各种培养基配方.doc

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1、1营养肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121高压灭菌15min。2营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH7.2。制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121，15min高压灭菌备用。3MRS培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO42g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，（琼脂1520g），蒸馏水100

2、0mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.26.4，分装于三角瓶中，121,灭菌15min。4脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。制法：将适量的牛奶加热煮沸2030min，过夜冷却，脂肪即可上浮。除去上层乳脂即得脱脂乳。将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108条件下蒸汽灭菌1015min，即得脱脂乳培养基。5培养基A成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，琼脂15.0g，水1000mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至7.07.2，分装于三角瓶中，121，灭菌15min。6PTYG培养基成分：胰

3、胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂1520g，L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.87.0，分装于三角瓶中，115灭菌30min。盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，K2HPO41.0g，KH2PO41.0g，MgSO4 。7H2O 0.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。7豆芽汁液体培养基成分：豆芽汁10mL，磷酸氢二铵1g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，琼脂20g。制法：将以上成分

4、加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.26.4，分装于三角瓶中，0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黄色5.26.8紫色）作为指示剂，115灭菌20min。豆芽汁制备：将黄豆芽或绿豆芽200g洗净，在1000mL中煮沸30 min，纱布过滤得豆芽汁、补足水分至1000mL。8麦芽汁琼脂培养基成分：优质大麦或小麦，蒸馏水，碘液。制法：取优质大麦或小麦若干，浸泡612h，置于深约2cm的木盘上摊平，上盖纱布，每日早、中、晚各淋水一次，麦根伸长至麦粒两倍时，停止发芽晾干或烘干。称取300g麦芽磨碎，加1000mL水，38保温2h，再升温至45，30min，再提高到50，30min，再升至60，糖化1

5、1.5h。取糖化液少许，加碘液12滴，如不为蓝色，说明糖化完毕，用文火煮半小时，四层纱布过滤。如滤液不清，可用一个鸡蛋清加水约20mL调匀，打至起沫，倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤，即可得澄清麦芽汁。用波美计检测糖化液浓度，加水稀释至10倍，调pH56，用于酵母菌培养；稀释至56倍，调pH7.2，可用于培养细菌，121灭菌20min。9查（察）氏培养基成分：NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4. 7H2O 0.5g，KCL 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，蔗糖30g，琼脂1520g，蒸馏水1000mL，pH值自然。制法：加热溶解，分装后121灭菌20min。10马铃薯葡萄糖

6、琼脂培养基（PDA）成分：马铃薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂20g，水1000mL。制法：pH值自然。将马铃薯去皮、洗净、切成小块，称取200g加入1000mL蒸馏水，煮沸20min，用纱布过滤，滤液补足水至1000mL，再加入糖和琼脂，溶化后分装，121灭菌20min。另外，用少量乙醇溶解0.1g氯霉素，加入1000mL培养基中，分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离。11PY基础培养基成分：蛋白胨0.5g，酵母提取物1.0g，胰酶解酪胨 (Trypticase) 0.5g，盐溶液 4.0mL，蒸馏水1000mL。盐溶液成分：CaCL2 0.2g，MgSO4.7H2O

7、 0.48g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，NaHCO3 10.0g，NaCL 2.0g，蒸馏水1000mL。制法：加热溶解，分装后121灭菌20min。12甘露醇琼脂培养基（MSA）成分：牛肉浸膏1g，月示胨NO.3（Difco）10g，D-甘露醇10g，NaCL 75g，琼脂约13g，酚红0.025g，水1000mL，pH7.27.6制法：按量将各成分（酚红除外）混合，加热使完全溶解，调pH至7.40.2。加1%的酚红溶液2.5mL，混匀。121高压灭菌15min13高氏一号（淀粉琼脂）培养基（主用于放线菌、霉菌培养）可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCL 0.5g，

