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1、牛羊结核病与布鲁氏菌病防控技术,山东省动物疫病预防与控制中心兰邹然2014.5.16济宁,内容,引言一、结核病概述；二、布病概述；三、结核病与布病监测净化技术；四、结核病与布病监测净化技术的应用；,引言/7,1012年国务院下发国家中长期动物疫病防治规则结核病与布病都列为优先防治病种。今年之前小反刍兽疫都一直被认为是外来动物疫病，今年的国家动物疫病监测方案（农医发201412号）中的,引言/7,主要人畜共患病防治考核标准,引言3/7,动物结核病与布鲁氏菌病排名（国家动物疫情分析总结报告）,引言4/7人间结核病布病,引言5/7分享流行病学思维,H7N9,人医的传统思维：,寻找并制造轰动效应的事件
2、（SARS，禽流感等）避重就轻：结核病，癌症，肝炎等。通过事件的渲染获得政府政策和资金。,引言6/7分享流行病学思维,H7N9,兽医的传统思维：,摘清责任被动防御,引言7/7分享流行病学思维,H7N9是不是值得这样大动干戈？,流行病学思维：,H7N9是一种散发疾病（传染病？）；发病率极低：今年17例。发病概率千万分之一比中彩票一等奖概率低得多；对禽不致病；禽很无辜即使是禽传染给人后果也不严重；至今未查明此病的前因后果；关注此病的成本太高：超过数千亿的损失；控制舆情平息事件，减少不必要的损失。社会公众：兽医部门政府卫生部门。,一、结核病概述,死于结核病的中外名人著名的英国诗人雪莱（1792.8.
3、41822.7.8），30岁；波兰作曲家、钢琴家肖帮(18101849），39岁；俄国作家契诃夫（1860.1.291904.7.15），34岁；德国戏剧家席勒（1759.11.101805.5.9），46岁；我国鲁迅（1881.9.251936.10.19），55岁；小说家散文家诗人郁达夫（18961945），49岁；林黛玉 16岁。,孔子母亲颜征在死于结核，35岁,（一）结核病定义,结核病是由结核分枝杆菌引起的一种人畜共患的慢性消耗性传染病。OIE列为类动物传染病；我国将其列为二类动物传染病；人结核病又称为“痨病”和“白色瘟疫”。,经济损失巨大例如患病奶牛的寿命要比健康牛短得多，产奶量显著
4、减少，常常不能怀孕。病死率可达1020。执行本病防治措施时要花费很大的人力和物力。公共卫生问题结核病牛往往是人感染结核病的重要传染源，人结核病人大约有%源于奶牛感染。,（二）结核病危害/,花费大量人力物力财力控制和消灭疫病美国,1917年开始根除计划以50年间花费4.5亿美元根除了牛的结核病。野生动物仍感染牛结核。英国，每年花费7400万英镑用于牛结核监测。澳大利亚，1970年开始根除计划，1997年历时27年，根除了牛结核病。,（二）结核病危害/,结核病是一个很古老的疾病，至少有几千年的历史；考古学家从新石器时代（从1.8万年前开始，结束时间从距今5000多年至2000多年不等）人类的骨化石
5、和埃及4500年前的木乃伊上，就发现了脊柱结核。,（三）历史1/10,我国最早的医书黄帝内经素问（公元前403前211年）上就有类似肺结核病症状的记载；西方医学先辈古希腊医生希波格拉底（公元前460前377年）也曾对结核病做过描述。,（三）历史2/10,1882年3月24日著名的德国科学家罗伯特.科赫(1843-1910)在柏林宣布发现结核杆菌。世界细菌学病原的奠基人和开拓者；1905年诺贝尔生理学医学奖。,（三）历史3/10,重要贡献：首次证明了一种特定微生物是特定疾病的病原；阐明了特定细菌会引起特定的疾病；发明了用固体培养基的细菌纯培养法。世界上第一次：发明了细菌照相法；发现了炭疽病原炭疽
