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1、2002年协和医大细胞生物学博士试题1、细胞连接包括几种类型,及其各自的特点动物细胞的细胞连接按其功能分三大类:紧密连接、锚定连接和通讯连接。紧密连接的主要作用是封闭相邻细胞间的接缝,防止溶液中的分子沿细胞间隙渗入体内,从而保证了机体内环境的相对稳定;特点是通过跨膜蛋白相连。锚定连接通过细胞的骨架系统将细胞或细胞与基质相连成一个坚挺、有序的细胞群体,使细胞间、细胞与基质间具有抵抗机械张力的牢固粘合。参与锚定连接的骨架系统可分两种不同形式,与中间纤维相连的锚定连接主要包括桥粒和半桥粒;与肌动蛋白纤维相连的锚定连接主要包括粘合带与粘合斑。间隙连接是动物细胞间最普遍的细胞连接,是在相互接触的细胞之间
2、建立的有孔道的、由连接蛋白形成的亲水性跨膜通道,允许无机离子、第二信使及水溶性小分子量的代谢物质从中通过,从而沟通细胞达到代谢与功能的统一。2、核纤层的形态结构,及其同中间纤维的共同点 核纤层纤维的直径为10nm左右,纵横排列整齐,呈正交状编织成网络,分布于内层核膜与染色质之间。一般认为核纤层结构整体观呈一球状或笼状网络,切面观 呈片层结构。在分裂期细胞,核纤层解体,以单体形式存在于胞质中。核纤层是位于细胞核内层核膜下的纤维蛋白片层或纤维网络,核纤层由1至3种核纤层蛋白多肽组成。核纤层与中间纤维有许多共同点:(1)两者均形成10nm纤维;(2)两者均能抵抗高盐和非离子去垢剂的抽提;(3)某些抗
3、中间纤维蛋白的抗体能与核纤层发生交叉反应,说明中间纤维蛋白与核纤层蛋白分子存 在相同的抗原决定簇(Osborn Weber, 1987);(4)两者在结构上有密切联系,核纤层成为核骨架与中间纤维之间的桥梁3、泛素降解蛋白的途径 4、核糖体中蛋白组分同RNA的功能 rRNA具有肽酰转移酶的活性;为tRNA提供结合位点(A位点、P位点和E位点);为多种蛋白质合成因子提供结合位点;在蛋白质合成起始时参与同mRNA选择性地结合以及在肽链的延伸中与mRNA结合;核糖体大小亚单位的结合、校正阅读(proofreading)、无意义链或框架漂移的校正、以及抗菌素的作用等都与rRNA有关。 5、一群细胞死亡,
4、试举三个以上证据,证明它们是调亡而非坏死(不能超过400字,否则扣分2003年博士研究生入学考试试题细胞生物学试题(本人怀疑是生化题)一、名词解释(1-5每题2分,6-9每题2.5分,共20分)1、互补 现在使用的许多载体都带有一个E.coli DNA的短区段,其中含有-半乳糖苷酶的-肽基因(lacZ)的调控序列和头146个氨基酸的编码信息。这个编码区中插入了一个MCS,它并不破坏 读框,但是可使少数几个氨基酸插入到-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于编码-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞,虽然宿主和质粒编码 的片段各自都没有酶活性,但它们可融为一体,形成具有酶活性的蛋白,从而实现
5、互补。2、RT-PCR 3、亲和层析 亲和层析是一种吸附层析,抗原(或抗体)和相应的抗体(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。所以将抗原(或抗体)固相化后,就可以使存在液相中的相应抗体(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。4、偏爱密码子 5、同工酶 (isoenzyme)是指催化的化学反应相同,酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。这类酶存在于生物的同一种属或同一个体的不同组 织、甚至同一组织或细胞中。翻译并且解释名词6、chromatin chromosome 7、nuclear matrix 用核酸酶与
