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1、T淋巴细胞亚群【摘要】 目的：研究艾滋病病毒感染对外周血t淋巴细胞亚型的影响。方法：采用流式细胞计数仪检测我市1155例hiv感染者外周血中t淋巴细胞亚型的变化。结果：hiv感染者cd4细胞百分数和cd4/cd8比值显著降低，cd8细胞百分率明显升高，差异有统计学意义（p0.05）。结论：hiv感染者t淋巴细胞亚群的检测，对判断病情和评估疗效均有重要的临床价值。【关键词】 fcm；hiv；t淋巴细胞亚群analysis of t lymphocyte phenotype of 1155 hiv infected persons in peripheral bloodli qiao qing c
2、hen yan zhipeople抯 hospital of bao shan yun nan province 678000 china【abstract】 objective: to study hiv infection on t lymphocyte subtype of peripheral blood.methods: the peripheral blood t lymphocyte phenotype changes of 1155 hiv infected persons detected by flow cytometric in our city. results: pe
3、rcentage of cd4 cell and ratio of cd4/cd8 hiv infected significantly decreased, percentage of cd8 cell was significantly higher, the difference was statistically significant (p 0.05). conclusion: the detection of t lymphocyte subsets in hiv infected persons for judging the conditions of patient and
4、assessment of effect of curing disease has important clinical value.【keywords】 fcm;hiv;t cell subsets准确可靠的cd4+t淋巴细胞检测是评价hiv感染者免疫功能状况，预测病程进展，确定疾病分期和治疗时期，评价抗病毒药物治疗效果和估测预后的主要指标。进行性cd4+t淋巴细胞损耗可能与临床上出现严重症状有关，也预示可能预后不良。世界卫生组织（who）和欧美等国家均推荐hiv感染者每36个月监测一次cd4+t淋巴细胞水平，并以该指标作为开始预防间质性浆细胞肺炎和其它机会性感染，以及开始抗逆转录病毒治疗
5、的因素。我院按照国家抗病毒治疗的相关规定执行，我科hiv检测实验室为抗病毒治疗提供及时、准确的数据。1资料与方法11临床资料1155例患者均为我市hiv抗病毒治疗病人，男688例，女467例。最大年龄75岁，最小年龄2岁，平均年龄（36.513.87）岁。12仪器与试剂仪器为美国bd facscalibur流式细胞分析仪使用bd calibrite微球，运行facscomp软件进行仪器的质量控制。定期进行仪器校准，做好室内质量控制，参加实验室能力验证。使用 multiset软件及配套三色试剂cd3cd4cd8来获取和分析t淋巴细胞亚群。1.3流式细胞术计数法原理流式细胞术(fcm)是对细胞和微
6、粒进行快速、灵活、定量分析分类的高精技术，它融合了激光、电子计算机、单克隆抗体、荧光素化学、细胞化学染色等技术的优点。其基本原理是以激光为光源，将被检细胞用荧光标记抗体结合后输入流式细胞仪，通过高速流动系统对细胞排列成行，一个一个的流经检测区，当细胞从流动室喷嘴处流出时，超声振荡搅动液流，使液流断裂成一连串均匀的小滴，每滴内最多只含有一个细胞，细胞经荧光探针的光反应和标记物的光散射能力中获取信息，由光电倍增管接收并转化成脉冲信号，并进行增强，数据经电脑处理、分辨细胞的类型从而检测出各类淋巴细胞。14检测方法标本使用抗凝全血，在falcon流式进样管内加入20ul t淋巴细胞cd3cd4cd8抗