6、杆菌；分离出伤寒沙门氏菌、结核杆菌、霍乱弧菌；发明了预防炭疽病的接种方法；发明了蒸汽杀菌法；发现了鼠蚤传播鼠疫的秘密；制定著名的科赫法则；,1921年，法国有两位细菌学家卡默德（Leon Calmette）和介兰（Camile Guerin）共同试制成功了预防结核菌的人工疫苗，又称“卡介苗”（Bacillus Calmette-Gurin,简称BCG）。两位科学家足足花了13年的时间，终于成功培育了第230代被驯服的结核杆菌，作为人工疫苗；世界卫生组织(WHO)研究证实，接种卡介苗预防结核性脑膜炎和播散性结核病的平均有效率为86%。,（三）历史4/10,1944年，特效药链霉素的问世使肺结核不
7、再是不治之症。1943年美国 S.A.瓦克斯曼从链霉菌中析离得到；1952年他获诺贝尔生理学医学奖。,（三）历史5/10,1952年，发明异烟肼（雷米封），至今仍是治疗结核病的主药之一。,（三）历史6/10,1965年，发明利福平，可用于治疗结核病、肠球菌感染等，利福平的发现使结核病的治疗又发生了一次更大的飞跃。,（三）历史7/10,1944年，发明类氨基水杨酸；1952年，发明吡嗪酰胺，后者对细胞内或静止状态下的结核杆菌具有特殊杀灭作用；1961年，发明乙胺丁醇，对生长繁殖期细菌具较强活性，对静止期细菌几无作用。,（三）历史8/10,抗生素、卡介苗和化疗药物的问世是人类在与肺结核抗争史上里程
8、碑式的胜利；但是，耐药性问题逐步摆到了人们面前，1992年首次被列为主要问题。耐药性问题：1995年全世界有300万人死于此病。我国的结核病耐药率高的惊人（10-68%），耐药结核病的流行给我国的结核病控制带来极大困难。,（三）历史9/10,1995年底WHO将每年3月24日作为世界防治结核病日（World Tuberculosis Day）。纪念1882年德国微生物学家罗伯特科赫发现结核病病原菌及对结核病防控的贡献。提醒各国政府和公众更多关注杀人无数的结核病。,（三）历史10/10,病原为结核分支杆菌。本菌分为三型，即牛型、人型及禽型。这三种杆菌都可感染人、家畜、家禽。牛型主要侵害奶牛，其次
9、是黄牛、水牛、牦牛；另外还可感染鹿、马、猪、羊、骆驼、犬、猫等家养哺乳动物和野猪、野牛、松鼠、猴、羊驼、獾、狒狒、狮子、大象等50种温血脊椎动物和20多种禽类，人也不例外。,（四）结核病病原1/3,结核杆菌因含有丰富的脂类，故在外界环境中生存较强。在水中可存活5个月；在土壤中7个月；本菌对干燥和湿冷的抵抗力较强；对热抵抗力较差，60 30分钟即可被灭活；在阳光直射下经数小时便死亡；在70酒精、10漂白粉、氯胺、3%甲醛、石炭酸等消毒剂中很快死亡，碘化物消毒效果甚佳；但无机酸、有机酸、碱和季胺盐类等对结核杆菌的消毒是无效的。,（四）结核病病原抵抗力2/3,四怕乙醇湿热紫外线抗痨药物（链霉素、异烟
10、肼、利福平等）,四不怕干燥酸（3%HCl或6%H2SO4)或碱（4%NaOH)有抵抗力碱性染料青霉素等抗生素,（四）结核病病原抵抗力3/3,主要传染源：病人、患病畜禽，尤其是通过各种途径向外排菌的结核病人、病畜、病禽是本病的主要传染源。可从其唾液、粪、尿、乳汁、生殖道和气管分泌物中排出病原菌，病原菌排出体外污染空气、饮水、食物、饲料和周围环境而构成传染。,（五）流行特点1/4,主要传播途径：本病主要经呼吸道和消化道感染；呼吸道感染主要由带菌尘埃或气溶胶所造成。消化道感染则常因食入被污染的饲草饲料造成。人、畜、禽可因吸入带有结核菌的飞沫或尘埃而感染。带菌的乳及乳制品是人感染牛型结核病的重要传播媒
11、介。通过污染的手帕、食具、玩具等能引起间接性接触感染。犊牛感染主要是吮吸带菌的乳汁造成的；本病可经胎盘或生殖道黏膜垂直传播；此外，也可通过交配感染。,（五）流行特点2/4,易感动物：,对本病普遍易感，许多动物都有易感性，据报道，约50种哺乳动物，25种禽类可患本病。易感性因动物种类和个体不同而异；在家畜中牛最易感（特别是乳牛，其次是黄牛、牦牛、水牛）；其次是家禽；猪也可患本病；羊极少发病；单蹄兽发病的罕见；野生动物中猴、鹿较多见，狮、豹等也有结核病的发生。人易感性高。,（五）流行特点3/4,本病一年四季均可发生，无明显的季节性，多呈散发，但一般认为在冬、春季易发本病，以舍饲的牛发生较多。诱因很