6、高盐溶液对细胞核进行处理,将DNA、组蛋白和RNA抽提后,残留纤维蛋白的网状结构。8、gene cluster 指基因家族中的各成员紧密成簇排列成大串的重复单位,定于染色体的的特殊区域。他 们属于同一个祖先的基因扩增产物。也有一些基因家族的成员在染色体上排列并不紧密,中间还含有一些无关序列。但总体是分布在染色体上相对集中的区域。9、transformation二、填空(每空1分,共15分)3、协和生物化学系主任吴宪(1893-1959)对我国的科学事业贡献巨大。4、科学家1928年格里非斯(PGriffith)首次证明DNA是遗传物质,该证明实验是肺炎双球菌感染小家鼠的实验。5、能够进行可逆磷
7、酸化的氨基酸是(3个)Ser、Thr_。6、维持DNA双螺旋的力是碱基堆积力和氢键。8、真核细胞核糖体大亚基的18S rRNA与原核细胞16S rRNA 同源。9、Plindromatic sequence 又叫-,定义是:-。三、判断并改错(每题2.5分,共5分)1、细菌的操纵基因总在启动子的后面。2、乳酸操纵子模型中,阻遏蛋白与RNA聚合酶结合阻止启动子启动。四、简答(每题5分,共20分)1、CAMP激活蛋白激酶的分子机制?2、核酸和蛋白质分子为什么具有方向性? 核酸链具有方向性,有两个末端分别是5末端与3末端。5 末端含磷酸基团,3末端含羟基。核酸链内的前一个核苷酸的3羟基和下一个核苷酸
8、的5磷酸形成3,5磷酸二酯键,故核酸中的核苷酸被称为核苷酸残基。3、紫外线造成皮肤细胞DNA何种损伤?如何修复?4、使肽键形成的酶叫什么名字?其化学本质是什么?存在于细胞的什么位置?五 论述(每题20分,共40分)1、何谓限制性内切酶的星活性?影响因素是什么? 所谓星活性又称Star活性。是指由于反应条件不同而产生的切断与识别位点相似但不完全相同的序列。 导致星号活性的因素: 1.较高的甘油浓度(5% v/v); 2.酶与底物DNA比例过高(不同的酶情况不同,通常为100 U/g); 3.低盐浓度(pH 8.0)5.存在有机溶剂(如DMSO、乙醇(9)、乙烯乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、
9、sulphalane等)6.用其他二价离子替代镁离子(如Mn2+,Cu2+,Co2+,Zn2+等) 抑制星号活性的方法: 1.尽量用较少的酶进行完全消化反应。这样可以避免过度消化以及过高的甘油浓度。2.尽量避免有机溶剂(如制备DNA时引入的乙醇)的污染。3.将离子浓度提高到100-150 mM(若酶活性不受离子强度影响)。4.将反应缓冲液的pH值降到7.0。5.二价离子用Mg2+。2、已知一个蛋白质的全长CDNA,设计一个实验步骤从CDNA开始提纯此蛋白。2004年协和考博细胞生物学试卷名解(不全)1.芽孢 细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。二、问答(不全) 1.
10、细胞核线粒体,高尔基体的分离 2.述NO的信号通路 3.怎样分离细胞骨架,MAR的生理功能 matrinassociation region(MAR) 核骨架结合序列5.肿瘤发生是一个多基因多步骤的过程,从癌基因和抑癌基因方面用简单的示意图说明肿瘤的发生机制一、名词解释(每题5分,共20分)1、米伦反应(Mliion reaction):蛋白质溶液中加入米伦试剂(亚硝酸汞、硝酸汞及硝酸的混合液),蛋白质首先沉淀,加热则变为红色沉淀,此反应为酪氨酸的酚核所特有的 反应,因此含有酪氨酸的蛋白质均呈米伦反应。2、核内基质 3、核定位信号4、星体 形体微管二、判断(每题1分,共10分)一种周期蛋白与一
11、种CDK相作用。三、填空(每空1分,共20分)1、线虫发育过程中有1090个细胞,其中凋亡了131个细胞,有14个基因与凋亡相关、ced-3和ced-4那两个基因于凋亡密切相关, ced-3基因抑制凋亡。2、电境包埋剂有那四个特点高倍放大不显示本身结构、聚合时不发生明显的收缩、有良好的机械性,鲤鱼切片、易被电子穿透。3、MAR核骨架结合序列有那四个特点富含AT、富含DNA解旋元件、富含重复序列、含有转录因子结合位点。4、G蛋白_亚基和_GDP_结合时,G蛋白无活性5、过氧化物酶体,有两种酶,一种以FAD为辅基,产生H2O2、另一种是过氧化氢酶酶,分解H2O2生成水和氧气。6、根据着丝粒的位置,