7、体和反向加样50ul全血，轻轻充分混匀，置室温避光处放置15min，加入10倍稀释facs溶血素450ul，置室温避光处放置15min。用multiset自动软件获取15000个淋巴细胞，自动分析t淋巴细胞免疫亚型，报告cd4+,cd8+t淋巴细胞百分率cd4+,cd8+t淋巴细胞绝对计数及cd4+/cd8+比值。15统计学处理实验数据用spss 13.0软件包处理，数据采用均数标准差（xs）表示。2结果2.1hiv感染者t淋巴细胞亚群结果如下：hiv感染者cd4+细胞百分率，cd4+,cd8+t淋巴细胞绝对计数，cd4+/cd8+比值显著降低，cd8+细胞百分率则明显增加。结果见表1。22h
8、iv感染者年龄，性别对细胞免疫功能的影响：结果见表2。2.3成人及青少年艾滋病分期标准（cdc，美国，1993年）（见表3)cd43.4在t淋巴细胞分类中，cd4代表t辅助细胞而cd8代表t抑制细胞和t杀伤细胞。cd4+t淋巴细胞是hiv感染的主要靶细胞，而其本身又是免疫反应的中心细胞；cd8+t淋巴细胞是免疫反应的效应细胞。正常人的cd4+t淋巴细胞约占总的t淋巴细胞的65%，cd8+t淋巴细胞约占35%。3.5人体感染了hiv后，涉及的主要病理过程就是免疫系统的损害，主要表现为：cd4+t淋巴细胞的丢失，绝对计数的减少，同时cd8+t淋巴细胞数量增加，cd4和cd8的比例失调。因此cd4+
9、，cd4+t淋巴细胞计数作为直接测定免疫功能的方法，是提供hiv感染病人免疫系统损害状况最明确的指标。3.6用于hiv感染者的疾病分期：凡cd4+t淋巴细胞200/mm3或cd4+t淋巴细胞的百分比14%的hiv感染者可归入艾滋病。3.7判断hiv感染者的临床合并症（各种机会性感染与cd4+t淋巴细胞的相关性），如cd4+t淋巴细胞200/mm3时，很容易发生卡氏肺囊虫肺炎；而巨细胞病毒感染和鸟分支杆菌感染常发生于cd4+t淋巴细胞50/mm3的病人，极少见于cd4+t淋巴细胞100/mm3的病人。帮助确定抗hiv药物治疗及机会性感染预防性治疗的适应症，例如，当cd4+t淋巴细胞200/mm3
10、时，应给予抗卡氏肺囊虫肺炎的预防性治疗。3.8通过检测1155例hiv感染者的t淋巴细胞亚群，结果显示：hiv感染者cd4+细胞百分率及cd4+/cd8比值显著降低，而cd8+细胞明显增高。其中cd4+细胞百分率14%者占26.6%，提示部分人已发展为aids。不同年龄的hiv感染者不影响t淋巴细胞亚群在外周血中的表达，但不同性别的hiv感染者3项指标均存在一定的差异，从结果分析看，男性cd4+细胞百分率和cd4+/cd8+比值下降比女性更显著。3.9抗hiv药物疗效的重要判断指标hiv感染是指人体感染hiv后直至发展为aids的全过程，时间长，临床表现错综复杂。随着对hiv抗病毒治疗工作的深
11、入和发展，本院对我市1155例抗病毒治疗病人的t淋巴细胞亚群进行检测分析，结合hiv病毒载量检测和耐药监测，以了解hiv感染者t淋巴细胞亚群的特点及其与艾滋病病情的关系，对hiv感染病人进行临床分期，指导临床医生对抗病毒治疗药物调整，指导艾滋病患者的抗病毒治疗，确定治疗时机，选择治疗方案，评价治疗效果，为我市的防艾工作提供科学有效的数据。总之，hiv感染者定期检测t淋巴细胞亚群，对制定最恰当的治疗计划，指导预防方案和进行临床治疗均有重要的临床意义。参考文献1周先志，赵敏.艾滋病诊疗新技术m.北京：人民军医出版社，2005：9-252paul me,shcarcr wt,kozinctz ca,et parison of cd8+ t cell subsets in hivinfected rapid progressor children versus non-rapid.pro-gressor childrenj.j allergy clin lmmunol,2001,108(2):258-2643肝硬化患者外周血及腹水t淋巴细胞亚群的变化及意义j.胃肠病学和肝病学杂志,2006,15(6):601-602