12、重要：畜舍拥挤、阴暗、潮湿、污秽不洁、过度使役和挤乳、营养不良等，均可促进本病的发生和传播。体质因素：5岁以下的儿童、50岁以上的老人和女性（15-30岁年龄组）发病较多。暴露因素：与结核病人和病畜接触多的人最易患本病。,（五）流行特点4/4,本病潜伏期长短不一，一般为1045天，长的达数月，甚至长达数年。通常呈慢性经过。临床上常见的类型有：肺结核（以长期顽固性干咳为特征）；乳房结核（乳房表面现大小不等、凹凸不平的硬结）；肠结核（以持续性下痢或与便秘交替出现为特征）；淋巴结核、生殖器官结核、脑结核、骨结核,（六）临床症状,牛型结核分枝杆菌感染病变可发生在所有内脏器管：最常见的是肺、胸膜、肠系膜
13、淋巴结。感染早期，可在肺门部位及肺门淋巴结见到干酪样坏死或钙化的病灶。感染中后期，可在胸膜、胸腔见到“珍珠状”增生，形成所谓的“珍珠胸”。在肠系膜可见到串珠状淋巴结肿大。,（七）病理变化,牛胸膜结核呈现的珍珠状结节,肠系膜淋巴结结核,1.临床症状和病理变化诊断2.病原学诊断 抗酸染色法、细菌分离培养法 3.免疫学试验牛的牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验（GBT 18646）4.其它方法：PCR法、迟发性变态反应试验、血清学方法、淋巴细胞转化试验、-干扰素试验、菌体成分检测法、ELISA。,（八）诊断与检测,动物结核病诊断技术 GB/T 18645-2002 农业部牛结核病防治技术规范 农
14、业部国家动物疫病监测计划,（九）疫情处置,采取以“监测、检疫、扑杀和消毒”相结合的综合性防治措施。1.规范管理保证动物群健康，提高非特异性免疫力;2.监测掌握疫情动态，发现阳性个体和群体；3.检疫发现病畜，防止疫病传播；4.隔离防止病原引入；5.无害化处理病牛（极端扑杀政策？）；6.消毒科学消毒；7.公共卫生做好人员防护，避免感染；8.免疫？卡介苗。9.宣传教育很重要。,（十）预防与控制,二、布病概述,在全世界200多个国家和地区中报告有人、畜布病疫情的约有170多个。自80年代中期开始，世界布鲁氏菌病疫情开始出现回升趋势，主要集中于亚洲、非洲、南美洲及欧洲部分地区。目前，约占世界1/51/6
15、的人受布病威胁，全世界布病现患约有500600万人，年新发病人数约有50万。布病在我国绝大多数省(市、区)都有不同程度的发生和流行。我国人间布病疫情以20世纪50年代及60年代最为严重，70年代显著下降，80年代后连续保持下降态势，90年代中期后疫情呈回升趋势，21世纪后疫情回升趋势愈加严重。,人间布病疫情,2007-2010年我国牛羊布病个体、场群阳性率总体上均呈逐年上升趋势。,东北农业大学布病感染事件,2012年12月19日，东北农业大学应用技术学院畜禽生产教育0801班30名学生在动物医学学院实验室进行“羊活体解剖学实验”；27名学生和1名教师因实验感染布鲁氏菌病；2013年9月3日被媒
16、体爆光。,布鲁氏菌病（Brucellosis，简称布病）是由布鲁氏菌属（Brucella）的细菌（简称布氏菌）侵入机体，引起传染-变态反应性的人畜共患传染病。临床特点为长期发热、多汗、关节炎、流产、睾丸炎、易复发、易变为慢性，由于反复发热，亦称波浪热。农业部兽医局将其列为二类动物疫病。,（一）布病定义,动物：母畜流产和公畜睾丸炎：使种畜失去价值；有资料表明：绵羊患布病后流产率为57.5%，牛布病流产率31.2%。慢性消耗：降低生产性能（产奶、产肉、产毛）；关节炎：丧失生产（劳动）能力；威胁公共卫生安全（养殖者和公众）。人：有的地方老百姓因布病病程很长而称布病为“千日病”;有的地方因患布病后全身