12、染色体可分那四种中着丝粒染色体、亚中着丝粒染色体、亚端着丝粒染色体、端着丝粒染色体。四、问答题(每题10分,共50分)1、简述ATP合成酶合成ATP的过程。2、叙述信号肽的结构及作用。3、亲核蛋白如何入核的?4、如何用抗体对特异抗原进行定位,定性?5、P53与凋亡的关系。2005年攻读博士研究生入学考试细胞生物学试题(回忆型)一、填空:(每题2分,共20分)1、龟的性别决定受温度的影响低温雄性高温雌性。2、核孔复合体有四部分:孔环颗粒、周边颗粒、中央颗粒和无定形物质组成3、细胞生长分化因子都包括 , , , , ,细胞生长分化因子又称 。4、目前推测R蛋白的功能有三个对rRNA折叠成有功能的三
13、维结构是十分重要的、在蛋白质合成过程中,核糖体的空间构象发生一系列的变化,某些r蛋白质队核糖体起“微调”作用、rRNA和r蛋白质共同行使核糖体上的结合位点和催化作用中心。5、酪氨酸信号通路的受体有两个 , 。9、溶酶体的标志酶酸性磷酸酶。其膜蛋白通过膜蛋白高度糖基化方式防止自身被水解。二、判断(每题1分,共10分)1、核小体蛋白与DNA的结合是有选择性的。2、吞噬泡的形成需要网格蛋白。3、线粒体的分裂方式 酵母和撅类主要是通过内缩。三、名词解释(每题2分,共20分)1、亚线粒体小泡 用超声波把线粒体破碎,线粒体内膜碎片可形成颗粒朝外的小膜泡。2、隐蔽mRNA 一般情况下,存在于未受精卵细胞中并
14、不用以翻译蛋白质,为早期蛋白质合成提供模板, 在卵细胞中与抑制蛋白质结合而失去活性的mRNA。3、死亡酶 即apopain催化poly(ADP-ribose)Polymerase(PARP),即聚(ADP-核糖)聚合酶的裂解执,行着与线虫中的ced3相同的功能,导致细胞的凋亡。4、易位子 位于内质网上的与新合成的多肽进入内质网有关的蛋白复合物,其本质是一种通道蛋白。5、核仁相随染色质 分为两部分,一部分位于核仁周围,成为核仁周染色质,即异染色质;一部分位于核仁内,为常染色质,即核仁组织区,是rDNA所在的位置。6、传代培养 将培养细胞从培养器中取出,把一部分移至新的培养器中再进行培养,这种培养
15、方式称为传代培养。7、第二信史四、简答(每题10分,共50分)1、什么是细胞工程 并举两例说明之。 以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传特性,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。 细胞融合技术和细胞杂合技术、单克隆技术2、高尔基体的结构和功能。 高尔基体是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间,呈弓形或半球形,凸出的一面对着内质网称为形成面 (forming face)或顺面(cis face)。凹进的一面对着质膜称为成熟面(mature face)或反面(trans face)。顺面和反面都
16、有一些或大或小的运输小泡,在具有极性的细胞中,高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中。高尔基体的主要功能将内质网合成的蛋白质进行加工、分类、与包装,然后分门别类地送到细胞特 定的部位或分泌到细胞外。 1、蛋白质的糖基化N-连接的糖链合成起始于内质网,完成与高尔基体。 2、参与细胞分泌活动负责对细胞合成的蛋白质进行加工,分类,并运出,其过程是SER上合成蛋白质进入ER腔以出芽形成囊泡进入CGN在 medial Gdgi中加工在TGN形成囊泡囊泡与质膜融合、排出。 3、进行膜的转化功能高尔基体的膜无论是厚度还是在化学组成上都处于内质网和质膜之间,因此高尔基体在进行着膜转化的功能,在内质网上合成的新膜
17、转移至高 尔基体后,经过修饰和加工,形成运输泡与质膜融合,使新形成的膜整合到质膜上。 4、将蛋白水解为活性物质如将蛋白质N端或C端切除,成为有活性的物质(胰岛素C端)或将含有多个相同氨基序列的前体水解为有活性的多肽。 5、参与形成溶酶体。 6、参与植物细胞壁的形成。 7、合成植物细胞壁中的纤维素和果胶质。3、线粒体蛋白的合成和转运方式。构成线粒体的蛋白主要是核基因编码的,少量是线粒体基因编码的,无论是核基因还是线粒体基因编码的蛋白质都要转运定位。线粒体有四个组成部分,其中有两层 膜,所以由细胞质核糖体合成的蛋白质转运到线粒体基质必须穿过两层膜障碍。大部分线粒体蛋白质在细胞质核糖体上合成时,其N