8、K2HPO40.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，121灭菌20min。14淀粉铵盐培养基 （主要用于霉菌、放线菌培养）可溶性淀粉10g，（NH4）2SO4 2g，K2HPO4 lg，MgSO4.H2O lg，NaCL 1g，CaCO3 3g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，121灭菌20min。若加入1520g琼脂即成固体培养基。15麦氏培养基（醋酸钠琼脂培养基）葡萄糖1.0g，KCL 1.8g，酵母汁2.5g，醋酸钠8.2g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，pH自然，0.7kg/cm2灭菌30mi

9、n。16高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用)硝酸钠2g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁（MgSO4 7H2O）0.5g，氯化钾 0.5g，硫酸亚铁0.01g，氯化钠60g，蔗糖30g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，115灭菌30min。注：分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基。分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基。17糖、醇类发酵基础培养基（1）一般细菌常以休和利夫森二氏培养基蛋白胨5g，NaCL 5g，K2HPO4 0.2g，糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g，琼脂56g，1溴甲酚紫（溴百里香草酚蓝）3mL，蒸馏水1000mL，pH7.07.2，分

10、装试管，培养基高度约4.5cm，115灭菌20min。（2）芽孢菌培养基(NH4)2HPO4 1.0g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，酵母膏0.2g，琼脂56g，糖或醇类10.0g，蒸馏水1000mL，溴甲酚紫（0.04）15mL，pH7.07.2，分装试管，培养基高度约45cm，112灭菌30min。（3）乳酸菌培养基蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母膏5g，吐温80（Tween 80）0.5mL，糖或醇10g，琼脂56 g，蒸馏水（自来水）1000mL，加入1.6溴甲酚紫溶液约1.4mL。以上调pH6.87.0，分装试管，112灭菌30min。18硝酸盐培养基（硝酸盐还原试验

11、用）蛋白胨5.0g，KNO30.2g, 蒸馏水1000 mL，pH7.4，每管分装45mL，121灭菌1520min。吲哚实验培养基：1胰蛋白胨，调pH7.27.6，分装1/31/4试管，115灭菌30min。19硫化氢试验（纸条法）培养基蛋白胨10g，NaCL 5g，牛肉膏10g，半胱氨酸0.5g，蒸馏水1000mL，pH7.07.4，分装试管，每管液层高度45cm，112灭菌2030min。另外将普通滤纸剪成0.51cm宽的纸条，长度根据试管与培养基高度而定。用510的醋酸铅将纸条浸透，然后用烘箱烘干，放于培养皿中灭菌备用。20尿素培养基(尿酶试验)成分：蛋白胨1.0g，葡萄糖1.0g，N

12、aCL 5.0g，KH2PO4 2.0 g，0.4酚红3.0mL，琼脂20.0g，20尿素100.0mL，pH7.17.4。制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH值，加入琼脂，加热熔化并分装于三角瓶，121灭菌15min，冷却至5055，加入过滤除菌的尿素溶液，分装于灭菌试管内，摆成琼脂斜面备用。21氮源利用基础培养基KH2PO4 1.36g，NaH2PO4 2.13g，MgSO47H2O 0.2g，FeSO4.7H2O 0.2g，CaCL2 0.5g，葡萄糖10.0g，蒸馏水1000mL。将需要测定的氨基酸、氨态氮（如磷酸氢二氨）、硝态氮（如硝酸钾）加入到上述基础培养基中，使其终浓度

13、为0.050.1，如测定菌不能利用葡萄糖为碳源，可用其它碳源代替（终浓度为0.20.5），另做一份不加氮源的空白对照，调pH7.07.2，分装于试管，每管45mL，112灭菌2030min，制备出的培养基要求无沉淀。22甲基红培养基（M.R及V-P试验用）蛋白胨7.0g，葡萄糖5.0g，K2HPO4（或NaCL）5g，水1000mL，pH7.07.2，每管分装45mL，115灭菌30min。23动力、靛基质、尿素（MIU）综合培养基 （用于检验细菌运动性、吲哚、尿素酶用）蛋白胨（含色氨酸）30 g，KH2PO4 2g、NaCL 5g、琼脂3 g、0.2%酚红酒精溶液2mL、尿素20g、蒸馏水1

