植物脱毒技术.ppt

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1、植物脱毒,一、脱毒苗培育的意义二、脱毒的方法三、脱毒苗生根培养与驯化移栽四、脱毒苗鉴定五、脱毒苗保存与繁殖,一、脱毒苗培育的意义,(一)植物病毒的危害(二)病毒传播的方式(三)脱毒苗培育的意义,二、脱毒的方法,(一)茎尖培养脱毒(二)热处理脱毒(三)茎尖脱毒与热处理相接合(四)微体嫁接脱毒法(五)愈伤组织培养脱毒(六)珠心胚培养脱毒法(七)花药培养脱毒(八)抗病毒药剂法,(一)茎尖培养脱毒,1微茎尖培养脱毒机理2微茎尖培养脱毒的过程,马铃薯脱毒,马铃薯脱毒技术,2023/2/14,任务一 外植体选取及消毒,选择:选取生长旺盛、健壮、无病或患病相对较轻的的植株。切取4-6cm的顶芽或侧芽,除去外

2、部可见的小叶。消毒:先用自来水冲洗30mink,再用75%的酒精漂洗几秒到十几秒,然后用0.1%的氯化汞或20倍的次氯酸钠液消毒10-15min。消毒后的材料用无菌水冲洗3次。,任务二 准备培养基,初代培养:MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LGA3+0.1mg/LNAA+3%蔗糖+5g/L琼脂,PH5.8继代增殖:MS+0.1mg/LNAA+3%蔗糖+5g/L琼脂,PH5.8,2023/2/14,将消毒后的材料在解剖镜下进行剥离,如果是用于快速繁殖的茎尖材料可带2-4个叶原基或更多,如果是用于脱毒的切取0.1-0.5mm,带1-2个叶原基,并迅速接到培养基上。,解剖镜下剥取茎尖,任务

3、三 茎尖剥离和接种,任务四 继代培养,(二)热处理脱毒,1热处理脱毒的原理2热处理脱毒的方法温烫处理脱毒法热空气处理脱毒法3影响热处理脱毒的因素4热处理的优缺点,(三)茎尖脱毒与热处理相接合,(四)微体嫁接脱毒法,(五)愈伤组织培养脱毒,(六)珠心胚培养脱毒法(七)花药培养脱毒(八)抗病毒药剂法 三氮唑核苷、5-二氢尿嘧啶、双乙酰-二氢-5-氮尿嘧啶、,三、脱毒苗生根培养与驯化移栽,四、脱毒苗鉴定,(一)直接观察法(二)指示植物鉴定法 1汁液涂抹鉴定 2小叶嫁接法,3双重芽接法4双重切接法,(三)抗血清鉴定法(四)分子生物学鉴定法 1双链RNA法(dsRNA)2核酸杂交技术 人工合成能与病毒碱基互补的(cDNA)3聚酶链反应技术(PCR)(五)电镜检测法,五、脱毒苗的保存与繁殖,(一)脱毒苗的保存1隔离保存2离体保存(1)低温保存(2)超低温保存 快速冷冻法 慢速冷冻法 分步冷冻法 干燥冷冻法(二)脱毒苗繁殖,

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