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1、灭菌室相关注意事项,1.高压蒸汽灭菌锅2.鼓风干燥箱,为什么要灭菌?,组织培养 组织培养实验的第一步就是清洗与灭菌。组织培养中工作量最大，也是最基本的步骤。体外培养细胞所使用的各种玻璃或塑料器皿对清洁和无菌的要求程度很高。细胞养不好与清洗不彻底有很大关系。,1、高压蒸汽灭菌锅,高压蒸汽灭菌也称为湿热灭菌方法，是最有效的一种灭菌方法。主要应用范围是布类、橡胶制品(如胶塞)、金属器械、玻璃器皿、某些塑料制品以及加热后不发生沉淀的无机溶液(如Hanks液、PBS等)。,灭菌原理,1。蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量越大，发生凝固所需的温度越低。湿热灭菌时的菌体蛋白质可吸收水分，因而比在同一
2、温度的干热空气中更易于凝固。2。湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热，进一步提高温度。3。湿热气体的穿透力比干热气体强，故湿热比干热收效好。高压蒸汽可以杀死一切微生物，甚至包括细菌的芽孢，真菌的孢子等耐高温的个体。,高压蒸汽灭菌锅,灭菌锅控制面板,高压灭菌锅内部构造,内部结构主要两个不锈钢框构成，不锈钢框用于放需要灭菌的物品,不锈钢框底在灭菌前加入一定量的水,1.1 高压灭菌锅基本操作流程：,1.高压灭菌锅使用前要加足量的水2.将需要灭菌的培养基、蒸馏水或其它器皿放入锅内；关闭锅盖并上紧，打开电源，设定程序，按下START(开始)”键，灭菌锅开始工作。3.灭菌锅压力升至0.15Mpa(121)时，灭
3、菌锅自动切断电源。4.达到规定灭菌时间后，灭菌锅自然冷却；当温度降至60以下时，方可开启锅盖。5.关闭电源开关。6.填写并记录使用情况,1.2 使用高压灭菌锅注意事项,1 一定要在打开电源前检查是否压力表指示为“0MPa”。如果指示不为“0MPa”，请停止使用。2 待灭菌的物品放置不宜过紧3 装培养基的试管或瓶子的棉塞上，应包油纸或牛皮纸，以防冷凝水入内4 压力在0.05MPa以上时，不可放气减压，否则瓶内液体会剧烈沸腾，冲掉瓶盖而外溢甚至导致容器爆裂。5 培养基灭菌后如暂时不拿出，蒸汽方今后应保持锅盖打开状态。6 在一些情况下，如灭菌的对象是含电解质的生理盐水（如含盐的水），要确保灭菌完成后
4、及时排放机器内的水并清理 干净。,2 鼓风干燥箱,干燥箱是一种常用的仪器设备，主要用来干燥样品，也可以提供实验所需的温度环境。鼓风干燥箱广泛为工矿企业、化验室、科研单位等提供干燥、烘焙熔蜡、灭菌等作用。,鼓风干燥箱的工作原理,鼓风干燥箱的工作原理：这种干燥箱的最大特点就是在于鼓风，与外界空气相连。鼓风风机的作用是使干燥箱内的空气水平对流循环，使箱内空气吹送到电加热器上加热后送到工作室，然后由工作室吸入风机再吹到电热管上加热，不断循环加热的同时也使箱内温度更加均匀。工作室的热空气可对潮湿的试样物品加热，水分也会因加热变成水蒸气混入热风中。,控制面板,内部构造,2.1 鼓风干燥箱的操作流程,1.样
5、品放置：上下四周留存一定空间，不可过于密集，保持工作室空气流通2.风门调节：根据物品的潮湿情况，调节到合适位置3.开机：打开电源开关和风机开关4.设定所需时间和温度5.关机：先关闭风机开关，再关闭电源开关6.填写并记录使用情况,2.2 使用干燥箱的注意事项,1.干燥箱内不得放入易腐、易燃、易爆的物品。2.放入箱内的物品不应过多、过挤。3.干燥箱恒温干燥时恒温室下方的散热板上，不能放置物品，以免烤坏物品或引起燃烧。4.放置物品时切勿接触到感温探头。5.请将EP管、枪头、橡皮筋等含有塑料的制品放置在最上层。6.烘箱最高使用温度为50。7.物品烘干后请即时取出，请勿长时间烘烤发生意外。8.使用完毕后请关闭烘箱。9.填写使用记录和设备运转状况。,谢祝大家实验顺利,
