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1、细菌病的实验室诊断方法,学习目标,?,知识目标,?,掌握细菌病实验室诊断的方法,?,理解利用各种诊断方法的进行鉴定的意义,?,能力目标,?,具备结合临床病例设计实验室诊断方案的能力,主要内容,?,病料的采集、保存和运送,?,细菌的形态学检查,?,细菌的分离培养,?,生化试验,?,动物接种,?,血清学试验,?,分子生物学技术,重点与难点,?,重点,?,细菌病实验室诊断的方法,?,难点,?,设计实验方案,细菌病的实验室诊断,初诊：根据流行病,学、症状、病变等,方面的疾病特征，,做出初步诊断,通过实验室诊断，,确定病原是否是,细菌以及病原菌,的类型,实验室诊断是在临床诊断的基础上进行的,细菌病实验室
2、诊断方法,?,病料的采集、保存和运送,?,细菌的形态学检查,?,细菌的分离培养,?,生化试验,?,动物接种,?,血清学试验,?,分子生物学技术,病料的采集、保存和运送,?,病料采集遵循的原则,?,防止污染,无菌采样,适时采样,适当部位,?,病料采集方法（不同病料不同方法）,?,实质脏器,液体材料,其他病料,?,病料的保存和送检,细菌性病料的保存和送检,?,低温保存,?,尽快送检,?,做好记录,?,畜主姓名、动物种类、地,址、发病情况、欲检部位,及检验项目、采集时间等,细菌的形态学检查,?,方法,?,光学显微镜检查,?,电子显微镜检查,?,意义,?,观察病料中有无细菌以及细菌的形态、数量、分布、
3、,结构、种类等，进行初步判断,细菌的分离培养,?,方法：,用,分区划线法,在,合适培养基,上培养,?,意义,?,看培养基中有无细菌生长推断是否为细菌病,?,依据菌落的特征判断细菌种类,?,用菌落中的细菌进一步作形态学鉴定,?,可进一步作生化鉴定、血清学鉴定及动物试验,?,可进一步作药敏试验,细菌的生化试验,?,进行生化试验的细菌必须是纯培养物。,?,检验时，根据可疑细菌的生化特性选择特定,的一组生化试验，将结果与标准进行对比，,以确定病原菌的种类。,?,例：,不同种沙门氏菌的生化鉴定,?,意义,?,将待检细菌液接种到动物体内，观察动物,发病情况，进一步确认可疑细菌的致病作,用和类型。,?,接种
4、对象,?,本动物,?,试验动物,?,接种途径,动物接种,血清学试验,?,临床诊断中，可用于细菌的血清分型、快速诊,断或大群检疫。,?,用已知抗体检测动物体内的病原菌,?,用已知的病原菌抗原检测动物血清中的抗体,?,例：,鸡白痢的检疫,分子生物学方法,?,分子生物学技术对病原菌的快速诊断和不能人,工培养的细菌的探索发挥巨大的作用。,?,PCR,技术、核酸分子杂交技术等。,大肠杆菌病实验室诊断方案,病料中细菌的形态学检查,病料中细菌的分离培养,18,小时后,动物致病性试验,涂片革兰氏染色,生化试验,H2S,试验,糖发酵试验,MR,试验,10,日龄小鸡，皮,下注射,0.2ml/,只,病料,纯培养,大肠杆菌病实验室诊断结果,?,剖检（采集病料）,?,纤维素渗出物的涂片染色,?,分离培养,（麦康凯或伊红美,蓝琼脂平板）,?,培养物涂片革兰氏染色,?,生化试验,?,动物接种试验,谢,谢！,