14、000mL。分装于小试管，112灭菌15min，灭菌后液体应呈淡黄色。24半固体培养基（用于细菌的动力试验）牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，琼脂35g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，熔化后分装试管（8mL）121灭菌15min，取出直立试管待凝固。25M17琼脂培养基（分离、培养乳球菌等的选择培养基）植物蛋白胨5g，酵母粉5g，聚蛋白胨5g，抗坏血酸0.5g，牛肉膏2.5g，MgSO47H2O 0.01g，ß-甘油磷酸二钠19g，蒸馏水1000mL，121灭菌15min。26蛋白胨水溶液（靛基质试验用）蛋白胨20.0g，NaCL 5.0g，蒸馏水1000mL，pH7.4，

15、121灭菌15min。27精氨酸双水解酶实验培养基成分：蛋白胨1g，氯化钠5g，K2HPO40.3g，L-精氨酸10g，琼脂10g，酚红0.01g，蒸馏水1000mL。制法：除酚红外，将以上各成分溶解，调节pH7.07.2，加入指示剂，分装试管，培养基高约45cm，121灭菌20min备用。28葡萄糖氧化发酵培养基成分：蛋白胨2g，氯化钠5g，1溴百里酚蓝水溶液3mL，琼脂56g，K2HPO40.2g，葡萄糖1，蒸馏水1000mL。制法：除溴百里酚蓝外，溶解以上各成分，调节pH值为6.87.0，分装试管，用115灭菌20min备用。29假单胞菌选择培养基（PSA）基础成分：多价胨16g，水解酪

16、蛋白10g，硫酸钾10g，氯化镁1.4g，琼脂11g，甘油10mL，蒸馏水1000mL，pH7.10.2。CFC选择添加物：溴化十六烷基三甲胺10mg/L，梭链孢酸钠10mg/L，头孢菌素50mg/L。制法：先将基础成分加热煮沸使之完全溶解，121，15min条件下灭菌。冷却到50备用。当基础培养基冷却到50后加入溶解后过滤除菌的CFC补充物，完全混合后倒平板备用。30乳糖胆盐发酵培养基成分：蛋白胨20g，猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。制法：将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10mL，并放入一

17、个小倒管，115，15min高压灭菌.注：双料乳糖胆盐培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。31伊红美兰琼脂培养基成分：蛋白胨20g，乳糖10g，磷酸氢二钾2g，琼脂17g，2%伊红Y溶液20mL，0.65%美兰溶液10mL，蒸馏水1000mL，pH7.1。制法：将蛋白胨、磷酸氢二钾和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH，分装于烧瓶内，高压灭菌121，15min备用。临用时，加入乳糖，并加热溶化琼脂，冷至5055，加入伊红和美兰溶液，摇匀，倾注平板。32乳糖发酵培养基成分：蛋白胨20g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。制法：将蛋白胨、乳糖溶于水中，校正pH，加入

18、指示剂，按检验要求分装30mL、10mL或3mL，并放入一个小倒管，115，15min高压灭菌。33胰酪胨大豆肉汤成分：胰酪胨（或胰蛋白胨）17g，植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g，氯化钠100g，磷酸氢二钾2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000mL。制法：将上述成分混合，加热并轻轻搅拌溶液，分装后12115min高压灭菌。最终pH7.30.2。347.5%氯化钠肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠75g，蒸馏水1000mL，pH7.4。制法：将上述成分加热溶解，校正pH，分装试管，12115min高压灭菌。35豆粉琼脂成分：牛心消化汤1000mL，琼脂20g，黄豆粉浸液50mL，pH

