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1、血液体液学检验项目的临床应用简介,郑卫东广东省人民医院病理医学部2008-7-20,近日的一次调查显示:每吃一次快餐会使你的生命缩短十分钟!,那么,我的检测结果说明了什么?,你每抽一支烟要砍掉你五分钟的生命,是吗!那么我现在的检测结果怎样?,而且,你每喝一次饮料又要从你的寿命中减去你17分钟!,好,好我的检测结果究竟怎样?,您的检测结果讲,您在2岁时,已经去世了。,为高质量的患者医疗提供有质量的检测结果,实验室检测的最终目标,今天讨论的话题,血液体液学检验包含哪些检验项目?这些检验项目的临床意义何在?如何合理选择检验项目?典型病例分析。,血液体液检验学是临床医学检验的一个分支学科。血液体液学检
2、验是指运用多种分析方法(如形态学方法、免疫学方法、分子生物学方法及流式细胞术等)对血液、体液及人体排泄物中有形成分及分子标志物进行的定性或定量检测。其目的是为临床诊断、治疗和疗效监测提供科学依据。当代血液体液学检验主要由以下3个部分组成:1、临床常规检验 2、临床血液学检验 3、流式细胞分析,临床常规检验项目及临床应用,临床常规检验项目,血常规(全血细胞分析)尿常规(尿常规综合分析)“三大常规”大便常规脑脊液常规 穿刺液常规 胃液常规 精液常规“其它常规项目”前列腺常规 十二指肠引流液常规,临床常规检验项目,尿本周氏试验 血型尿乳糜试验 血沉尿红细胞位相 网织红细胞计数尿溶菌酶 网织红细胞分析
3、尿渗透压 红斑狼疮细胞检查 尿含铁血黄素试验 糖化血红蛋白 尿1小时细胞排泄率 疟原虫检查 尿12小时细胞排泄率 微丝蚴检查,尿液,血液,从“血常规”到“全血细胞分析”,“血常规”WBCRBCBPCHBDC,“全血细胞分析”WBCNEU%+#LYM%+#MON%+#EOS%+#BAS%+#RBCMCVMCHMCHCRDWNRBC HBHCTBPCMPVPDWPCT,嗜中性细胞增多,中性粒细胞增多,生理性增多:妊娠后期及分娩时、剧烈运动或劳动后、高温或严寒、饱餐或淋浴后等情况下出现暂时性增高。病理性增多:急性感染、严重的组织损伤及大量血细胞破坏、急性大出血、急性中毒、白血病及恶性肿瘤。,嗜中性细
4、胞减少,中性粒细胞减少,感染:革兰氏阴性菌感染,如伤寒、副伤寒杆菌感染,白细胞总数和中性粒细胞计数均减少;某些病毒感染,如流感、水痘、风疹、巨细胞病毒感染,某些原虫感染,如疟疾和黑热病时白细胞减少。血液系统疾病:再障、非白血性白血病、恶性组织细胞病、巨幼细胞贫血、PNH以及骨髓转移癌等。理化损伤:各种射线、重金属及化学(疗)药物单核-巨噬细胞系统功能亢进或自身免疫病。,单核细胞增多,单核细胞增多,某些感染:如亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病;急性感染的恢复期;活动性肺结核。某些血液病:粒细胞缺乏症的恢复期;恶性组织细胞病、淋巴瘤;单核细胞白血病等。,单核细胞减少,单核细胞减少,主要见于再障、
5、肿瘤浸润骨髓,也可见于其他血细胞增多时引起的相对减少。,淋巴细胞增多,淋巴细胞增多,生理性增多:儿童期淋巴细胞较高。病理性增多:感染性疾病如风疹、麻疹、流行性腮腺炎、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、病毒性肝炎及流行性出血热等;百日咳杆菌、结核杆菌、布氏杆菌及梅毒螺旋体、弓形体感染。淋巴细胞性恶性疾病:急、慢性淋巴细胞白血病。再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症导致淋巴细胞相对增高。,淋巴细胞减少,淋巴细胞减少,主要见于接触放射线及应用肾上腺皮质激素、烷化剂、抗淋巴细胞球蛋白(ALG)后。先天性免疫缺陷性疾病及获得性免疫缺陷综合征。,嗜酸细胞增多,嗜酸性粒细胞增多,过敏性疾病:支气管哮喘、药
6、物过敏反应、荨麻疹、食物过敏、血管神经性水肿、血清病等。寄生虫病:血吸虫病、肺吸虫病、蛔虫病、钩虫病等。皮肤病:湿疹、剥脱性皮炎、天疱疮、银屑病等。血液病:慢粒、嗜酸性粒细胞白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤等。某些传染病:如猩红热(乙型溶血性链球菌引起)。,嗜碱性细胞增加,嗜碱性粒细胞增多,过敏性疾病:结肠炎、药物、食物、吸入性过敏反应、红斑及类风湿性关节炎。血液病:慢性粒细胞性白血病、嗜碱性粒细胞性白血病以及骨髓增殖性疾病的骨髓纤维化等。恶性肿瘤:骨髓转移癌。其他,如糖尿病、水痘、流感、结核等也可见嗜碱性粒细胞增多。,急性髓系细胞白血病复发 AML复发(ID:7702),AML复发(ID:770