18、端都带有一肽段,称为导肽,内含定向运往线粒体的信息。导肽的长短与被引导的蛋白质定位在线粒体的不同部 位有一定的关系。定位于基质中的蛋白质一般具有较短的导肽。线粒体蛋白质分别定位于外膜、内膜、基质以及内外膜间隙。线粒体基质蛋白,除极少数外, 都是游离核糖体合成, 并通过转运肽转运进来的,转运过程十分复杂。线粒体膜间隙蛋白,如细胞色素c的定位需要两个导向序列,位于N端最前面的为基质导向序列(matrix-targeting sequence),其后还有第二个导向序列,即膜间隙导向序列(intermembrane-space-targeting sequence),功能是将蛋白质定位于内膜或膜间隙,
19、这类蛋白有两种转运定位方式。线粒体膜间隙蛋白的转运线粒体膜间隙蛋白,如细胞色素c的定位需要两个导向序列,位于N端最前面的为基质导向序列 (matrix-targeting sequence),其后还有第二个导向序列,即膜间隙导向序列(intermembrane-space-targeting sequence),功能是将蛋白质定位于内膜或膜间隙,这类蛋白有两种转运定位方式。医学教育网 搜集整理保守性寻靶(conservative targeting) 前体蛋白在N-端的基质导向序列引导下采用与线粒体基质蛋白同样的运输方式,将前体蛋白转运到线粒体基质,在基质中由转肽酶切除基质导向序列后, 膜间隙
20、导向序列就成了N端的导向序列, 它能够识别内膜的受体和转运通道蛋白,引导蛋白质穿过内膜,进入线粒体膜间隙,然后由线粒体膜间隙中的转肽酶将膜间隙导向序列切除(图7-15)。 非保守性寻靶(nonconservative targeting)与保守 性寻靶不同,蛋白质的非保守性寻靶首先在线粒体基质导向序列的引导下,通过线粒体的外膜和内膜,但是疏水的膜间隙导向序列作为停止转运序列(stop- transfer sequence) 锚定在内膜上,从而阻止了蛋白质的C-末端穿过内膜进入线粒体基质;然后通过蛋白质的扩散作用,锚定在内膜上的蛋白逐渐离开转运通道,最后在转肽酶的作用 下,将膜间隙导向序列切除,
21、蛋白质释放到膜间隙,结合血红素后,蛋白质折叠成正确的构型。4、举例说明CDK的功能。5、什么是基因组印记,并举例说明。 基因组印记是指同一等位基因根据其是母方还是父方的来源进行选择性差异表达的现象. 基因组印记可以是共价标记(DNA甲基化)上的,也可以是非共价标记(DNA-蛋白质和DNA-RNA互作,核基因组定位),印记方法包括在整个细胞周期中维持双亲表观记号的特化的核内酶的作用机制。 基因印记与动物克隆技术 基因印记 (imprinting) 对核移植后基因组重新编程的影响。基因印记现象在哺乳动物 的发育过程中普遍存在,它是指基因的表达与否取决于它们是在父源染色体上还是母源染色体上。有些印记
22、基因只从母源染色体上表达,而有些则只从父源染色体上 表达。基因印记与动物克隆技术的成功及不足有何关系值得深入研究。基因组印记病主要表现为过度生长、生长迟缓、智力障碍、行为异常。目前在肿瘤的研究中认 为印记缺失是引起肿瘤最常见的遗传学因素之一。2007年博士研究生入学考试细胞生物学专业试题一、填空(每空0.5分,共20分)1、使细胞膜破损分离细胞器的常用方法杆状玻璃匀浆器法、高速组织捣碎机法、超声波处理法、化学裂介法、反复冻融法。2、染色质DNA包括 蛋白编码序列、编码rRNA,tRNA,snRNA和组蛋白的串列重复序列、重复序列的DNA。3、微管蛋白附属结构的作用_ _ _ _。4、NO分子通
23、过与_结合,产生_。5、CDK激酶有两个亚基_和 _,通过使蛋白_发挥作用,受_负调节。6、细胞外基质包括参与8、生物大分子的装配方式大体可分为自我组装、协助组装 和直接组装 以及更为复杂的细胞结构及结构体系之间的装配。9、核骨架结合蛋白转录因子具有严格的DNA序列特异性,包括DNA复制;复制起始点是MAR,DNA聚合酶与核骨架结合而被激活、活性基因和RNA聚合酶结合于核骨架上,RNA合成在核骨架上进行、与病毒的复制有关、参与染色体的构建。10、细胞的决定与记忆有关,而细胞记忆可通过两种方式实现,一是正反馈途径:细胞接受信号刺激后,活化转录调节因子,该因子不仅诱导自身基因的表达,还诱导其他组织