19、7.47.6。制法：将琼脂加在牛心消化汤中，加热溶解，过滤。加入黄豆粉浸液，分装每瓶100mL，12115min高压灭菌。36血琼脂平板成分：豆粉琼脂100mL，脱纤维羊血（或兔血）510mL。制法：加热融化琼脂，冷至50，以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血，摇匀，倾注平板。或分装灭菌试管，摆成斜面。37aird-Parker氏琼脂平板成分：胰蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏1g，丙酮酸钠10g，甘氨酸12g，氯化锂（LiCL6H2O）5g，琼脂20g，蒸馏水950mL，pH7.5。增菌剂的配法：3050%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合，保存在冰箱内。制法：将各成分加到蒸

20、馏水中，加热煮沸至完全溶解。冷至25，矫正pH。分装每瓶95mL，121高压灭菌15min。临用时，加热融化琼脂，冷至50，每95mL加入预热至50的卵黄-亚碲酸钾增菌剂5mL，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。38肉浸液成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000mL，pH 7.47.6。制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后矫正pH7.47.6煮沸并过滤，分装烧瓶，

21、121，30min高压灭菌。39兔血浆成分：柠檬酸钠0.106 mol/L（31.3g Na3C6H5O72H2O溶于1L蒸馏水中）制法：一份加兔血9份混合后离心2000rpm，10min吸取上清液即为兔血浆。40肠毒素产毒培养基成分：蛋白胨20g，胰消化酪蛋白200mg，氯化钠5g，磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，硫酸镁0.2g，菸酸0.01g，蒸馏水1000mL，琼脂1012g（固体透析培养用），pH7.27.4。41葡萄糖肉浸液肉汤成分：绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，葡萄糖10g，蒸馏水1000mL，pH7.47.6。制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，

22、混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、葡萄，氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH，煮沸并过滤、分装，12130min高压灭菌。42牛心浸液成分：绞碎牛心500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000mL，pH7.47.6。制法：将绞碎牛心500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH，煮沸并过滤、分装，121，30min高压灭菌。43匹克氏肉汤 成分：含1%胰蛋白胨的

23、牛心浸液200mL，1：25000结晶紫盐水溶液10mL，1：800三氮化钠溶液10mL，脱纤维兔血（羊血）10mL。制法：将上述已灭菌的各种成分，无菌依次混合，分装于无菌试管内，每管2mL，保存冰箱内备用。44胰蛋白胨大豆胨琼脂（TSA）成分：胰蛋白胨15g，大豆胨5g，氯化钠5g，琼脂约13g，蒸馏水1000mL，pH7.17.5。制法：按量将各成分溶解，加热使完全溶解，调pH值，121，15min灭菌。45缓冲蛋白胨水(BP)培养基成分：蛋白胨l0g，NaCL5g，Na2HPO4.12H20 9g，H2PO4 1.5g，蒸馏水1000mL，pH7.2。制法：121灭菌15min，沙门氏菌

24、前增菌使用。46氯化镁孔雀绿(MM)增菌液成分：甲液：胰蛋白胨5g，NaCL 8g，KH2P04 1.6g，蒸馏水1000m1乙液：MgCL2 40g，蒸馏水100mL丙液：0.4孔雀绿水溶液制法：分别按上述成分配好后，121灭菌15min备用。临用时取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL以无菌操作混合即成。47四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液成分：多胨或胨1g，CaCO3 10g，Na2S203 30g，蒸馏水1000m1。制法：将各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100m1。分装时应随时振荡，使其中的CaCO3混匀。121灭菌15min备用。临用时每100m1培养基中加入碘溶液2m1

25、、0.1煌绿1m1。 48亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液成分：蛋白胨5g，乳糖4g，亚硒酸氢钠4g，Na2HPO4 5.5g，KH2PO4 4.5g，L胱氨酸0.01g，蒸馏水1000m1，pH7.0。制法：将除亚硒酸氢钠和胱氨酸以外的各种成分溶解于900mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却，以无菌操作与上液混合。再加入1L-胱氨酸氢氧化钠溶液1m1。分装于灭菌瓶中，每瓶l00mL。49亚硫酸铋琼脂(BS)培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏5g，葡萄糖5g，FeSO40.3g，Na2HPO4 4g，煌绿0.025g，柠檬酸铋铵2g，Na2SO46

