈米泔水样 不治疗，死亡率达60%,致病性与免疫性,所致疾
6、病：霍乱 易感者：人类是霍乱弧菌的唯一易感者 传播途径：消化道 可疑水、食物（菌 103105，1081010）2-3天突然出现剧烈腹泻与呕吐 严重脱水，电解质紊乱，肾衰、死亡,致病性与免疫性,病后带菌一般不超过 2 周，个别 可长达数年，病菌主要存在于胆囊中。免疫力：同群免疫力较牢固，体液免疫为主。,微生物学检查,霍乱：烈性肠道传染病，为我国的甲类法定传染病（俗称2号病）霍乱是烈性传染病，对首例病人的病原学诊断应快速、准确，并及时作出疫情报告,微生物学检查,标本：呕吐物、米泔水样粪便 直接镜检 分离培养 PCR G-弧菌 碱性蛋白胨水 肠毒素 运动活泼 凝集反应,标本,病人粪便，肛拭流行病学
7、调查还包括水样粪便标本：Cary-Blair保存液肠道病原菌：甘油盐水缓冲保存液,直接镜检,革兰染色阴性弧菌悬滴法观察细菌呈“鱼群穿梭样”运动有助于诊断,分离培养,接种碱性蛋白胨水增菌目前常用的选择培养基为TCBS（硫代硫酸钠柠檬酸胆盐蔗糖培养基），霍乱弧菌因分解蔗糖呈黄色菌落挑选可疑菌落进行生化反应血清学反应-玻片凝集反应,形成菌膜,在PH8.8-9.0碱性蛋白胨水中生长表面形成菌膜,霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上的菌落特征（18-24h）,在选择培养基琼脂平板（TCBS）上生长，形成较大黄色菌落。,霍乱弧菌血清学反应（凝集反应）,防治原则,防：霍乱死菌苗：肌肉注射，保护率50%，3-6个月 减毒重组活菌苗：口服，保护率82-100%菌苗加类毒素：B亚单位+灭活菌细胞，3 年以上 霍乱、伤寒杂交菌苗：基因工程菌苗,致病性与免疫性,治：隔离，及时补充液体，敏感抗菌素 抗生素可选用四环素、强力霉素、氟哌酸等。,
