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1、第五节自由丝状体的培育,一、自由丝状体的由来、优点和形态,由来：自由丝状体是使萌发的果孢子不钻入贝壳内，让它在培养液中生长，成为游离状态，因此又称其为游离丝状体,优点：1、可用单株采果孢子，通过自由丝状体的扩大培养，获得大量纯种,2、可以利用自由丝状体代替果孢子移植到贝壳上，进行贝壳丝状体育苗，推广纯种生产，更新养殖种群，并使养殖种群纯种化 3、采苗不受季节限制，可随时采苗4、生产上可大大缩短丝状体的培养时间5、可避免丝状体培育时受到病害的威胁,形态：贝壳丝状体 自由丝状体丝状藻体细胞 长 1050微米 5080微米 宽 22.5微米 2.5-5微米膨大细胞 宽 1012微米 1020微米,二
2、、自由丝状体的制作与管理,1、准备工作：,（1）培养液的制备：过滤海水营养盐（加热到8090）冷切到室温备用,不能超过100，否则微量因素易沉淀,营养盐母液配方：,营养盐 萌发期 生长期 成熟期甲：KNO3 80g 60g 40g KH2PO4 10g 20g 30g乙：EDTA-Na2 4g 4g 4g 维生素B12 0.1g 0.1g 0.1g FeSO4 5g 5g 5g,每升海水中各加甲、乙母液1ml,（2）培养器皿的消毒：,三角烧瓶、广口瓶等透明玻璃器皿，镊子、毛笔等都要煮沸消毒，也可用次氯酸钠浸泡处理,（3）种藻的处理：,种藻取其孢子囊消毒海水洗刷种菜日晒用消毒海水再洗刷46遍阴干
3、备用,自由丝状体培养的关键在于是否被杂藻污染，而杂藻的来源主要是由种菜带入和培养海水是否消毒干净,2、采果孢子的方法：,（1）培养瓶直接加入果孢子囊片：,果孢子片消毒海水瓶子斜靠一面斜靠另一面瓶子放正去除未放散的果孢子片 种菜大小为瓶底面积的1/4-1/5，冷冻菜的用量为瓶底面积的1/3-1/4）,1520，种菜放散两天，15，种菜可放散3天，放散结束后取出种菜，15天后可看见瓶底长出一层粉红色的丝状体,（2）孢子水直接加到培养瓶中：,制作孢子水计数果孢子水加入培养瓶中斜靠一面斜靠另一面,400ml培养液的瓶中可加入510万个果孢子，搅拌均匀后将瓶子倾斜放置1h再调整到另一倾斜面，让果孢子附着
4、在玻璃壁上,3、培养管理：,水温：1232，25应注意通风，避免温度大幅度上升,光照：丝状藻丝：30004000lux 膨大藻丝：2000lux,施肥：N：10ppm P：1-5ppm，后期P肥量加大 Fe：13ppm,营养液更换：1个月一次,杂藻处理：硅藻：15ppm GeO2 早期蓝藻：50ppm 链霉素 或500ml 瓶中加入0.1ml 1%CuSO4 以上处理完25天后都要全部换水,三、自由丝状体的移植,自由丝状体切碎200300微米碎断撒在贝壳上丝状体钻壳（弱光，57天）移植贝壳丝状体（移植水温1222）萌发率一般为2030，移植的丝状体秋季同样发育成熟，放散壳孢子,四、促进自由丝状
5、体壳孢子放散：,措施：流水，通气，更换新鲜海水,放散特点：流水刺激下，前23天放散量少，随后57天达到放散高峰期，以后放散量又减少，一般每50g湿重的自由丝状体可以采一亩网帘,第六节紫菜壳孢子的采集,壳孢子的采集就是使丝状体放散出来的壳孢子按生产要求的附苗密度均匀地附着到网帘上，然后把采好苗的网帘移至海区张挂栽培的过程，简称为采壳孢子 采苗效果主要决定于：（1）丝状体培养的好坏（2）是否在壳孢子大量放散的季节采苗（3）是否掌握采壳孢子的技术,一、壳孢子的放散与附着,每天每个贝壳放散的壳孢子量，称为日放散量 日放散量最多的叫最高放散量 日放散量的计算即平均每个贝壳从开始放散到放散停止的时间内放散
6、的孢子总数,1、壳孢子放散的一般规律性,（1）日周期性：,每天上午710点以前集中大量放散，下午放散量很少，甚至不放散 晴天壳孢子放散的高峰期稍早一些，在上午78点，阴天则稍微推迟至上午910点,紫菜人工采壳孢子苗应该在上午进行,（2）潮汐的周期性：,自然海区的壳孢子：一般集中在大潮时大量放散，小潮期间放散量明显减少人工室内培养的丝状体：与潮汐关系不明显。,紫菜壳孢子采苗要在大潮时进行,（3）壳孢子大量放散出现的时间：,条斑紫菜：,67cm的文蛤壳，10万级以上的放散量称为大量放散，可以开始准备采苗 一般在9月下旬到10月中旬,坛紫菜：,0.8亿个/斤壳时可称为大量放散进行采苗 一般在9月上旬
7、到中旬,不同地区，由于水温不同，出现大量放散的时间有差异，在同一地区，温度偏高的年份大量放散出现的时间稍有推迟，温度偏低的年份，大量放散出现的时间就稍早 所以应根据具体情况选择采苗时间,2、壳孢子附着与环境条件关系：,（1）壳孢子附着与水流的关系：水流越大，附着越大,水流（cm/s）1小时后附着孢子数 附着率（）0 0 0 22 237 24 45 612 62 68 834 84 90 991 100,全人工采苗过程中，搅动采苗池内的海水，能使壳孢子浮起来，增加了壳孢子接触并附着到网帘上的机会，从而增加附苗量，所以搅动池内的海水是十分重要的,条斑紫菜采单孢子同采壳孢子一样，也需水流，水流越大