26、g，琼脂20g， 蒸馏水1000mL，pH7.5。制法：将前5种成分溶解于300mL蒸馏水中，再将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50m1蒸馏水溶解。将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，冷至80左右。将以上三液合并，补充蒸馏水至1000m1，校正pH，加0.5煌绿水溶液5mL ；摇匀。冷却至5055，倾注平板。注：此培养基不需高压灭菌。制备过程中不宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前一天制备，贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。50DHL琼脂培养基成份：蛋白胨20g，牛肉膏3g，乳糖10g，蔗糖10g，去氧胆酸钠1g，Na2S2032.3g，柠檬酸钠1g，柠檬酸铁铵1g，中性红0.03g，琼脂20

27、g，蒸馏水1000mL，pH7.3。制法：除中性红和琼脂外，将其他成分溶解于400m1蒸馏水中，校正pH值。再将琼脂溶于600mL蒸馏水中，两液合并，加0.5中性红水溶液6mL，待冷至5055，倾注平板。51HE琼脂培养基成份：月示 胨12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖g，水杨素2g，胆盐20g，NaCL 5g，琼脂20g，蒸馏水1000m1，0.4溴麝香草酚蓝溶液16mL，Andrade指示剂20mL，甲液20mL，乙液20m1。制法：将前七种成分溶解于400mL蒸馏水中。作为基础液，加入甲液和乙液，校正pH值为7.5，再加入指示剂；将琼脂溶于600m1蒸馏水中。二者合并，待冷至5055，

28、倾注平板。注：此培养基不可高压灭菌；Andrade指示剂：酸性复红0.5g，1M NaOH溶液16m1，蒸馏水100mL。制法为：将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如果复红退色不全，再加氢氧化钠溶液12mL。甲液：Na2S203 34g，柠檬酸铁铵4g，蒸馏水100m1。乙液：去氧胆酸钠10g，蒸馏水100mL。52S.S.琼脂（1）基础培养基成分：牛肉膏5g，月示 胨5g，三号胆盐3.5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL。制法：将牛肉膏、月示 胨和胆盐溶解于400mL蒸馏水中，将琼脂溶于500m1蒸馏水中，二液混合，121灭菌15min备用。 （2）完全培养成分：基础培养基10

29、00mL，乳糖10g，柠檬酸钠8.5g，Na2S2038.5g，10柠檬酸铁溶液10m1，1中性红溶液2.5m1，0.1煌绿溶液0.33m1。制法：加热熔化基础培养基，按比例加入上述染料以外的各成分，充分混合均匀，校正pH值为7.0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。注：制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48h内使用；煌绿溶液配好后应在10d以内使用。53靛基质试验培养基成分：蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.37.5。制法：称取各成分，加入水中加热溶化。用1mol/L NaOH调至pH 7.47.5。分装小试管，每管约3mL，116，15min高压灭菌后410保存备用。5

30、4三糖铁琼脂（TSI）成分：蛋白胨20g，硫代硫酸钠0.2g，乳糖10g，蒸馏水1000mL，硫酸亚铁铵0.2g，蔗糖10g，酚红0.025g，氯化钠5g，牛肉膏5g，琼脂12g，葡萄糖1g，pH7.4。制法：将除琼脂和酚红以外的各种成分溶解于蒸馏水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。121高压灭菌15min后放置高层斜面备用。55尿素琼脂成分：蛋白胨1g，葡萄糖1g，0.4%酚红溶液3mL，蒸馏水1000mL，氯化钠5g，磷酸氢二钾2g，琼脂20g，20%尿素溶液100mL，pH7.20.1制法：将除

