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1、流行性感冒（禽流感）,急性呼吸道感染,常见病症状相似，严重程度不同上呼吸道：鼻塞、流涕、咽痛、喷嚏、干咳下呼吸道：咳嗽、咯痰、胸痛、喘息、呼吸困难全身症状：发热、寒战、酸痛、乏力预后不同,急性呼吸道感染,流行性感冒病毒普通感冒-病毒鼻炎，鼻窦炎，咽喉炎多为病毒急性气管炎，慢支急性发作-病毒，细菌肺炎-细菌，病毒，其他病原体SARS-SARS冠状病毒结核病,常见呼吸道病毒引起的疾病,流行性感冒,流行性感冒,由流感病毒引起的发热及其鼻，咽喉，支气管和肺部的感染；高传染性，可引起流行以及世界范围的大流行；流行期间可感染2050%的地区人口，3周达发病高峰，一月后开始下降潜在病死率,National
2、Institute of Allergy and Infectious Diseases,12/97.,流感的流行,流感病毒分型,Type A（甲型）潜在严重性 可引起流行和大流行 变异快，可感染人类和动物Type B（乙型）较A型严重性低 引起流行 较为稳定，感染人类Type C（丙型）经常引起轻微的症状或无症状 引起散发病例-各型显示不同的临床和流行病学特点,分型与致病性,甲、乙、丙分型不仅反映了病毒被发现的年代及前后顺序，更主要的是反映了对人类危害程度。,甲型流感病毒常以流行形式出现，引起世界性流感大流行，它在动物中广泛分布，并也能引起动物流感流行和造成大量动物死亡.禽流感病毒属于甲型流
3、感病毒。乙型流感病毒常常引起流感局部暴发，不引起世界性流感大流行，至今尚未找到它存在于人之外的其它动物中的确凿证据。丙型流感病毒主要以散在形式出现，主要侵袭婴幼儿，一般不引起流感流行。过去一直认为人是丙型流感病毒唯一的天然宿主，但近年来这种看法已得到彻底纠正，我国于19811982年从我国猪群中分离出多株丙型流感病毒，并已得到世界公认。,病原学形态 甲 流感病毒是多形性的囊膜病毒，常为球型，其直径为80120nm，有嚢膜。基因组为分节段单股负链RNA。甲、乙型流感病毒基因组均含8个节段，为单链、负链的RNA，而丙型流感病毒仅含7个分子节段，少一个编码NA的RNA节段。,病原学形态,流感病毒的电
4、镜照片,(143,000).,病原学分型,根据病毒颗粒核蛋白（NP）和膜蛋白（MP）抗原特性及基因特性的不同，流感病毒分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型。,神经氨酸酶,血凝素,RNA,M2 蛋白(only on type A),流感病毒表面蛋白,病原学-甲型流感病毒分型,甲型流感病毒根据其表面（H和N）结构及基因特性的不同又可分成许多亚型，至今甲型流感病毒已发现的血凝素有15个亚型（H115），神经氨酸酶9个亚型（N19）。甲型流感病毒除感染人外，还可感染猪、马、海洋哺乳动物和禽类。感染人禽流感病毒型别主要为H5N1、H9N2、H7N7，但以H5N1引起的病情重，病死率高。,Adapted
5、from Levin AJ.Viruses.1992;165,with permission.,A型流感病毒的血凝素分型,亚型人类猪马鸟H1H2H3H4H5H6H7H8H9H10H11H12H13H14H15,Adapted from Levine AJ.Viruses.1992;165,with permission.,A型流感病毒神经氨酸酶分型,亚型人类猪马鸟 N1N2N3N4N5N6N7N8N9,抗原漂移（Antigenic Drift）,A 型和B型流感反复流行的原因；通过抗原基因的突变、颠换和缺失实现(流感病毒缺乏“复制”中需要的“校对机制”和“错误修复机制”)；是对宿主产生抗体的适
6、应性反应；这种持续的漂移使机体免疫系统不能对流感病毒产生长期的免疫力。,RNA,Hemagglutinin,Neuraminidase,Antibodies,Sialic acid,抗原漂移（Antigenic Drift）,抗原转换(Antigenic shift),发生在A型流感病毒，产生新的亚型通过基因在人体的重新整合或中间媒介（如猪）直接进入人体实现；较抗原漂移少见，但影响力大，是流感大流行的原因。,抗原转换（Antigenic shift),抗原转换(Antigenic shift),D.Release From Cell,B.Entering Cell,C.Replication,