17、无力，不能干活，整天懒洋洋的，人们将布病称为“懒汉病”;因患布病整天无精打采的，所以有的地方又称布病为“蔫巴病”等等。失去生育能力断了香火,（二）布病危害,1860年，Morston对本病做了系统的描述，并根据临床特点和尸体解剖所见，将本病作为临床上一种独立的传染病提出来，称为“地中海驰张热”。1887年英国军医Bruce在马耳他岛死于“马耳他热”的英国驻军士兵的脾脏中分离到“布鲁氏菌”，首次明确了该病的病原体。1920年，为纪念Bruce，学者们建议将该病取名为“布鲁氏菌病”，被正式命名为“布病”。我国，1905年Boone于重庆报告2例布病患者，1916年在福建发现1例布病患者，1925年
18、在河南发现4名印度侨民感染布病，并从患者血液中分离出羊种布氏菌。说明我国在新中国成立前就有布病流行。,（三）布病历史,布鲁氏菌为一组微小的球状、球杆状、短杆状细菌。形态易受外界环境影响而发生改变，呈多态性。革兰染色阴性；1985年WHO布鲁氏菌病专家委员会把布鲁氏菌属分为6个种19个生物型。临床上以羊、牛、猪三种意义最大，羊种致病力最强。,我国已分离到15个生物型，即羊种（13型），牛种（17、9型），猪种（1、3型），绵羊副睾种和犬种各1个型。,（四）病原1/3,抵抗力：对干燥、低温有较强抵抗力。在土壤中可存活24-40日，干燥的胎膜中甚至存活更长时间，羊毛中1.5-4月，鲜奶中2天18个月
19、，酸奶中2天到1个月；对湿热、紫外线、常用消毒剂等比较敏感（0.2-2.5%漂白粉2分钟就能把布氏菌杀死）；直射日光数分钟，最长4小时，直射紫外线5-10分钟，湿热1001-4分钟。,布鲁氏菌在不同介质中生存时间,（四）病原2/3,对消毒药的抵抗力：,药物名称 浓度（%）生存时间 新洁尔灭 0.1 30s 石碳酸 1-2 1-5分钟 来苏儿 2 1-3分钟 来苏儿 3 1分钟内 漂白粉 0.2-2.5 2分钟内 肥皂水 2 20分钟以上,（四）病原3/3,布鲁氏菌是一种细胞内寄生的病原菌，主要侵害动物的淋巴系统和生殖系统。羊、牛易感性最强，传染人。传染源：病畜和带菌动物。病畜主要通过流产物、精
20、液和乳汁排菌，污染环境。带菌动物尤其是病畜的流产胎儿、胎盘、胎衣是主要传染源。主要的感染途径：消化道、呼吸道、生殖道，也可通过损伤的皮肤、黏膜等感染。常呈地方性流行。,（五）布病流行特点1/3,感染羊带毒时间很长；,实验布病绵羊流产后1-3个月经常在乳汁、尿、阴道分泌物中检出布氏菌。有的病羊产羔一年后，乳汁中仍带菌。绵羊感染布病后1.5-2年，约有23%的羊能在体内检出病原体。,（五）布病流行特点1/3,猪种布鲁氏菌不可忽视：,猪作为传染源的意义：猪对布病敏感，感染率10%以上。通常由猪种布氏菌侵犯。猪布病也是以流产为特征，从流产的猪胎儿、胎盘、羊水，甚至尿液以及公猪的精液都能检出布氏菌。我国
21、从接触猪的饲养员和屠宰工人检出12株猪种菌，证实了猪是不可忽视的传染源。,（五）布病流行特点1/3,人的感染途径：,、经皮肤粘膜接触传染,（五）布病流行特点2/3,1、处理病畜难产、流产及正常产；2、检查牲畜；3、饲养放牧病畜；4、接触病畜的尿、粪；5、屠宰病畜、剥皮、切肉、分离内脏；6、剪羊毛或从事皮毛加工；7、挤奶或加工病畜奶制品；8、采取病畜、病人的血液和病理材料；9、直接或间接接触被病畜分泌物、排泄物污染的水、土、草料、棚圈、工具用品等；10、从事布氏菌实验操作及制备布氏菌苗、抗原、抗血清等生物制剂等。,、经消化道传染 饮用被病菌（流产物、排泄物）污染的水；食用生乳以及未熟的肉和内脏；
22、手不洁（污染病菌）拿吃食物。、经呼吸道传染 病菌污染环境后形成气溶胶，可发生呼吸道感染。如皮毛加工人员、布病菌苗研制工作者、打扫畜舍时。、其它 如苍蝇携带，蜱叮咬也可传播本病。但重要性不大。,人的感染途径：,（五）布病流行特点3/3,人作为传染源的意义：,人布病患者可以从乳汁、脓汁、尿、阴道分泌物排出布氏菌已得到细菌学证实。国内外也报道了一些感染人的实例（个案）：有的在家中护理病人感染；有的通过性生活感染。然而，大量的病例调查分析绝大多数均为非病人传染所引起，在病人家和医院内交叉感染很少见。就人类布病而言，因动物传染而发病多见，由人与人发生传染罕见。,（五）布病流行特点3/3,潜伏期一般为14
