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1、实验室离心机的安全使用及日常维护,从离心安全说起,操作或使用不当不平衡过速金属疲劳腐蚀,离心事故原因,转速（rpm)离心力和相对离心力（F&RCF）沉降系数（S）K因子容量（uL、mL、L）,离心常用概念,转速转/分 rpm：每分钟的转数 Revolution Per Minute角速度：每秒转过的弧度数 1弧度即为弧长等于半径的圆弧所对的圆心角=2rpm/60=0.10472 rpm,转速,“转速”的含义离心机最高转速转头最高转速转头允许的实际转速 样品密度 离心机型号 离心管形状、材料、厚度 离心管帽的材质 离心管是否装满 是否用适配器,转速,样品密度高于规定密度时，需采用以下公式，减速运
2、行 rpm实际=rpm最高/实际 为离心转头设计的密度 实际为离心样品的密度 rpm最高是转头设计的最高离心速度 rpm实际是所求的离心速度,规定密度定角和水平转头：1.2g/cm3垂直和近垂直转头：1.7g/cm3,转头离心时减速计算,离心力 相对离心力（RCF）：某个粒子在离心时所受的离心力与该粒子所受的重力之比（x g）/分离因数(=2rpm/60=0.10472 rpm)转速（rpm）与相对离心力（RCF）的换算（r以mm为单位）,离心力和相对离心力,颗粒在单位离心力作用下的沉降速度称该颗粒的沉降系数 dr/dt d2(p m)2rS=V/2 r=(V=)2 r 18 沉降系数是生物大
3、分子的特征常数，它除了与颗粒的密度、形状和大小有关以外，还与介质的密度、粘度有关。为了纪念Svedberg人们把沉降系数确定为S,单位是：1S=10-13秒。如：某物质沉降系数是10-12秒，就可写成1010-13秒，表示为10S.,沉降系数S,生物样品沉降系数的参考,*于20C水中时的参数,离心参数设定,?,esp.UC&HP,转头效率：K因子,K因子的应用：离心时间计算,离心时，估算沉降时间：t=离心时间（单位：小时）k=转头k因子 S=样品的沉降系数,分离相同样品使用不同转头,离心时间计算可用以下公式,a转头：K因子20，沉淀某蛋白需2hb转头：K因子10，需时？,t=k/S,ta ka
4、=tb kb,k因子：是转头离心效率指标，与转速、转头形状等因素有关。rmax=转头最大半径 rmin=转头最小半径 rpm=最高转速,注意：1）公司所给的k值都是指装满样品后在最高转速时的k值2）在低转速下的k值就可以通过以下公式来计算：k实际转速=k最高转速(RPM最高转速/RPM实际转速)2,转头效率：K因子,RCFlow kmax tmax=RCFmax klow tlow,差速离心法等密度梯度离心法速率区带离心法,离心方法,分离小于500S的颗粒,分离500S20,000S 的颗粒,分离大于20,000S的颗粒,离心机分类,正确使用转头的几大要素,转头必须使用的合适的离心机上，并准确
5、安装转头与转头盖、吊桶必须配套使用注意样品溶液的密度（定角转头 1.2 g/ml）要注意平衡（离心前、离心时）要准确使用合适的离心管、适配器及一些工具离心管内装样的量必须合适,正确使用转头超速离心机,仪器和转头都是由国际电工协会系统检测过(IEC-10-10-2)使用仪器核准过的转头是安全的；使用未经核准的转头可能导致机器、转子的损坏巨大的经济损失人员的伤害,定角转头的正确使用,定角转头盖子:适当的拧紧安装:正确的将转头垂直向下 放入轴上 安装完后，转头即自动锁闭,正确的安装转头,有些台式超速离心机的转头在正确放置后，需要用手指按压锁扣固定转头。,水平转头使用注意事项（插入式）,SW32 Ti
6、和Sw32.1Ti吊桶须对号入座插入转头孔内。离心时，无论样品多少，都需要把所有的吊桶都挂上，离心样品对称放置（轴对称），其他的水平吊桶内则空置。没有装样品的水平吊桶内千万勿放空离心管。,水平转头的正确使用（挂钩式）,吊桶须对号入座插入转头孔内。离心时，无论样品多少，都需要把所有的吊桶都挂上，离心样品对称放置（轴对称），其他的水平吊桶内则空置。没有装样品的水平吊桶内千万勿放空离心管。安装离心管时，先擦干离心管外壁，再将离心样品放入水平吊桶内（必要时放置相应的适配器），然后拧紧水平吊桶的盖子，对号入座将吊桶挂到转头上（水平吊桶钩子朝内挂，并仔细确认每个吊桶都挂到挂钩上）。超速离心机的部分水平转头
7、底部有PIN，安装水平转头时需错开转轴顶针放置。,双手提着转头,正确的提拿方式,不适当的手持会导致：吊桶的挂钩掉出梯度的扰乱,不正确的提拿转头,超离中过失吊桶是导致转子严重损坏主要原因,运行前检查所有吊桶,正确使用转头的几大要素,转头必须使用的合适的离心机上，并准确安装转头与转头盖、吊桶必须配套使用注意样品溶液的密度（定角转头 1.2 g/ml）要注意平衡（离心前、离心时）要准确使用合适的离心管、适配器及一些工具离心管内装样的量必须合适,正确使用转头落地高速离心机,准确安装转头(Avanti J series),转头的两个销子与Beckman字样平行,转头上 平行的两个销子必须与离心腔内的两个