8、，附着量越大,（2）壳孢子的附着速度：速度非常快，短时间内附着，几乎碰到基质就附着,在一定的孢子水浓度中，充分振荡海水，壳孢子在短短的五分钟内就能附着。网帘在水中浸泡5分钟和1h，附苗量就没有多大区别,（3）壳孢子附着与温度的关系：,附着温度 最适温度坛紫菜 2030 2326条斑紫菜 1015 1520,在不影响壳孢子附着的上限温度时，尽量争取早采苗（延长生长期）,（4）壳孢子附着与光照的关系：,条斑紫菜：壳孢子附着以500010000lux时最多，光照在1000lux以下，附着率明显降低,坛紫菜：壳孢子附着与光照没有关系，晴天室外采苗和室内多层重网采苗相差不大,（5）壳孢子附着后的耐干力：
9、弱,壳孢子附着后暴晒2h，壳孢子基本死光壳孢子附着后阴干4h，壳孢子全部死光壳孢子附着后2小时内再干燥，死亡率高壳孢子附着后34小时内再干燥，成活率提高壳孢子附着后5小时内再干燥，成活率最高,室内采苗的网帘下海张挂时，最好是海水边涨边挂，也可将45张网帘暂时重叠一起张挂，待23天后才分开张挂,（6）附着与比重的关系：,壳孢子附着的适宜比重为1.020-1.025 在河口区养殖场，在遇到大雨时，比重降低，要推迟采苗 比重在1.015以下和1.025以上都会影响壳孢子附着力和附着量。,二、壳孢子采苗的季节,采苗条件：,（1）壳孢子大量放散的季节 秋分季节的水温最适合壳孢子的放散（2）自然界水温适合
10、于壳孢子萌发成幼苗和幼苗生长坛紫菜：25-28 条斑紫菜：19-21,（3）大潮时采苗 大潮期间，海水变动范围大，流速大，朝差大，水质、营养盐等基本条件比较优越，而且大潮还是壳孢子大量放散的时间，故采苗效果较好（4）尽量以叶状体的生长期延长、增加产量为原则 但必须在壳孢子附着适温范围的上限温度采孢子,现在生产上把坛紫菜采壳孢子苗提早到白露进行主要有下列根据：,1）利用白露期间大潮或冷空气南下，水温稍低时采苗，有利于壳孢子放散2）待冷空气过后，水温升高，这时壳孢子已经萌发为两个细胞，水温高，萌发快，生长好3）白露比秋分早半个月，延长了半个月的生长期，提高了产量,三、采壳孢子的方法,1、海区网帘泼
11、孢子水采苗：,就是将成熟的丝状体，经过下海刺激，使其集中大量放散壳孢子，然后将壳孢子水均匀地泼洒在海区的网帘上，达到人工采苗的目的,主要工作：,（1）孢情检查（2）下海刺激贝壳丝状体：采苗的前一天下午，将贝壳丝状体运到海里，经海流刺激一个晚上，第二天早上6点取回（3）绑台架和网帘：采苗前一天下午进行，太早绑会影响附着，2030张网帘网孔错开重叠，减少壳孢子流失,（4）泼孢子水：下海刺激过的贝壳丝状体放在船舱里，让其放散壳孢子，上午89点在放散高峰期第一次泼孢子水，船舱再加点海水，让丝状体继续放散壳孢子，中午12点再泼一次壳孢子水（5）分散张挂：采苗35天后，检查附苗密度，然后分散网帘张挂、养殖
12、,2、菜坛泼孢子水养殖：将丝状体放散出来的壳孢子水均匀地泼洒在菜坛上3、流水式采苗：在两个育苗池中间，安装马达和推进器，利用马达带动推进器，推动水流不断流动，网帘和贝壳丝状体放在池子里,4、冲水式采苗：用水泵直接抽水，借水的冲力，使两个池水不断流动，把贝壳丝状体放在池底，网帘放在贝壳丝状体上进行采苗5、摆动气泡式采苗：网帘固定于采苗池上端，采苗池底铺设数条与池等长的通气管，安装动力并送气于通气管内，带动通气管在池中来回摆动，使池子的海水翻动起来达到采苗的目的,室内采好孢子的网，可以暂养在水池中，等海水合适时，再下海张挂，最好是边涨潮边张挂，缩短干出时间，降低死亡率,四、采孢子密度与检查方法,1
13、、采孢子密度：,北方：条斑紫菜35个/mm2，或30-40个/cm,南方：坛紫菜3亿10亿个/亩,2、附苗密度的检查方法：,（1）筛绢法：将200目筛绢剪成0.71cm，长45cm的小条，夹在采苗网帘上，与网帘一起放入采苗池内，每次取样时，取一小段，用低倍镜检查筛绢上附着的壳孢子数量，然后换算成单位面积筛绢的附苗量,（2）维尼龙纱法：利用维尼龙网帘上的纱头直接作为检查壳孢子附着量的材料，用剪刀剪取长约2cm的一根单纱，置于低倍镜下算出壳孢子附着数，再换算成每厘米附着大孢子数即可。,检查附苗密度的注意事项：（1）壳孢子附着速度很快，因此检查时应做到勤、快，否则附苗过密，不仅浪费大量孢子，降低采苗效率，也不利于后续的栽培生产（2）取样时应取池子的不同部位分别计数，然后取平均值,复习思考题：1、如何制作紫菜的自由丝状体？2、壳孢子放散与附着具有哪些规律性？3、采壳孢子的方法有哪些？,
