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1、几种常用的特殊染色,磷钨酸-苏木素染色法(PTAH),PTAH,苦味酸-酸性品红法(V.G.),VG液:1%酸性品红液 1份 苦味酸饱和水溶液 15份步骤:1 常规切片脱蜡至水 2 苏木素染核(可省)3 入VG液中1-2分钟 4 快速水洗,烘干透明封固,结果:胶原纤维红色 肌纤维黄色优点:省去分化,两种纤维着色均 且鲜明艳丽,弹力纤维染色法,间苯二酚品红液:碱性品红2.0g 30%三氯化铁25ml 间苯二酚4.0g 浓盐酸 4ml 蒸馏水 200ml+加热溶解,玻棒搅拌煮沸后慢慢加入,搅拌继续煮沸3-5分钟,冷却过滤,滤液倾去不用,将滤纸和沉淀物一起放回烧杯内,温箱中烘干,取出后加95%酒精2
2、00ml,隔水煮至沉淀物完全溶解后取出滤纸,冷却后过滤,补足蒸发的酒精,最后加入,冰箱保存(3-6)。,步骤:1 常规切片脱蜡至95%酒精2 入间苯二酚品红液1-2小时3 95%酒精分化,镜下控制4 Van Gieson半分钟,速水洗5 烤箱烘干,透明,封固结果:弹力纤维蓝黑色 胶原纤维红色 肌纤维和红细胞黄色,间苯二酚品红法,弹力纤维染色的应用,1.观察皮肤组织中弹力纤维的变化,邦助诊断皮肤组织病变。2.显示与判断心血管疾病:如鉴别心内膜弹力纤维增生症与心内膜心肌纤维化;在动脉硬化、主动脉炎时观察动脉壁破坏情况等。3显示组织内弹力纤维断裂、变性等病变,如慢支、肺气肿等。4.显示与鉴别肿瘤组织
3、,如弹力纤维瘤、乳腺早期导管浸润癌。,胶原纤维染色(Masson法),(试剂配制)丽春红酸性品红液:丽春红G 0.7g 酸性品红0.3 g蒸馏水 99ml 冰醋酸 1.0ml磷钼酸:磷钼酸 1.0g 蒸馏水99ml亮绿液:亮绿 1.0g 蒸馏水99ml 冰醋酸1.0ml,Masson 法,1 切片脱蜡至水.2 苏木素染核(可略)3 丽春红酸性品红5分钟4 快速水洗.蒸馏水洗5 1%磷钼酸滴染1-3分钟6 倾去余液直接滴加亮绿液5分钟7 快速水洗后烤箱烘干,透明封固结果:胶原纤维绿色 肌纤维红色,胶原纤维染色的应用,1.区别胶原纤维与肌纤维。2.观察某些病变组织的纤维化及程度等。,网状纤维染色(
4、Gomori)法,Gomori法,网状纤维染色的应用:,脂肪染色,脂肪染色(苏旦)法,AB(pH2.5)染色法,AB(pH2.5)染色法,无色品性配制,PAS染色法 高碘酸-无色品红法,碱性品红 1.0g 蒸馏水 170ml 1N盐酸 30ml 偏重亚硫酸钠 3.96g 活性炭 2.0g(第二天称)碱性品红(用研钵磨细更佳)加入蒸馏水中溶解后依次加入盐酸及偏亚硫酸钠,塞住瓶口(锥形瓶、小口瓶比较好)摇动容器以充分混和(此时颜色会有明显变化)放置过夜后加入活性炭摇动数分钟静止1小时后过滤,呈无色或淡稻草黄色为佳。(不用时冰箱4左右保存),染色方法:1 常规切片、脱蜡至蒸馏水2 0.5%高碘酸氧化
5、5-10分钟3 流水冲洗数分钟,蒸馏水洗一次4 无色品红20分钟 5 水洗 5分钟后苏木素染核6 常规脱水(或烤箱烘干)透明封固结果:糖原或中性粘液或霉菌等 鲜红色,核蓝色。,注意事项,1 配制过程中玻璃器皿要干净,试剂要纯。2 无色品红建议滴染,用后即弃,3 苏木素染核可用Harris 氏,但一定要浅 染,如过深可用盐酸分化。4 染糖原时可不染核,但应同时做淀粉酶 阳性对照片,PAS染色的应用,可显示糖原 在明确细胞内空泡的性质、糖原贮积病的诊断以及某些透明细胞肿瘤的诊断等方面具有鉴别作用。可显示中性粘液 在确认腺癌的鉴别诊断中有重要价值。3 显示基底膜 在肾小球肾炎的诊断与分类中广泛应用。
6、4 对某些肿瘤组织内的嗜酸性物质或嗜酸性小体的确认有帮助。,HID染色法,Southgate胭脂红染色,染色步骤:,染色步骤:,含铁血黄素,染色步骤:,胆色素,纤维素,染色步骤:,HP(美蓝法),蓝液:美蓝(亚甲基蓝)1.0g,硼酸 0.5g加蒸馏水至 100ml 常温下经久耐用步骤:1 切片脱蜡至水 2 入美蓝液中1分钟 3 水洗后烤箱烘干封固(不宜酒精脱水)结果:幽门弯曲菌深蓝色,抗酸染色,碱性品红酒精液 碱性品红 5g 无水酒精100ml5%苯酚水溶液 苯酚 5ml 蒸馏水 95ml苯酚碱性品红液 碱性品红酒精液 1ml 5%苯酚水溶液 9ml,1.切片二甲苯脱蜡,95%酒精速洗2.蒸馏水洗3.苯酚碱性品红液染20分钟4.蒸馏水洗5.2%硫酸水溶液分化至适当6.水洗,烘干,透明,封固结果:抗酸菌呈红色,中华病理技术网,谢 谢,