8、Pin平行放置,离心机腔内的轴套,侧面图,正确安装转头盖 Avanti J Series,双旋钮的转头盖：首先，将盖子盖住转头，顺时针旋转下面的梅花形旋钮，直至拧紧；再将转头放到离心机上，顺时针旋转上面的中心旋钮，一直到拧紧为止。,准确安装转头盖 Avanti Series,单旋钮的转头盖:将转头准确安装到离心机轴上，再放上盖子，顺时针拧紧旋钮；单个旋钮是直接将转头锁到离心机的轴上。,Avanti 系列 转子附件,JA20 Rotor,Avanti 系列 转子附件,JLA16.250 Rotor,Avanti 系列 转子附件,JLA10.500 Rotor,要注意样品的密度-避免过速离心,转头
9、离心时减速计算 离心转头只能在样品密度不超过厂家设计的密度（一般为1.2g/cm3，也有为1.7g/cm3）时，才可采用最高速度。在离心高于规定密度的样品时要减速，对水平离心转头尤为重要。用下列公式可计算出在所用样品密度时应采取的最高离心速度。rpm实际=rpm最高/实际 为离心转头设计的密度 实际为离心样品的密度 rpm最高是转头设计的最高离心速度 rpm实际是所求的离心速度,金属超应力腐蚀,破坏铝转头,离心要注意平衡,在 1,000,000 x g离心,1g的样品产生1,000 kg,The Weight of a Mini Cooper,Which Equals.,放置离心管的原则,轴对
10、称平衡,尤其要注意在离心过程中由于样品漏出而造成的不平衡。为了避免漏液，装完样后必须拧紧瓶盖，同时注意离心管内的装样量：开口管在定角转头内不能装满样品离心只带螺旋盖的离心管在定角转头内也是不允许装满样品离心盖子带密封圈的离心管可以装满样品离心,正确使用转头的几大要素,转头必须使用的合适的离心机上，并准确安装转头与转头盖、吊桶必须配套使用注意样品溶液的密度（定角转头 1.2 g/ml）要注意平衡（离心前、离心时）要准确使用合适的离心管、适配器及一些工具离心管内装样的量必须合适,转头使用前后注意事项及离心管的选择,转头使用前须注意,检查转头和盖是否干净，有无划痕、变形和破损，如有破损和变形，请暂停
11、使用，并联系厂家。检查测速盘是否干净和破损，如不干净，需用酒精清洁并等干燥后使用，如有破损，请更换测速盘。（对于超速离心机而言）检查所有的密封圈是否完整、有无老化，若不完整或老化，请及时更换。检查所有离心管材料的化学耐受性，离心管材质的选择要与实验匹配（见下页）。,离心管类型,开口管 快封管指封管离心瓶,常见问题,消毒方法（高压灭菌、UV、70%酒精等）？重复利用？,PA：半透明材质，能耐部分酸碱和有机溶剂，可以121 高压消毒。PC：透明、耐用、硬度好；不耐碱、酒精及其他有机溶 剂；高压灭菌会降低寿命。UC：超净，可耐弱酸及一些弱碱，但不耐DMSO及大部 分有机溶剂；不可高压灭菌，不耐油PP
12、：半透明材质，多用于高速离心机；对许多酸、碱及 酒精有很好的耐受性,化学耐受性,不同材质的离心管,化学耐受性,离心管/瓶在各种超速离心机转头中的应用,转头使用时须注意,使用之前检查密封圈，必要时要在密封圈上抹真空密封酯，在转头螺纹上涂润滑油。离心之前要平衡样品。必要时要预冷转头与离心腔。根据需要选用tubes/bottles、adapters 以及spacers（遵循转头操作手册）。根据不同离心管的要求加样。尤其是超速离心管装完样的离心管须把外壁擦干，再放入转头腔内。,离心管 离心瓶 适配器须配套使用,转头使用完后须注意,需定期清洗转头，并涂上润滑油（在螺纹处）和密封脂（在密封圈上）。清洁离心
13、机腔体和转头，并擦干腔内冷凝水。离心腔门上的密封圈可以用薄纸或软布每个月清洁一次，用真空油脂涂抹，确保真空度达到最佳状态。如有样品外漏，需用中性洗涤剂清洗转头，并用清水冲洗，再将转头倒置晾干。,工具的准确使用,使用转头扳手打开开口管盖,盖紧定角转头离心管需要使用的特殊工具,工具的准确使用,使用合适的洗涤剂和刷子来清洗转头,不能使用硬毛的，顶端带钢丝的刷子清洗转头,转头的维护和存放,正确、及时上真空酯和润滑油,测速盘受破坏后要及时更换,取下盖子，倒置凉干,转头的存放,转头通常可以倒置存放，避免冷凝水残留在转头空内转头必须放在干燥的环境中在存放转头前，所有的离心管和适配器必须从转头中取出,转头的消毒和灭菌,结合实验室具体情况进行消毒和灭菌大部金属成分的转头可高温高压灭菌30分钟1小时，温度121C(结合转头手册)冷消毒：使用 70%酒精或者 6%过氧化氢*注意：漂白会使转头表面涂层退色,使用前阅读手册,转头手册可供阅读,登记本上详细记录离心机使用情况,Thanks！,欢迎关注：“贝克曼库尔特生命科学”微信平台,买离心机，到贝克曼“5 S”店,