7、A.Binding to Sialic Acid,Pathology of Influenza Infection,症状,突然出现的症状发热，一般 38干咳(2/3 cases)寒战/出汗头痛，肌肉酸痛乏力不适（严重且持续时间常）咽痛胸骨下疼痛，畏光，消化道症状,2023/1/21,27,可编辑,影响症状和疾病发展的因素,Individuals Symptomsand Disease,Age,ImmuneStatus,UnderlyingDisease,Viral Strain,Viral Subtype,From Kilbourne ED.Influenza.1987:159,with pe
8、rmission.,Influenza-成人的症状,%10 20 30405060708090100,Cough,fever,prostration,Headache,Sudden onset nasal discharge,pharyngeal injection,Myalgia,conjunctival injection,Sore throat,Substernal pain,Productive cough(sputum),From Kilbourne ED.Influenza.1987:161,with permission.,%10 20 30405060708090100,Fev
9、er,rhinitis,Pharyngitis,Vomiting,diarrhea,Bronchiolar-pulmonary signs,幼儿的症状和体征(5 岁),老年人的症状-不典型,活动受限（Immobility)稳定能力下降（Instability)便失禁（Incontinence)意识障碍（Intellectual impairment),流感的常见体征,精神差急性热病容，皮肤湿热结膜充血上呼吸道感染征象：鼻塞，流涕，咽部充血下呼吸道感染征象少见,临床实验室指标,一般实验室检查1、血象：血白细胞计数大多正常，淋巴细胞相对增高，血小板正常。重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞下降。2、骨
10、髓象：骨髓穿刺示细胞增生活跃，反应性组织细胞增生伴出血性吞噬现象。胸部影象学检查 一般未见改变，或仅有肺纹理增强；重症患者胸部X线摄像显示单侧或双侧肺炎，少数可伴胸腔积液。,Adapted from the National Institute of Allergy and Infectious Diseases.,Signs 持续34天咳嗽干咳，严重 干咳头痛显著少见 肌痛，周身不适常见且严重轻微 疲乏，虚弱 可延续23周非常轻微胸部不适常见轻到中度鼻塞有时常见喷嚏有时常见咽痛有时常见,流感和普通感冒的鉴别,流感的实验室检测,理化特性,对热的稳定性 一般来讲，流感病毒对热是敏感的。对冷的适应
11、性较强，-70以下至少可保存数年，冰冻干燥后4可长期保存。对pH的稳定性 流感病毒最适pH为78。在pH值3以下或10以上感染力很快被破坏。对紫外线的稳定性 流感病毒能被紫外线所灭活。对化学试剂的作用 流感病毒为一种带囊膜的病毒，故对乙醚、氯仿、丙酮等有机溶剂均敏感。对氯化剂、卤素化合物、重金属、去污剂、乙醇和甲醇也均敏感。,样本的采集与处理,标本的采集 鼻试子、咽试子、鼻咽抽取物、鼻洗物、漱口液。咽试子：用棉签擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将棉签头浸入4-5毫升采样液中，尾部弃去。病毒分离成功与否很大程度上取决于采集标本的质量，极其保存、运输等环节。标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存，常
12、用的采样液为：普通肉汤，Hanks、Eagles或水解乳蛋白液。为防止细菌和真菌生长，在采样液中需加入抗生素。,血清标本采集血清标本应包括急性期和恢复期双份血清。急性期应尽早采集，最迟不超过发病后7天。恢复期血样应在发病后2-4周采集。单份血清一般不能作诊断。血液标本，采血5毫升，2000-2500rpm离心15min。收集血清，弃血凝块。血清可在4 存放一周，长期保存置-20冰箱。,标本的运送,标本应在低温下，24小时内运送至实验室。标本至实验室后，病毒分离标本应尽快进行接种分离，48h内能进行接种的可置4保存，如未能接种应置-70 或以下保存。,标本处理,标本至实验室后，含棉试子的标本，先