23、180天。最显著症状是怀孕母畜发生流产，流产后可能发生胎衣滞留和子宫内膜炎。新发病的畜群流产较多。老疫区畜群发生流产的较少，但发生子宫内膜炎、乳房炎、关节炎、胎衣滞留、久配不孕的较多。公畜往往发生睾丸炎、附睾炎或关节炎。,（六）布病临床症状,人布病的临床症状：发热：发热是布病患者最常见的临床表现之一，热型不一，变化多样，在抗生素普遍使用之前，主要以波状热为主。多汗：多汗为布病主要症状之一，尤以急性期患者为甚，特别是晚上增多。游走性疼痛；急、慢性期布病患者都发生大骨关节与肌肉疼痛，慢性期疼痛局限于某一部位。乏力：几乎全部病人感觉疲乏无力。其他症状：慢性患者表现为精神不振、表情淡漠。,（六）布病临
24、床症状,主要病变为生殖器官的炎性坏死。脾、淋巴结、肝、肾等器官形成特征性肉芽肿(布病结节)。有的可见关节炎。胎儿主要呈败血症病变，浆膜和黏膜有出血点和出血斑，皮下结缔组织发生浆液性、出血性炎症。,（七）布病病理变化,（七）布病病理变化,（七）布病病理变化,人布病病理变化：,皮疹：急性期患者出现各种各样的充血性皮疹，持续时间短。睾丸肿大：睾丸炎及慢性睾丸炎,发病率20-40%。骨关节肿大：骨关节系统的损害是布病的主要体征之一，骨关节肿大，常发生在一个或多个大关节。肝脾肿大：资料报道：急性期肝肿大占21.31%，脾肿大占10.13%，慢性期肝脾肿大占4.26%。软组织肿胀：,（七）布病病理变化,病
25、原学诊断 显微镜检查 分离培养血清学诊断虎红平板凝集试验(RBPT)：(见GBT 18646)全乳环状试验(MRT)：(见GBT 18646)试管凝集试验(SAT)：(见GBT 18646)补体结合试验(CFT)：(见GBT 18646)间接酶联免疫吸附试验（iELISA）竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）,（八）实验室诊断,（九）预防与控制,给广大养牛羊场（户）的建议：监测:掌握牛羊的感染情况；群内流行率%，95%置信水平，用发现疫病的方式进行随机抽样。根据监测结果决定采取何种措施控制本病；监测淘汰净化：全群监测免疫：？无法监测，感染动物依然存在；自繁自养：引种检疫检测；隔离：防止外来病原
26、引入；个人防护至关重要：防止人员感染。,（九）预防与控制,免疫接种：范围:疫情呈地方性流行的区域，应采取免疫接种的方法。对象:免疫接种范围内的牛、羊、猪、鹿等易感动物。根据当地疫情，确定免疫对象。疫苗选择:布病疫苗S2株(以下简称S2疫苗)、5株(以下简称M5疫苗)、S19株(以下简称S19疫苗)以及经农业部批准生产的其它疫苗。,（九）预防与控制布鲁氏菌病防治技术规范,本品系用猪种布鲁氏菌2号弱毒株接种于适宜培养基培养，收获培养物加适当稳定剂，经冷冻真空干燥制成；本品用于预防山羊、绵羊、猪和牛的布鲁氏菌病；免疫持续期：羊为3年，牛为2年，猪为1年；本疫苗最适于作口服免疫，亦可作肌肉注射；口服对
27、怀孕母畜不产生影响，畜群每年服苗一次；本疫苗对人有一定的致病力。注意：口服免疫，山羊和绵羊不论年龄大小，每头一律口服100亿活菌；牛为500亿活菌；猪口服两次，每次200亿活菌，间隔1个月。注射免疫，皮下或肌肉注射均可，山羊每头注射25亿活菌，绵羊50亿活菌，牛500亿活菌，猪注射2次，每次200忆菌，间隔1个月。注意：注射法不能用于孕畜。,（九）预防与控制疫苗,本品系用羊种布鲁氏菌M5或M590弱毒菌株，接种于适宜培养基培养，将培养物加适当稳定剂，经冷冻真空干燥制成；用于预防牛、羊布鲁氏菌病，免疫持续期3年；用法用量：皮下注射、滴鼻、气雾法免疫及口服法免疫；妊娠期母畜及种公畜不进行预防接种；
