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1、1,Literatures Review,报告人：xx,Calcium Phosphate Hybrid Nanoparticles:Self-Assembly Formation,Characterization,and Application as an Anti-cancer Drug Nanocarrier(磷酸钙杂化纳米粒子的自组装形成，表征，以及作为抗癌药物纳米载体的应用),2,Literature source,3,Contents,Introduction,1,2,Experimental section,1,Conclusions,2,3,4,Results and disc
2、ussion,4,1.Introduction,纳米结构 磷酸钙粒子（CaPs）在生物医药领域的应用,基因和药物传递生物成像抗癌治疗,优点,药物负载 能力强生物降解性pH控制药 物释放生物相容性适合负载 功能性分子,5,CaPs的传统合成方法,水解沉淀,水热 法,微波超声辐射,表面活性剂辅助,缺点,尺寸形貌不均一分散性差步骤繁琐有毒性的添加剂,6,本文献的方法,聚二甲基二烯丙基氯化铵（PDADMAC）,+,PO43-,聚丙烯酸钠（PAS）,+,Ca2+,磷酸钙纳米结构粒子（CaP-HNPs）,静电作用形成复合物,双模板,自组装,指基本结构单元（分子，纳米材料，微米或更大尺寸物质）同时自发发生关
3、联，并集合在一起形成稳定的有序整体的一种技术,7,反应示意图,细胞吞噬,pH控制药物释放,8,Experimental section,2,9,2.Experimental section,以带有相反电荷的聚电解质PDADMAC和PAS作为双模板。,2.1 合成CaP-HNPs,CaCl2（0.110g）+去离子水（10ml）+PAS溶液（1ml，重量比1%）,A溶液,磁力搅拌,去离子水洗2次,Na2HPO42H2O（0.215g）+去离子水（50ml）+PDADMAC溶液（1ml，重量比20%）,混合,B溶液,A逐滴加入到B中,磁力搅拌 5min,离心,CaP-HNPs,60烘干,无水乙醇洗
4、2次,10,2.2合成CaP-PAS和CaP-PDADMAC（对照实验）,合成方法同2.1，其中反应试剂分别去掉PDADMAC和PAS,2.3体外抗癌药物（Dtxl）负载与pH控制药物释放,CaP-HNPs（180mg）粉末+Dtxl的乙醇溶液（18ml，40mg/ml）,悬浮液,140rpm，37，振荡24h,离心,烘干,热重分析,CaP-HNPs-Dtxl（5mg）粉末,+磷酸缓冲溶液（8ml，pH=4.5）,37，140rpm,+磷酸缓冲溶液（8ml，pH=7.4）,37，140rpm,每隔一定时间取该溶液400uL进行紫外可见分析，每次取完加入等体积新鲜磷酸缓冲液，平行试验三次,CaP
5、-HNPs-Dtxl,11,2.4体外细胞存活率试验,置于96孔微量分析板培养24h,人体胃癌细胞+10%胎牛血清+1%青霉素链霉素,37,+CaP-HNPs（浓度分别为0.1ug/ml，1ug/ml，10ug/ml，100ug/ml）,+CaP-HNPs-Dtxl（浓度分别为0.1ug/ml，1ug/ml，10ug/ml，100ug/ml）,+Dtxl（浓度分别为0.1ug/ml，1ug/ml，10ug/ml，100ug/ml）,培养24h,MTT测试细胞存活率,12,2,3,Results and discussion,13,3.Results and discussion,3.1 XRD
6、测试,以PAS作为单模板,以PDADMAC作为单模板,由XRD测试可以看出以PDADMAC和PAS作为双模板合成出具有晶体结构的HA,而以PAS和PDADMAC作为单模板合成出的HA具有不定型结构,（HA),以PDADMAC和PAS作为双模板,14,3.Results and discussion,3.2 SEM和TEM测试,1.以PDADMAC和PAS作为双模板,SEM测试,TEM测试,由SEM测出粒子平均直径为7213.7nm,尺寸分布窄固态球形形貌分散性好,15,3.Results and discussion,2.分别以PDADMAC和PAS作为单模板(对照试验),SEM,TEM,只以
7、PDADMAC做单模板,只以PAS做单模板,得到团聚的无规则的片状纳米结构,得到团聚共生的纳米球结构,16,3.Results and discussion,3.3 动态光散射（DLS）测定粒子尺寸大小分布,a.以PDADMAC和PAS作为双模板b.以PAS作为单模板c.以PDADMAC作为单模板,平均尺寸104.0 nm,平均尺寸261.5 nm,平均尺寸336.6 nm,17,3.Results and discussion,3.4 红外光谱测试,以PDADMAC做单模板,以PAS做单模板,以PDADMAC和PAS作为双模板,吸附水的伸缩振动,CH伸缩振动,C=O伸缩振动,COO-对称伸缩
8、振动,CH弯曲振动,COO-不对称伸缩振动,CH2伸缩振动,+N-CH3对称弯曲振动,COO-不对称弯曲振动,CH2伸缩振动,+N-CH3弯曲振动,PO42-伸缩振动,18,3.Results and discussion,3.5 热重分析,以PDADMAC和PAS作为双模板,以PAS作为单模板,以PDADMAC作为单模板,在较低温度（200以下）的失重是由于吸附水和结晶水的脱除而在较高温度(200-500)的失重是由于PDADMAC和PAS分解导致的(c)中有机物含量约为18.1%；(b)中有机物含量约为10.9%；(a)中有机物含量约为8.9%；,19,3.Results and disc
9、ussion,3.6 Zeta电位测试,35.9,-20.0,21.3,CaP-HNPs（双模板法）的Zeta电位最大，说明其胶体稳定性最高，有利于作为药物纳米载体,20,3.Results and discussion,3.7 粒子尺寸大小与时间的关系（由DLS测得）,粒子尺寸开始为104nm，24h后增加到175nm，之后粒子尺寸稳定变化不大，说明了双模板法合成的CaP-HNPs胶体稳定性高，适合在药物传递上应用,104nm,175nm,21,3.Results and discussion,3.8 CaP-HNPs药物释放能力测试（pH改变）,在不同pH下，随着时间的推移，药物释放增多，
10、最终趋于稳定，相比之下pH低比pH高时的药物释放能力更好，这是由于pH低时CaP-HNPs溶解，导致负载的药物得以释放而造成的,22,3.Results and discussion,3.9 对细胞毒性的测试（MTT法）,不同浓度下，CaP-HNPs对人类胃癌细胞均未表现出毒性，说明CaP-HNPs的生物相容性高，浓度相同的CaP-HNPs-Dtxl 和Dtxl，CaP-HNPs-Dtxl中的细胞存活率更低，说明CaP-HNPs-Dtxl药物传递系统的生物相容性好，药物释放效率高,23,3.Results and discussion,3.10 光学显微镜对细胞形貌的观察,0.1ug/ml,1
11、ug/ml,10ug/ml,CaP-HNPs,CaP-HNPs-Dtxl,纺锤形，说明细胞生理状态好，CaP-HNPs生物相容性好,球形，说明细胞生理状态差，CaP-HNPs-Dtxl释放了Dtxl影响了细胞存活，意味着该系统有良好的抗癌效果,24,Conclusions,4,25,4.conclusions,该实验利用双模板法（PAS和PDADMAC），自组装合成CaP-HNPs，该方法能够控制CaP粒子生长，减小粒子尺寸,优点,球形 窄分布尺寸,分散性好,水中胶体稳定性好,生物相容性好,药物负载能力好,pH控制药物释放,总之，CaP-HNPs在作为抗癌药物载体上有非常大的应用前景,26,Thank you for your attention!,