13、将棉试子在管壁反复挤压后取出。鼻腔或咽部洗液，用手将装标本的管充分振荡，将黏液打碎。置4 待其自然沉淀5-10min，取上清5ml。上清液可直接接种或低温保存。注：如采样液中尚未加抗菌素，应在接种前补加，混匀后置4 1-2h后方可接种。,一、病毒分离,病毒分离是流感诊断最常用和最可靠的方法之一。多用鸡胚来分离流感病毒。近来随着分子生物学技术的发展，发现通过鸡胚所分离到的流感病毒，其抗原性与原始标本的有所不同，而通过MDCK细胞分离出的病毒，其抗原性与原始标本相似。另外由于“O”相毒株的重现，MDCK等一些细胞对“O”相毒株的敏感性大大超出鸡胚的敏感性，因此，MDCK等一些细胞已成为流感病毒分离
14、不可缺少的一种宿主系统。流感病毒“O”相毒株不凝集鸡红细胞，故近来在流感病毒鉴定中常用豚鼠或人红细胞来代替。,（一）、MDCK 细胞分离,材料：MDCK细胞、各种培养液。过程：准备成层细胞；病毒接种和收获；传代及盲传。血凝实验：（HA）。,（二）、鸡胚分离,9-11日龄鸡胚。禽流感分离时，必需用SPF鸡胚。HA检测。,（三）、病毒鉴定,至今对流感病毒鉴定最常用的方法为红细胞凝集抑制（HI）测定，因该法简便、易行、结果可信。HI试验分常量法和微量法两种。微量HI法是目前国际普遍使用的方法，也是WHO流感监测中推荐使用的标准方法。HI试验的原理是流感病毒表面具有的血凝素蛋白能和含有唾液酸的受体物质
15、特异结合，红血球浆膜上含有这类物质，当一定量病毒和适当比例的红血球混合后发生凝集，次为血凝现象。而用流感病毒特异性抗体和病毒作用，干扰了病毒和红血球的结合从而抑制了血凝，次为血凝抑制现象。,二、血清学检查,常用流感病毒血清学方法主要包括：血凝抑制试验（HI），病毒中和实验和酶联免疫吸附试验（ELISA）。它们不仅是病毒诊断的常用方法，而且已经作为基本研究工具广泛用于病毒流行病学调查、免疫学研究以及疫苗效果评价等领域。血清学方法不适用于流行性感冒的早期诊断，但当流感病毒分离结果为阴性时，可用于诊断近期感染，即：同时检测病人急性期（发病数日内）和恢复期（发病2-4周）双份血清，如恢复期血清抗体效价
16、比急性期升高4倍或4倍以上即可确立诊断。血清学检查：双份血清，回顾性诊断；,三、核酸检测,PCR技术,禽流感（Avian influenza),禽流感是A型流感病毒引起的动物传染性疾病，1878年在意大利首先发现，1955年证实其病原；国际兽疫局规定为甲类传染病，高致病性，高传染性，通常只感染鸟类，其次是感染猪。鸟类中的流感有两型：1、引起轻度症状；2、高致病性禽流感：死亡率几乎达到100%。,禽流感-人类感染,传染源：患禽流感或携带禽流感病毒的鸡、鸭、鹅等家 禽,特别是鸡；但不排除其它禽类或猪成为传染源的可能。传播途径：主要呼吸道：消化道：感染动物的肉、蛋，污染的水和食物等损伤的皮肤和眼结膜
17、易感人群：人类普遍易感，就现有病例，儿童较为多见,禽流感-人类感染临床特点,潜伏期：一般为13天，通常在7天以内。急性起病，早期表现类似普通流感，主要为发热、流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛、全身不适。有些患者可见眼结膜炎；部分患者：恶心、腹痛、腹泻、稀水样便等消化道症状；可有肺部实变体征。血常规：WBC不高或降低。重症患者WBC总数及淋巴细胞下降。可出现单侧或双侧肺炎，少数伴胸腔积液。确诊依靠病原学,禽流感-病原及血清学检查,1.病毒分离：取患者呼吸道标本（如鼻咽分泌物、口腔含漱液、气管吸出物或呼吸道上皮细胞）分离禽流感病毒。2.病毒抗原检测：取患者呼吸道标本采用RT-PCR法，检测禽流感病毒亚
18、型特异性H基因，或用禽流感病毒H亚型特异性单克隆抗体免疫荧光法或酶联免疫法检测禽流感病毒抗原。3.血清学检查：发病初期和恢复期双份血清抗禽流 感病毒抗体滴度有4倍或以上升高，有助于回顾性诊断。,禽流感-人类感染,是否存在人 人传播：NO，但已发现其变异很快是否有H5N1预防的疫苗：NO为什么WHO建议疫区人员接种流感疫苗：防止病毒基因整合药物对预防和治疗是否有效：YES，可选择离子通道M2阻滞剂和神经氨酸酶抑制剂。为什么高致病性禽流感突然在东南亚爆发：不清楚，可能与候鸟迁徙和边境生鸡市场有关。,特别强调（一）一般情况下，禽流感病毒感染人类的几率极小。（二）目前尚无人与人之间传播的确切证据。（三）国内尚无人禽流感病例。（四）食用烹熟的家禽肉、蛋等不会感染禽流感。（五）穿羽绒服、盖鸭绒被以及接触相关制品，不会传染禽流感。因为羽绒制品通常经过消毒、高温等多个物理、化学环节处理，病毒存活的可能性微乎其微。,谢谢！,2023/1/21,54,可编辑,