24、特异性基因的表达;,二是染色体结构变化的信息传到子代细胞。11、癌基因编码的蛋白主要包括生长因子、生长因子受体、信号转导通路中分子、基因转录调节因子、细胞凋亡蛋白、DNA修复相关蛋白、细胞周期调控蛋白等几大类。二、名词解释(每题4分,共40分)1、核被膜 内外两层平行但不连续的单位膜组成,面向核质的一层是内核膜,面向胞质的是外核膜。2、不朗棘轮模型 指线粒体前体蛋白从粗面内质网转运到线粒体内膜是由于前体蛋白的摆动性(即布朗运动),可能会刚进入线粒体内膜即出膜,所以有mhsp(内膜热休克蛋 白)70与蛋白的N-导肽结合从而固定在内膜的表面,N-导肽在前体蛋白成熟后会由特定水解酶将水解掉。3、GT
25、P活化蛋白4、隐蔽mRNA5、微管相关蛋白 各种组织中提纯微管蛋白可以发现还存在一些其他蛋白成分(5%-20%),这些蛋白具有组织特异性,表现出从相同二聚体聚合形成的微管具有独特的性质,已从人类不同组织中发现了多种及微管蛋白,并追踪微管基因表现出部分基因家族,某些基因被认为是编码独特的微管蛋白。6、G2期检验点 主要检验S期DNA是否有损伤,细胞体积是否够大,是否可以顺利进入细胞分裂期。7、泛素化8、多潜能性 指细胞经分裂和分化后仍具有产生完整机体的潜能或特征9、肿瘤病毒三、问答及论述题(40分)1、简述受体酪氨酸激酶信号通路。2、核纤层蛋白的分子结构及其与中间纤维的关系。3、有丝分裂过程中染
26、色体的运动。4、细胞表面黏附分子有几种?其结构特点及功能?5、什么叫基因差次表达?有什么意义?协和医科大学2007考博 细胞生物和生化记忆版名次解释: LCAT; 卵磷脂胆固醇酰基转移酶 是参与体内脂质代谢的主要酶之一, 催化游离胆固醇转变成胆固醇酯, 参与HDL的成熟过程。主要催化卵磷脂S2-2位上的酰基链转移至胆固醇上, 分别生成溶血卵磷脂和胆固醇酯。LDL;低密度脂蛋白呼吸链;又称电子传递链,是由一系列电子载体构成的,从NADH或FADH2向氧传递电子的系统。氢以质子形式脱下,电子沿呼吸链转移到分子氧,形成粒子型氧,再与质子结合生成水。放出的能量则使ADP和磷酸生成ATP。电子传递和AT
27、P形成的偶联机 制称为氧化磷酸化作用r谷氨酰基循环: 是指氨基酸从肠粘膜细胞吸收,通过定位于膜上的r谷氨酰转肽酶催化使吸收的氨基酸与GSH反应,生成r谷氨酰基氨基酸而将氨基酸转入细胞内的过 程。由于该过程具有循环往复的性质.klenow片断 大肠杆菌DNA聚合酶大片段(klenow片段)是完整的DNA聚合酶的一个片段,只有在53聚合酶活性和35外切酶活性,失去了53外切酶活性。它可用于填补DNA单链末端成为双链。填空 亚氨基酸是Pro;含硫氨基酸有半胱氨酸、胱氨酸、甲硫氨酸;糖原合成酶; 问答 为什么肝硬化的病人不能用碱性利尿药,为什么不能用碱性液体灌肠。 胆固醇的合成,运输和去向 酵母发生变
28、异,从3p甘油醛转变了3p甘油酸是否对酵母有利,为什么。 补救合成的途径,及其意义 为什么文献里用对应于编码链的另一条链作为基因的序列,那条链又名什么 camp分子的作用机制是什么2008协和细胞生物学考博试题一.名词解释 弹性蛋白 主要存在于韧带和脉管壁。弹性纤维与胶原纤维共同存在, 赋予组织以弹性和抗张能力。弹性蛋白由二种类型短肽段交替排列构成。一种是疏水短肽赋予分子以弹性;另一种短肽为富丙氨酸及赖氨酸残基的螺旋,负责在相邻分子间形成交联。自噬性溶酶体 自噬性溶酶体是一种自体吞噬泡, 作用底物是内源性的,即细胞内的蜕变、破损的某些细胞器或局部细胞质。它们由单层膜包围,内部常含有尚未分解的内
29、质网、线粒体和高尔基复合体或脂类、糖原等。正常细胞中的自噬性溶酶体在消化、 分解、自然更替一些细胞内的结构上起着重要作用。蛋白质分选 主要是指膜结合核糖体上合成的蛋白质, 通过信号肽,在翻译的同时进入内质网, 然后经过各种加工和修饰,使不同去向的蛋白质带上不同的标记, 最后经过高尔基体反面网络进行分选,包装到不同类型的小泡,并运送到目的地, 包括内质网、高尔基体、溶酶体、细胞质膜、细胞外和核膜等。双信使系统 I3P 和DAG核酶 呼吸链核仁组织区 即rRNA序列区,它与细胞间期核仁形成有关,构成核仁的某一个或几个特定染色体片断。这一片段的DNA转录为rRNA。核仁是NOR中的基因活动而形成的可