28、本疫苗对人有一定致病力；毒株不稳定，经常会出现从型到型的变异，毒力中等。主要用于羊的免疫。注意：免疫接种时间在配种前12个月进行较好，牛皮下注射应含250亿个活菌，室内气雾250亿个活菌，室外气雾400亿个活菌。山羊和绵羊皮下注射10亿个活菌，滴鼻10亿个活菌，室内气雾10亿个活菌，室外气雾50亿个活菌，口服250亿个活菌。只对38个月龄奶牛接种，成年奶牛一般不接种。,（九）预防与控制疫苗,三、结核病与布病监测净化技术,澳大利亚，1989年就消灭了布病，当时依靠的是什么技术呢，s19免疫配合平板、试管凝集、ELISA诊断加捕杀，人间布病基本全部来源于动物布病，同时也基本消灭了人间布病。1997
29、年澳大利亚又清除了牛结核，又靠的什么呢，皮试诊断加捕杀。,结核病与布病是可以净化的,消灭布病的国家：美国、加拿大、新西兰和澳大利亚；瑞典、丹麦、芬兰、德国、奥地利、荷兰、比利时、卢森堡、挪威等；亚洲的日本、新加坡等。消灭结核病的国家：澳大利亚、丹麦、比利时、卢森堡、挪威、荷兰、芬兰、瑞典和德国。,结核病与布病是可以净化的,监测的目的,通过监测发现问题，评估政策，提供决策依据,防控政策：解决监测中发现的问题，政策改变与否，是否需要制定新政策。,执行防控政策措施：免疫、检疫、消毒灭源、紧急流行病学调查、监测、疫病净化、限制动物移动,监测分类,.被动监测（疫情报告）：从事动物饲养、经营（屠宰、加工、
30、运输等）及动物产品生产、经营（屠宰、加工、运输等）和从事动物防疫科研、教学、诊疗及进出境动物检疫等单位和个人应当建立疫情统计、登记制度，并按规定报告动物疫病，并配合国家搞好动物疫病监测以及疫情应急处置等工作。.主动监测：根据不同的监测目的设计监测方案，监测系统根据监测方案主动收集监测信息（或者要求下级单位收集监测信息）而开展的监测。,长期以来主动监测的弊端,.监测方案不科学，所得监测数据（基本用不着？）无法为疫病防控政策决策提供依据。.抽样没有代表性，抽样所得结果无法反映畜群的总体情况。.不强调随机抽样，所测量结果的误差过大。.不做科学抽样设计，浪费大量监测经费。,开展科学监测的好处,兽医行政
31、管理层面：.了解区域内疫病的发生分布情况，为疫病防控政策决策提供依据。.掌握一个区域内疫病的免疫状况，为调整免疫政策提供科学依据。.发现新病和外来动物疫病，及时采取防控措施，减少这些疫病对本区域造成的危害。,养殖场户层面：.掌握场内动物疫病的感染情况指导生产者进行疫病控制；早发现早处置；减少人畜共患病对从业人员造成的伤害；提高动物生产性能，取得更多经济效益；提高动物及动物产品的质量，占据高端市场，出口创汇；.掌握免疫效果，以确定是否需要进行补免。,开展科学监测的好处,给动物采样到底有多大危害？,危害：.保定应激；.采血应激；.疫情传入？好处：.掌握疫病感染情况；.掌握免疫效果；.采血有利于促进
32、造血系统的再生能力，提高动物的非特异性免疫力；要求：.兽医技术人员精通采样技术；.养殖场户搞好配合。,“两病”监测与净化技术体系的建立1/3,1、牛羊结核病和布鲁氏菌病流行病学监测技术2、结核病和布鲁氏菌病规范化采样技术3、结核病和布鲁氏菌病规范化检测技术4、病畜及阳性畜无害化处理技术5、牛场和羊场规范化消毒技术6、牛场和羊场结核病和布鲁氏菌病净化技术7、结核病和布鲁氏菌病科学防控综合配套技术,“两病”监测与净化技术体系的建立2/3,1、牛羊结核病和布鲁氏菌病流行病学监测技术1.1 监测:通过问卷调查结合抽样检测的方式开展，综合两者的结果进行分析，了解“两病”发病现状、分布和风险因素。1.2
33、两阶段抽样策略：在一个区域内，先按10%的预期群流行率，95%置信水平，5%8%可接受误差，抽取流行病学单元（一个场、散养户每个村可作为一个流行病学单元），样本量按公式 计算（其中Z=1.96，p为估计流行率，q=1-p，L为可接受误差）。每个流行病学单元的样本量按5%的个体流行率，95%置信水平，3%可接受误差抽取。,“两病”监测与净化技术体系的建立3/3,6、牛场和羊场结核病和布鲁氏菌病净化技术以群内预期流行率为2%，按发现疫病的方式对所有牛羊群进行布病和结核病筛检，检出布病或结核病的牛羊场视为布病污染场或结核病污染场。污染场：每隔3个月全场检测一次，直到检不出布病或结核病阳性畜，视为布病