31、尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶。121高压灭菌15min，冷至5055，加入经除菌过滤的尿素溶液。尿素的最终浓度为2%。最终pH为7.20.1。分装于灭菌试管内，放成斜面备用。56ONPG培养基成分：邻硝基酚D-半乳糖昔(ONitropHenylDgalactopyranoside) (ONPG) 60mg，0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10mL，1%蛋白胨水(pH7.5) 30mL制法：将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm75mm试管，每管0.5mL，用橡皮塞塞紧。57氨基酸脱羧酶试验培养基（赖氨酸培养基）成分

32、：蛋白胨5g，酵母浸膏3g，葡萄糖1g，蒸馏水1000mL，1.6%滇甲酚紫乙醇溶液1mL，L氨基酸或DL氨基酸0.5或1g/100mL，pH6.8。制法：除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶100mL，分别加入赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸等各种氨基酸。L氨基酸按0.5%加入，DL氨基酸按1%加入。再行校正pH至6.8。对照培养基不加氨基酸。分装于灭菌的小试管内，每管0.5mL，上面滴加一层液体石蜡，115高压灭菌10min。58氰化钾(KCN)培养基成分：蛋白胨10g，氯化钠5g，磷酸二氢钾0.225g，磷酸氢二钠5.64g，蒸馏水1000mL，0.5%氰化钾溶液20mL，pH7.6。制法：将除

33、氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，121高压灭菌15min。放在冰箱内使其充分冷却。每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为110000)，分装于12mm100mm灭菌试管，每管约4mL，立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在4冰箱内，至少可保存两个月。同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。59丙二酸钠培养基成分：酵母浸膏1g，硫酸铵2g，磷酸氢二钾0.6g，磷酸二氢钾0.4g，氯化钠2g，丙二酸钠3g，0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL，蒸馏水1000mL，pH6.8。制法：先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正pH后再加入指示剂，分装试管，121高压灭菌15min。60氧

34、化酶试验试剂（1）1% 盐酸二甲基对苯二胺溶液：少量新鲜配制，干冰箱内避光保存。（2）1% 四甲基对苯二胺溶液：将四甲基对苯二胺1.0g溶于100.0mL蒸馏水即可。通常使用新鲜配制的试剂，如放置于冷藏库，可在配制后7天内使用。（3）1% -萘酚乙醇溶液。61亚硒酸盐煌绿增菌液 成分：蛋白胨5g，酵母膏5g，甘露醇5g，牛磺胆酸钠1g，20亚硒酸氢钠溶液20m1，0.25mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0) 100mL，2煌绿水溶液0.25mL，蒸馏水900m1。制法：将前三种成分溶于水中，调节pH值为7.0，加入牛磺胆酸钠，加热溶解调pH值（其中干鸡蛋白样品pH8.2土0.1；其它干蛋品pH

35、7.2土0.1，冰蛋品pH7.0土0.1）（具体数值如下）121灭菌15min，放冷备用，此为甲液；称取4g亚硒酸氢钠，溶于19mL蒸馏水中，即为20亚硒酸氢钠溶液20mL，12l灭菌15min，放冷备用，此为乙液；精确称取K2HPO4(无水)2.18g，KH2PO4(无水)1.71g，溶解于蒸馏水中，定容至100mL。12l灭菌15min，放冷备用，此为丙液；称取煌绿(灿烂绿)0.2g溶于10mL蒸馏水中，即为2煌绿水溶液，此为丁液。用前将乙液和丙液依次加入甲液中，复查混合液的pH值，加入煌绿溶液。无菌操作分装于无菌烧瓶或试管内，每瓶150m1。培养基应在15d内使用。62GN增菌液成分：胰

