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1、协和医院环境卫生学监测方法及要求一、采样和检查原则1、采样后应尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过4h;若样品保存于04时，送检时间不得超过24 h。2、不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查，当流行病学调查怀疑医院感染事件与灭菌物品有关时，进行相应物品的无菌检查。常规监督检查可不进行致病性微生物检测，涉及疑似医院感染暴发调查或工作中怀疑微生物污染时，应进行目标微生物的检测。3、 可使用经验证的现场快速检测仪器进行环境、物体表面等微生物污染情况和医疗器材清洁度的监督筛查；也可用于医院清洗效果检查和清洗程序的评价和验证。二、 空气微生物污染检查方法1、 采样时间类环境在洁净系统自净后与从
2、事医疗活动前采样；、类环境在消毒或规定的通风换气后从事医疗活动前采样。2、 检测方法 类环境可选择平板暴露法和空气采样器法，参照GB50333医院洁净手术部建筑技术规范要求进行检测。空气采样器法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。检测时将采样器置于室内中央0.8m1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。房间大于10m2者，每增加10 m2增设一个采样点。 、类环境采用平板暴露法。室内面积30m2，设内、中、外对角线3点，内、外点应距墙壁1m 处；室内面积30 m2，设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1m处。将普通营养琼脂平皿（90mm）放置各
3、采样点，采样高度为距地面0.8m1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（类环境暴露15min、类环境暴露5min）后盖上平皿盖及时送检。 将送检平皿置361恒温箱培训48h，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。三、物体表面微生物污染检查方法1、采样时间潜在污染区污染区消毒后采样.清洁区根据现场情况确定。2、 采样面积被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100 cm2，取100 cm2。3、采样方法用5 cm5 cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样14
4、个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10mL采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样。若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。四、医务人员手卫生检查方法1、 采样时间采取手卫生后，在接触病人或从事医疗活动前采样。2、采样方法将浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或生理盐水采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30 cm2），并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10mL采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米（cm2）计算。若采样时手上有消毒剂残留，采样液应含相应中和剂。五、医疗器材检查方法1、
5、采样时间在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样。2、 灭菌医疗器材的检查方法 可用破坏性方法取样的，如一次性输液（血）器、注射器和注射针等按照中华人民共和国药典中“无菌检查法”进行。对不能用破坏性方法取样的医疗器材，应在环境洁净度1000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹，采样取全部表面或不少于100cm2，然后将除去手接触部分的棉拭子进行无菌检查。牙科手机：应在环境洁净度1000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中，将每支手机分别置于含20 mL25 mL采样液的无菌大试管（内径25mm）中，液面高度应大
6、于4.0 cm,于漩涡混合器上洗涤振荡30s以上，取洗脱液进行无菌检查。3、 消毒医疗器材的检查方法 可整件放入无菌试管的，用洗脱液浸没后振荡30s以上，取洗脱液1.0mL接种平皿，将冷至4045的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL20mL，361恒温箱培养48h，计数菌落数（CFU/件），必要时分离致病性微生物。可用破坏性方法取样的，在100级超净工作台称取1g10g样品，放入装有10 mL采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液1.0mL接种平皿，计数菌落数（CFU/g），必要时分离致病性微生物。对不能用破坏性方法取样的医疗器材，在100级超净工作台，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面
7、涂抹采样，被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100 cm2，取100 cm2，然后将除去手接触部分的棉拭子进行洗脱，取洗脱液1.0mL接种平皿，将冷至4045的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL20mL，361恒温箱培养48h，计数菌落数（CFU/ cm2），必要时分离致病性微生物。 消毒后内镜：取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50 mL含相应中和剂的洗脱液，从活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集（可使用蠕动泵）送检。将洗脱液充分混匀，取洗脱液1.0mL接种平皿，将冷至4045的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL20mL，361恒温箱培养48h，计数菌落数（CFU/件）。将剩余洗脱液
8、在无菌条件下采用滤膜（0.45m）过滤浓缩，将滤膜接种于凝固的营养琼脂平板上（注意不要产生气泡），置61恒温箱培养48h，计数菌落数。六、 消毒剂检查方法 1、 消毒剂采样采样分库存消毒剂和使用中消毒液。2、 消毒剂有效成分含量检查方法库存消毒剂的有效成分含量应依照消毒技术规范或产品企业标准进行检测；使用中消毒液的有效浓度测定可用前述方法，也可使用经国家卫生行政部门批准的消毒剂浓度试纸（卡）进行监测。3、 使用中消毒液染菌量检查方法用无菌吸管按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，加入9mL中和剂混匀。A.7 治疗用水检查方法血液透析相关治疗用水按YY 0572进行检测。其他治疗用水按照相关标
9、准执行。七、医院消毒卫生要求1、各类环境空气、物体表面菌落总数应符合表1的要求。类环境为采用空气洁净技术的诊疗场所，分洁净手术部和其他洁净场所。类环境为非洁净手术部（室）；产房；导管室；血液病病区、烧伤病区等保护性隔离病区；重症监护病区；新生儿室等。类环境为母婴同室；消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区；血液透析中心（室）；其他普通住院病区等。类环境为普通门（急）诊及其检查、治疗室；感染性疾病科门诊和病区。表1 各类环境空气、物体表面菌落总数卫生标准环境类别空气平均菌落数a物体表面平均菌落数CFU/cm2CFU/皿CFU/m3类环境洁净手术部符合GB 50333要求1505.0其他洁净
10、场所4.0（30min）b类环境4.0（15min）5.0类环境4.0（5min）10.0类环境4.0（5min）10.0a CFU/皿为平板暴露法，CFU/m3为空气采样器法。b平板暴露法检测时的平板暴露时间。怀疑医院感染暴发或疑似暴发与医院环境有关时，应进行目标微生物检测。2、医务人员手 卫生手消毒后医务人员手表面的菌落总数应10CFU/cm2。外科手消毒后医务人员手表面的菌落总数应5CFU/cm2。3、医疗器材高度危险性医疗器材应无菌。 中度危险性医疗器材的菌落总数应20 CFU/件（CFU/g或CFU/100cm2），不得检出致病性微生物。 低度危险性医疗器材的菌落总数应200 CFU
11、/件（CFU/g或CFU/100cm2），不得检出致病性微生物。4、治疗用水血液透析相关治疗用水应符合YY 0572要求；其他治疗用水应符合相应卫生标准。5、防护用品医用防护口罩、外科口罩和一次性防护服等防护用品应符合GB 19083、YY 0469和GB 19082要求。6、消毒剂 灭菌剂、皮肤粘膜消毒剂应使用符合中华人民共和国药典的纯化水或无菌水配制，其他消毒剂的配制用水应符合GB5749要求。 使用中消毒液的有效浓度应符合使用要求；连续使用的消毒液每天使用前应进行有效浓度的监测。灭菌用消毒液的菌落总数应为0 CFU/mL;皮肤粘膜消毒液的菌落总数应符合相应标准要求；其他使用中消毒液的菌落总数应100 CFU/mL，不得检出致病性微生物。7、消毒器械 使用中消毒器械的杀菌因子强度应符合使用要求。紫外线灯应符合GB 19258要求，使用中紫外线灯（30W）的辐射照度值应70w/cm2。 工作环境中消毒器械产生的有害物浓度（强度）应符合相关规定。产生臭氧的消毒器械的工作环境的臭氧浓度应0.16mg/m3。环氧乙烷灭菌器工作环境的环氧乙烷浓度应2mg/m3。8、污水处理污水排放应符合GB18466要求。9、疫点（区）消毒消毒效果应符合GB 19193要求。