34、假定健康场或结核病假定健康场；假定健康场：每半年全场检测一次，连续两次检测布病或结核病阴性，可视为布病净化场或结核病净化场；净化场：每半年检测一次，每次以群内预期流行率为2%用证明无疫的方式随机抽检（引入风险监测概念）。,四、结核病与布病监测净化技术的应用,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用1/13,1 研究目的1.1 测量布鲁氏菌病的流行率1.2 寻找本病传播潜在的风险因素,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用2/13,2 目标群体和研究单元 目标群体：县奶牛 研究单元：42个规模化奶牛场（户）3 研究方法 采用流行病学研究方法之一：横断面研究,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用3
35、/13,3.1 抽样策略：两阶段抽样法根据专家意见，本地区布鲁氏菌的群预期流行率为10%，个体预期流行率为5%。群体水平抽样：当置信水平=95%，可接受误差=6%时，通过用测量流行率的抽样方法进行计算可知在本研究中需要抽取30个奶牛场，这30个奶牛场用随机数字表来从上述42个奶牛场中进行随机抽取。个体水平抽样：当置信水平=95%，可接受误差=3%，奶牛群存栏数量190头到5200时，通过用测量流行率的抽样方法进行计算可知在本研究中所选择的30个场的抽样数量。,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用4/13,3.2 寻找潜在布病传播风险因素通过结合问卷调查和检测结果寻找主要的潜在风险因素。问卷调
36、查中应考虑主要的风险因素：奶牛场是否引入奶牛引入的奶牛是否进行检测引入的奶牛混群前是否隔离检疫挤奶前挤奶工的手或挤奶杯是否进行消毒奶牛场是否混养其他哺乳动物奶牛场多长时间进行一次消毒等等。,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用5/13,3.3 奶牛场GPS定位利用佳明GIS卫星定位器对采样框涉及的所有42个奶牛场进行卫性定位，采集每个奶牛场的经纬度。利用GIS软件绘制此42个奶牛场的分布图。,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用6/13,3.4 实验室检测方法特性血清学检测采用虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(TAT)两种方法进行垂直试验检测，其中虎红平板凝集试验用于筛检，而试验
37、凝集试验用于筛检阳性样品的复核确认阳性。在进行垂直试验检测时，RBPT敏感性Se=95%，特异性Sp=80%；TAT用Se=85%，特异性Sp=90%。利用垂直试验的公式计算出两种方法垂直检测时的敏感性CSe为80.75%；特异性CSp为98%。,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用7/13,4 数据收集及分析收集两类数据，其中一类数据来源于调查问卷，第二类数据来源于实验室检测结果。数据分析：奶牛个体流行率：TP=(AP+CSp-1)/(Cse+CSp-1)，95%置信区间根据公式：计算。奶牛群流行率：TPf=(APf+CSp-1)/(Cse+CSp-1)。群内相关系统（ICC）=（MSC-