30、见的球体结构。具有核仁组织区的染色体数目依不同细胞种类而异,人有5对染色体即 13、14、15、21、22号染色体上有核仁组织区。基因敲除 基因敲除是基因打靶技术的一种,类似于基因的同源重组。指外源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,从而代替受体细胞基因组中的相 同/相似的基因序列,整合入受体细胞的基因组中,然后从整体观察实验动物,推测相应基因的功能。去分化 细胞改变了原来的分化程序,失去了原来应有的结构和功能,成为一个具有未分化细胞特征的普通细胞,细胞还有继续分化的能力。Caspase家族 保守的Asp特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)家族是哺乳动物细胞中程序性死亡
31、(PCD)的介导者和执行者. 原凋亡信号首先活化不同的Caspase启始因子,再由启始因子激活级联下游的Caspase效应分子,最终由效应分子特异地水解细胞中的一系列底物而导致细胞解体.Caspase家族是整个PCD过程的关键元件,它们通过与众多蛋白质(激活因子或抑制因子)的相互作用来调控细胞的生死存亡.三.问答:原位杂交技术与免疫细胞化学技术的原理,用途,异同受体硌氨酸激酶介导的信号传导途径什么是染色体支架,与核骨架的关系,有何重要性? 在染色体包装时, 为染色质提供锚定位点的非组蛋白。为了证明染色体骨架的存在, 分离有丝分裂前的染色体, 接着用试剂溶解组蛋白和大多数主要的非组蛋白, 然后在
32、电子显微镜下观察可见一完整的染色体结构框架(framework)或支架(scaffold)。在间期, 染色体支架解体, 而构成支架的蛋白则作为核基质的组成部分起作用。分析表明染色体骨架与核骨架中存在相同的蛋白组分,如DNA拓朴酶II。核骨架的某些组分在细胞分裂期可能转变为染色体骨架。细胞周期的调控机理细胞分化过程中的基因表达的调节细胞生物学补充:1免疫荧光技术和免疫电镜技术是细胞体内特异性蛋白质分子定位研究常用的技术方法。2. 与酶连接的细胞表面受体至少包括5类:受体酪氨酸激酶、受体丝氨酸/苏氨酸激酶、受体酪氨酸磷酸酯酶、受体尿苷酸环化酶、酪氨酸蛋白激酶联系的受体。3.V型质子泵的功能是利用A
33、TP水解供能从细胞质基质中逆H+电化学梯度泵出H+进入细胞器,以维持细胞质基质pH中性和细胞器内的PH酸性。4.高尔基体至少由互相联系的4个部分组成,它们是_ .5.广义的细胞骨架包括细胞核骨架、细胞质骨架、细胞膜骨架和细胞外基质四部分。6染色体中组蛋白和非组蛋白质的功能是_.7.BCR能识别_蛋白质抗原分子,它识别的表位是_.8.神经胶质细胞与神经原共同起源于胚盘外胚层神经上皮组织,而施旺细胞则来自_.9.组织胺主要存在于_.10Dna具有信息载体功能而无酶活性。11。光学显微镜的光学放大系统主要由目镜和物镜组成。12.分化基因分类管家基因和奢侈基因,后者又称组织特异性表达的基因。13改变细
34、胞所处的位置,仅仅可导致细胞分化方向的改变,这种现象称为 .产生该现象的主要原因是 之故。14储存在卵细胞中没有翻译活性的mRNA可称为隐蔽RNA。 .论述题:1 叙述在内质网上合成的磷脂转运至其它膜上的两种主要方式。2 在氧化磷酸化机制中最为流行的一种假说,化学渗透学说有哪两种特点。3 试述细胞信号传递的基本特征。4 简述染色体结构与基因转录的关系。5 以原核生物为例,简述肽链合成的基本环节与主要步骤。6 什么是胚胎干细胞,通常如何获得ESC,怎么证明它的全能性?2003年攻读博士学位研究生入学考试生物化学与分子生物学试题一、名词解释(每题2分,共10分)1、糖原脱支酶2、酮体 在肝脏中,脂