36、蛋白胨20g，葡萄糖1g，甘露醇2g，柠檬酸钠5g，去氧胆酸钠0.5g，磷酸氢二钾4g，磷酸二氢钾1.5g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.0。制法：按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶225mL，115高压灭菌15min。63苯丙氨酸培养基成分：酵母浸膏3g，DI苯丙氨酸(或L苯丙氨酸1g ) 2g，磷酸氢二钠1g，氯化钠5g，琼脂12g，蒸馏水1000mL，制法：加热溶解后分装试管，121高压灭菌15min，使成斜面。64西蒙氏柠檬酸盐培养基成分：氯化钠5g，硫酸镁(MgSO47H2O) 0.2g，磷酸二氢铵1g，磷酸氢二钾1g，柠檬酸钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000m

37、L，0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mL，pH6.8。制法：先将盐类溶解于水内，校正pH，再加琼脂加热溶化。然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121高压灭菌15min后放成斜面。65葡萄糖铵培养基成分：氯化钠5g，硫酸镁(MgSO47H2O) 0.2g，磷酸二氢铵1g，磷酸氢二钾1g，葡萄糖2g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mL，pH6.8。制法：先将盐类和糖溶解于水内，校正pH，再加琼脂加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121高压灭菌15min后放成斜面。66麦康凯琼脂成份：蛋白胨17g，月示 胨3g，猪(牛、羊)胆盐5g，NaCL 5g,，琼脂17

38、g，蒸馏水1000m1，乳糖10g，0.01结晶紫水溶液10m1，0.5中性红水溶液5m1。制法：将蛋白胨、月示 胨、胆盐和氯化钠溶于400mL蒸馏水内，校正pH值至7.2。将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解。合并两液，分装于烧瓶内，121灭菌15min备用。临用时加热溶化上述琼脂，趁热加入乳糖。冷至5055时加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。 注：结晶紫和中性红水溶液配好后须经高压灭菌。67肠道菌增菌肉汤（EE肉汤）成分：蛋白胨10g，葡萄糖5g，牛胆盐20g，磷酸氢二钠8g，磷酸二氢钾2g，煌绿0.015g，蒸馏水1000mL，pH7.2。制法：按上述成分配好，加热使溶解，校正pH

39、。分装每瓶30mL，115高压灭菌15min。注意必须使用纯净的牛胆盐和煌绿，减少对受损且数量极少的肠杆菌的生长抑制。68克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基成分：血消化汤(pH7.6) 500mL，琼脂6.5g，硫代硫酸钠0.1g，硫酸亚铁铵0.1g，乳糖5g，0.2%酚红溶液5mL。下层培养基成分：血消化汤(pH7.6) 500mL，琼脂2g，葡萄糖1g，0.2%酚红溶液5mL。制法：取血消化汤按上层和下层的琼脂用量，分别加入琼脂，加热溶解。分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内；将下层培养基分装于灭菌的12mm100mm试管内，每管约2mL。115高压灭菌10min。将上层培养基放在

40、56水浴箱内保温；将下层培养基直立放在室温内，使其凝固。等下层培养基凝固后，以无菌操作将上层培养基分装于下层培养基的上面，每管约1.5mL并放成斜面。69Elek氏培养基(毒素测定用)成分：胨20g，麦芽糖3g，乳糖0.7g，氯化钠5g，琼脂15g，40%氢氧化钠溶液1.5mL，蒸馏水1000mL，pH7.8。制法：用500mL蒸馏水溶解琼脂以外的成分，煮沸并用滤纸过滤。用1mo1/L氢氧化钠校正pH。用另外500mL蒸馏水加热溶解琼脂。将两液混合，分装试管10mL或20mL。121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂倾注平板。70EC增菌液（36）成分：胰蛋白胨20g，胆盐1.5g，乳糖5

41、g，NaCL5g，无水KH2PO4 1.5g，无水K2HPO4 4g，蒸馏水1000mL，pH7.0。制法：将各成分溶于水中，调pH值，依据实验需求分装三角瓶或试管。121灭菌15min备用。之后，如果通过灭菌细菌滤器添加1的20mg/L新生霉素，即为改良EC增菌液。71改良山梨醇麦康凯琼脂（TC-SMAC）成分：蛋白胨7g，眎胨3g，猪胆盐5g，山梨醇10g，NaCL 5g，琼脂18g，0.5%中性红水溶液5mL，0.01%结晶紫水溶液10mL，亚碲酸钾2.5mg，头孢肟0.05g，蒸馏水1000mL，pH7.2。制法：除山梨醇、指示剂和抑菌剂外，其余成分溶于水中，溶解后调pH值。115灭菌

