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1、一、 实验目的 学习引物设计软件PrimerPremier5的基本使用方法。二、实验内容 1.从NCBI的数据库 查出HPV-16的E6 E7基因并存为plain text记事本格式。 2.下载并安装PrimerPremier5,导入Key,激活软件.3.打开E6 E7基因序列,显示双链格式.翻译为蛋白序列.找出motif和酶切位点.4.进行primer search,找出sense、antisense及pairs最合适的引物.1.“Premier”软件启动界面如下: 2.进行引物设计时,点击“Premier”按钮,界面如下:3.进一步点击search按钮,出现“search criteria
2、”窗口,有多种参数可以调整。搜索目的(Seach For)有三种选项,PCR 引物(PCR Primers) ,测序引物(Sequencing Primers) ,杂交探针(Hybridization Probes) 。搜索类型(Search Type)可选择分别或同时查找上、下游引物(Sense/Anti-sense Primer,或 Both) ,或者成对查找(Pairs) ,或者分别以适合上、下游引物为主(Compatible with Sense/Anti-sense Primer) 。另外还可改变选择区域(Search Ranges) , 引物长度 (Primer Length) , 选择方式 (Search Mode) , 参数选择 (Search Parameters)等等。使用者可根据自己的需要设定各项参数。如果没有特殊要求,建议使用默认设置。然后按 ,随之出现的 Search Progress窗口中显示 Search Completed 时,再按 ,这时搜索结果以表格的形式出现,有三种显示方式,上游引物(Sense) ,下游引物(Anti-sense),成对显示(Pairs)。默认显示为成对方式,并按优劣次序(Rating)排列,满分为 100,即各指标基本都能达标(如下图) 。