35、肪酸氧化分解的中间产物乙酰乙酸、-羟基丁酸及丙酮,三者统称为酮体3、氧化磷酸化 在呼吸链电子传递过程中偶联ATP的生成。4、RNA INTERFERENCE 指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(dsRNA)介导的、由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。5、ATTENATOR 在trp mRNA 5,端trp正基因的起始密码前有一个长162 bp的DNA序列称为前导区,其中第123150位核苷酸如果缺失,trp基因的表达水平可提高6倍。如在培养基中完全不含色氨酸,则转录不会终止,这个区域被称为弱化子。二、说明下列酶的作用特点与性质(每题2.5分
36、,共10分)1、DNA连接酶 2、DNA内切酶 3、光复合酶 常见的一种修复作用就是光复活作用。生物体细胞受损伤后能产生光复合酶,该酶能与受伤的DNA结合,行使核酸内切酶作用,切除突变部分,以另一联为母联重新合成DNA。该酶在黑暗条件下无活性,光照条件下能激活光复合酶。4、大肠杆菌DNA聚合酶 主要有3种作用:53的聚合作用。但不是复制染色体而是修补DNA,填补DNA上的空隙或是切除RNA引物后留下的空隙。35的外切酶活性。消除在聚合作用中掺入的错误核苷酸。53外切酶活性。切除受损伤的DNA。它在切口平移(nick translation)中应用。三、简答题(每题10分,共50分)1、PH=8
37、.0时,核酸与蛋白质电泳泳动有何不同特点?2、1953年4月25,发生了什么让生物学界震动的事情?请说明其意义?3、下面两句话对么?请分别说明理由:1)Trp操纵子只有衰减作用一种负调节方式。2)Cro蛋白与阻遏蛋白结合与不同位点调节溶菌性循环与溶源循环。4、2002年SCIENCE评出年度十大,说icroRNA是重要发现,说明icroRNA的意义。 MicroRNA也可以写做miRNA ,是一种2125nt长的单链小分子RNA。它广泛存在于真核生物中,是一组不编码蛋白质的短序列RNA,其本身不具有开放阅读框(ORF)。成熟的miRNA,5端有一个磷酸基团,3端为羟基。编码miRNAs的基因最
38、初产生一个长的pri-RNA分子,这种初期分子还必须被剪切成约70-90个碱基大小、具发夹结构单链RNA前体(pre-miRNA)并经过Dicer酶加工后生成。成熟的miRNA 5端的磷酸基团和3端羟基则是它与相同长度的功能RNA降解片段的区分标志。研究表明MiRNAs在物种间具有高度的保守性、时序性和组织特异性在特定的时间、组织才会表达。MiRNA研究与疾病及研究进展RNA干扰 新的研究表明miRNA在从癌症、心脏病到艾滋病的各种疾病中起到一定的作用,而且有间接的证据表明如果将两个miRNA从人类基因组中删除就会发生白血病。据推测,MiRNA能够调节人类的三分之一的基因。有研究表明miRNA
39、能够调节Ras癌基因、干细胞分化、脊椎动物肢体的形成等。5、为什么DNA合成必须有引物而RNA合成不需引物可以直接将两个核苷酸连接?四、问答题(每题15分,共30分)1、近年来人们对真核基因调控理论有了深入的认识,现在大家普遍接受“unified theory”的理论,请你谈谈你对该理论的理解及你的观点。2、用微球菌核酸酶酶解染色质,然后进行电泳,发现200bp、400bp、600bp、800bp的条带,试问从该现象可以得出什么结论?图1所示的条带不是非常狭窄,试解释其原因?2004年攻读博士学位研究生入学考试 生物化学与分子生物学试题编号:221一、名词解释(每题2分,共30分)1、复合脂质
40、 含有其他化学基团的脂肪酸酯,体内主要含磷脂和糖脂两种复合脂质2、糖原脱支酶 为水解糖原中-1,6-葡糖苷键的酶类的总称。3、酮体(ketone body):在肝脏中,脂肪酸氧化分解的中间产物乙酰乙酸、-羟基丁酸及丙酮,三者统称为酮体4、氧化磷酸化(oxidative phosphorylation)是指在生物氧化中伴随着ATP生成的作用。有代谢物连接的磷酸化和呼吸链连接的磷酸化两种类型。即ATP生成方式有两种。5、结构域Structural Domain蛋白质亚基结构中明显分开的紧密球状结构区域,又称为辖区。6、同工酶isozyme,isoenzyme)广义是指生物体内催化相同反应而分子结构