42、20min。临用时溶化培养基，冷至50，加入山梨醇、灭菌的结晶紫和中性红；加入过滤除菌的1亚碲酸钾250L和50g/L头孢肟1mL，混匀，倾注倒平板。72LST肉汤成分：胰蛋白胨或胰酪胨（Tryticase）20g，NaCL 5.0g，乳糖5.0g，K2HPO42.75g，KH2PO4 2.75g，月桂基硫酸钠0.1g，蒸馏水1000mL。制法：将各成分溶解于蒸馏水中。分装到有倒立发酵管的20mm150mm试管中，每管10mL。121高压灭菌15min。最终pH6.80.2。73MUG-LSTLST肉汤中添加4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷（MUG），使终浓度为0.1g/L。74甘露醇卵黄多粘

43、菌素琼脂成分：蛋白胨10g，牛肉膏1g，甘露醇10g，氯化钠10g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，0.2%酚红溶液13mL，50%卵黄液50mL，多粘菌素B 100国际单位/mL，pH7.4。制法：将前面五种成分加入于蒸馏水中，加热溶解，校正pH，加入酚红溶液。分装烧瓶，每瓶100mL，121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至50，每瓶加入50%卵黄液5mL及多粘菌素B 10000国际单位，混匀后倾注平板。75酪蛋白琼脂成分：酪蛋白10g，牛肉膏3g，磷酸氢二钠2g，氯化钠5g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，0.4%溴麝香草酚蓝溶液12.5mL，pH7.4。制法：将除指示剂外的各

44、成分混合，加热溶解(但酪蛋白不溶解)，校正pH。加入指示剂，分装烧瓶，121高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至50，倾注平板。注：将菌株划线接种于平板上，如沿菌落周围有透明圈形成，即为能水解酪蛋白。76木糖明胶培养基成分：胰胨10g，酵母膏10g，木糖10g，磷酸氢二钠5g，明胶120g，蒸馏水1000mL，0.2%酚红溶液25mL，pH7.6。制法：将除酚红以外的各成分混合，加热溶解，校正pH。加入酚红溶液，分装试管，121高压灭菌15min，迅速冷却。77动力-硝酸盐培养基（A法）待添加的隐藏文字内容2成分：蛋白胨5g，牛肉膏3g，硝酸钾1g，琼脂3g，蒸馏水1000mL，pH7

45、.0。制法：加热溶解，校正pH。分装试管，每管10mL，121高压灭菌15min。78甲萘胺醋酸溶液、对氨基苯磺醋酸溶液（硝酸盐培养基）成分：硝酸盐0.2g，蛋白胨5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。制法：溶解，校正pH，分装试管，每管约5mL，121高压灭菌15min。硝酸盐还原试剂：（1）甲萘胺醋酸溶液：将甲萘胺0.5g溶解于5mol/L乙酸溶液100mL中。（2）对氨基苯磺醋酸溶液：将对氨基苯磺酸0.8g溶解于5mol/L乙酸溶液100mL中。79氯化钠结晶紫增菌液成分：蛋白胨20g，氯化钠40g，0.0l结晶紫溶液5mL，蒸馏水1000mL，pH9.0。制法：除结晶紫外其他按上述成分配好，加热溶解，约加3氢氧化钾溶液4.5mL，校正pH，加热煮沸，过滤，再加入结晶紫溶液，混合分装试管，121高压灭菌15min备用。803.5氯化钠三糖铁琼脂成分：蛋白胨20g，牛肉膏5g，乳糖10g，蔗糖10g，葡萄糖1g