38、MSE）/(MSC+(Ma-1)*MSE)风险因素分析：利用SPSS20.0软件进行单因素logistic回归分析，寻找相关风险因素，并对找到的多个风险因素进行多因素logistic回归分析，探讨风险因素交互作用对布病传播的影响。,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用8/13,5 结果与分析5.1 奶牛场卫星定位,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用9/13,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用10/13,5.3 个体流行率和奶牛群体流行率,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用11/13,5.4 计算群内相关系数（ICC）根据参考文献提供的公式计算出本次奶牛场布病场内相关系数为0.06
39、。ICC取值范围为01。,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用12/13,5.5 风险因素分析,（一）奶牛布鲁氏菌监测技术在A县的应用13/13,6 小结个体真实流行率为1.32%（CI：0.97，1.65）；群真实流行率为48.3%（CI：30.4，66.2）；本次奶牛场布病群内相关系数（ICC）为0.06；找到两个风险因素：一是购牛时不进行布鲁氏菌检测 二是混群前不进行隔离提示：该县奶牛布病群感染率非常高，而个体感染率相对较低，在布病防控时建议不采取免疫策略，而应采取持续监测，淘汰阳性奶牛，逐步清群净化的方式来建立无布病奶牛群。,（二）县羊群流产率与布鲁氏菌病关联研究1/8,1 研究目的
40、研究B县种羊群流产率与布鲁氏菌病之间的关联程度。2 材料与方法2.1目标群体和研究单元本研究的目标群体是B县39个种羊场（户）的所有母羊。2.2研究方法采用横断面研究，调查检测选定的39个种羊场（户）。2.3 实验室检测PBRT和TAT,（二）县羊群流产率与布鲁氏菌病关联研究2/8,3 数据收集及分析3.1数据收集本研究将收集两类数据，其中一类数据来源于现场调查，第二类数据来源于实验室检测结果。3.2 数据分析方法用SPSS 20.0软件对所得数据进行统计学分析，研究母羊流产与布鲁氏菌病之间的关联性。分析指标包括：卡方值、OR值和列联系数。,（二）县羊群流产率与布鲁氏菌病关联研究3/8,4 结
41、果与分析4.1 调查和检测结果,表4-1 调查的39个羊场（户）中9个流产场（户）统计,39个羊场9个流产场，检测全部阳性；30个非流产场，检测3个阳性。,（二）县羊群流产率与布鲁氏菌病关联研究4/8,表4-2 调查的39个羊场（户）中3个非流产场（户）统计,表4-3 羊场（户）检测结果统计（2*2表的建立）,（二）县羊群流产率与布鲁氏菌病关联研究5/8,4.2 流产场（户）与非流产场（户）检出布鲁氏菌之间的差异分析：OR27*9/3*0无穷大，说明流产场（户）检出布鲁氏菌阳性的比值（ODDS）是非流产场（户）检出布鲁氏菌阳性的无穷大倍数。,表4-6 流产场（户）与非流产场（户）检出布鲁氏菌之
42、间的差异分析（卡方检验）,（二）县羊群流产率与布鲁氏菌病关联研究6/8,4.3 流产场（户）与布鲁氏菌检测阳性场（户）之间的关联度分析,列联系数小于0.3关联低，0.30.7中度关联，大于0.7高度关联。,（二）县羊群流产率与布鲁氏菌病关联研究7/8,4.4 流产母羊与非流产母羊检出布鲁氏菌之间的差异分析,OR28*830/7*23144.35，说明流产母羊检出布鲁氏菌阳性的比值（ODDS）是非流产母羊检出布鲁氏菌阳性的比值的144.35倍。,（二）成武县羊群流产率与布鲁氏菌病关联研究8/8,4.5 流产母羊与布鲁氏菌检测阳性之间的关联度分析,小结,流产场（户）与非流产场（户）相比，极易检出布鲁氏菌阳性。流产母羊与非流产母羊相比，极易检出布鲁氏菌阳性。母羊流产率高与布鲁氏菌病的感染存在较高的关联度。,（三）奶牛结核病监测净化技术在县的应用,检测15个奶牛场，阳性场3个，群流行率为20%；574头牛初检46头阳性，个体流行率为8%。,谢谢指导！请多提宝贵意见。,