41、不同的酶。按照国际生化联合会(IUB)所属生化命名委员会(CBN)的建议,则只把其中因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶。7、染色体核骨架 为DNA的复制提供支架,DNA是以复制环的形式锚定在核骨架上的,是基因转录加工的场所,RNA的转录同样需要DNA锚定在核骨架上才能进行,核骨架上有RNA聚合酶的结合位点,使之固定于核骨架 上,RNA的合成是在核骨架上进行的。新合成的RNA也结合在核骨架上,并在这里进行加工和修饰。8、染色质重塑 DNA 复制、转录、修复、重组在染色质水平发生, 这些过程中, 染色质重塑可导致核小体位置和结构的变化, 引起染色质变化。9、核基质(nuclear m
42、atrix) 亦称核骨架。有广义和狭义两种概念。广义概念认为核基质包括核基质-核纤层-核孔复合体结构体系;狭义概念是指真核细胞核内除去核膜、核纤层、染色质、核仁以外存在的一个由纤维蛋白构成的网架体系。目前较多使用狭义概念。10、转导transduction)由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。11、密码子的偏嗜性 一个氨基酸具有两个以上的密码子就成为密码简并12、基因簇 指基因家族中 的各成员紧密成簇排列成大串的重复单位,定于染色体的的特殊区域。基因簇少则可以是由重复产生的
43、两个相邻相关基因所组成,多则可以是几百个相同基因串联排列而成。他们属于同一个祖先的基因扩增产 物。13、逆转座子 在基因组内存在着通过DNA转录为RNA后,再经逆转录成为cDNA并插入到基因组的新位点上的因子。逆转座子的整体结构与整合的逆转录病毒极为相似,其主要特征之一是在两端具有长的同向末端重复序列(Long terminal repeat, LTR),而两个末端的每一个末端又各具备一个倒转重复序列。14、后基因改变(Epigenitic change) 基因外改变 环境因子引起细胞和机体表型的改变可以通过基因型的改变而致,也可以不通过基因型改变而致,后者即基因外改变,它是研究致病机制的一个
44、重要方面.15、双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小),经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。二、填空题(每题1分,共5分)7、脂肪酸氧化限速酶-。乙酰CoA合成酶和肉毒碱脂酰转移酶8、酶促反应速率的影响因素-温度,PH,酶浓度,激活剂和抑制剂9. 维持DNA双螺旋的力是_氢键和碱基堆积力10. 真核细胞核糖体大亚基_80s_rRNA与原核生物_同源。三、简答题(每题8分,共40分)5、简述胆汁酸的生理功能。胆汁酸为两性分子,主要起表面
45、活性剂作用。 在胆汁中,胆汁酸可以避免胆固醇结晶析出。当胆汁中胆汁酸、卵磷脂、胆固醇比例失调时,可形成胆固醇结石。 在肠道中,胆汁酸有助于脂类物质乳化,增强其消化吸收。由于结合胆汁酸的酸性更强,在肠道的pH环境中能以离子的形式存在,因此其乳化的作用更强6、TATA box 及其功能。是一段DNA序列,位于真核生物和古细菌的转录启动子上,大约位在转录起始点上游第25个碱基对。7、tRNA中常出现次黄嘌呤,为什么?(另一种说法:tRNA反密码子第一个碱基往往是I,为什么?)tRNA反密码子的第一个碱基(由5-端向3-端计数)常被次黄嘌呤即I所占据,很少有U,几乎没有A。tRNA反密码子中的第一个碱
46、基与mRNA密码子中的第三个碱基(由5-端向3-端计数)配对时并不严格遵循碱基互补配对原则,除A-U,G-C可以配对外,反密码子中的I与密码子3-端的U、A、C都能配对,8、只有偶数碳原子的脂肪酸氧化时才能产生乙酰辅酶A吗,为什么?脂酸经过-氧化,每次切下两个c而生成乙酰辅酶A。偶数C的脂酸(n个C)最后生成 n/2个 乙酰辅酶A;奇数C的脂酸(n个C)最后生成 (n-3)/2 个乙酰辅酶A和一分子丙酰辅酶A所以无论偶数还是奇数C脂酸在氧化降解的时候都产生乙酰辅酶A,但奇数的多产生丙酰辅酶A9、写出一段反式串联结构的DNA序列不少于10bp,并画出二级结构草图?10、大肠杆菌冈崎片断一般有多少bp,如何连接?冈崎片段的大小,在原核生物中约为10002000个核苷酸,而在真核生物中约为100个核苷酸。由DN