7、2),急性淋巴细胞白血病 ALL(ID:3316),ALL(ID:3316),MCV、MCH、MCHC检测临床意义,从“尿常规”到“尿常规综合分析”,“尿常规”干化学检查+理学检查+尿沉渣镜检,“尿常规综合分析”干化学检查+理学检查+尿流式分析+尿沉渣镜检,为什么要强调尿液综合分析?,“茶水验尿”愚弄了谁?事件回放:2007年3月下旬,一起“传媒事件”引起了广泛关注:某传媒记者乔装成患者,将事先准备好的茶水当作尿液送到杭州10家医院进行检测,结果有6家医院验出“白细胞”,认定茶水“发炎”。从专业角度而言,造成这一事件的根源在于检测干扰问题和实验的假阳性问题。“茶水验尿”直接欺骗了仪器,间接欺骗
8、了医务人员,误导了公众和患者。,为什么要强调尿液综合分析?,尿常规综合分析,尿常规综合分析,尿常规综合分析,急性尿路感染病例的全程观察,判断尿中红细胞来源,UF-100 屏幕显示结果,红细胞信息(RBC info.)根据红细胞前向散射光强度直方图判断 Microcytic(小红细胞)?=提示红细胞源于肾小球 Normocytic(正常红细胞)?=提示红细胞非来源于肾小球 Unclassified(未分类)?=RBC前向散射光直方图显示出一个混合型细胞分布,脑脊液常规,脑脊液检查的目的:用于神经系统疾病的诊断、鉴别诊断及疗效评价。正常脑脊液:无色透明,不含纤维蛋白原,放置24h不会形成薄膜及凝块
9、,不应有红细胞,白细胞数为(010)X106/L,且以单个核细胞为主。急性化脓性脑膜炎:WBC可达(5001000)X106/L以上,且以中性粒细胞为主;蛋白增加明显,糖减少。结核性脑膜炎:WBC在(25500)X106/L之间,且以淋巴细胞为主;蛋白增加,糖减少。病毒性脑炎:以淋巴细胞为主;蛋白增加,糖含量正常。真菌性脑膜炎:多为新型隐球菌所致,用印度墨汁染色可见带有荚膜的圆形酵母样菌。细胞与蛋白变化与结核性脑膜炎类似。脊髓膜癌肿:肺癌、乳腺癌、消化道肿瘤、卵巢癌、白血病等恶性肿瘤可广泛转移浸润脊髓膜,在这些患者的脑脊液中可见癌细胞。,浆膜腔积液检查,人体的胸腔、腹腔和心包腔及关节腔统称为浆
10、膜腔。生理状态下,腔内有少量液体起润滑作用,病理条件下液体增多。浆膜腔积液检查主要用于漏出液与渗出液的鉴别诊断。,精液常规检查,精液检查的主要目的有:评估男性生育能力,提供男性不育的诊断;辅助诊断男性生殖疾病;观察输卵管结扎术效果;法医鉴定及人工授精观察。精液常规检查的主要指标:量、活率、活力、数/L、异形精子、液化时间、pH值、精子总数。,前列腺液常规检查,前列腺液常规检查:用于前列腺炎症、结石、肿瘤及前列腺肥大等疾病的辅助诊断及疗效观察;性病检查。正常成年男性经前列腺按摩一次可采集前列腺数滴至2mL,稀薄,有蛋白折光,呈淡乳白色,呈弱酸性,含有均匀分布的卵磷脂小体,RBC5个/HP,WBC
11、10个/HP。轻度前列腺炎:WBC10个/HP,卵磷脂小体减少。前列腺脓肿:大量成堆WBC,卵磷脂小体明显减少。前列腺癌:不同程度的血性前列腺液,可见大量RBC,染色可见癌细胞。,痰液检查,痰液检查目的:辅助诊断某些呼吸系统疾病,如支气管哮喘、支气管扩张等;确诊某些呼吸系统疾病,如肺结核、肺癌、卫氏并殖吸虫病等;观察疗效和预后判断。呼吸系统化脓性感染:咳黄色痰;绿脓杆菌感染:咳绿色痰;大叶性肺炎或肺坏死:咳铁锈色痰;阿米巴肺脓肿:咳咖啡色痰;急性心力衰竭、肺梗塞、肺结核、肺肿瘤:可咳出红色痰,粪便常规检查,粪便常规检查的目的:了解消化道和通向消化道的器官有无炎症、出血、寄生虫感染、肿瘤等;隐血
12、试验:采用化学或免疫学方法检查粪便以证实出血的微量血液试验。隐血试验是最方便的消化道出血筛查试验。,临床血液学检验项目及临床应用,临床血液学检验项目,骨髓细胞形态学检查过氧化物酶染色酯酶染色中性粒细胞碱性磷酸酶染色酸性磷酸酶染色 细胞化学染色糖原染色铁染色骨髓细胞免疫表型分析,临床血液学检验项目,血栓与止血检验凝血指标(PT、PTINR、APTT、FIB)凝血因子II、V、VII、X、VIII、IX、XI、XII活性测定 血管性假性血友病因子(VWF)测定 因子XIII(FXIII)定性测定 ATIII:C、PC、PS测定纤溶酶原(PLG)测定抗纤溶酶活性测定血小板聚集率(PAgT)血液流变学
13、,临床血液学检验项目,红细胞疾病检验红细胞葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)高铁血红蛋白还原率(MHBRT)酸溶血试验(Hams)糖水试验(sucroses)红细胞葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)高铁血红蛋白还原率(MHBRT)血红蛋白电泳分析血红蛋白H包涵体检测等,骨髓细胞学检查的适应证/禁忌证,适应证:1、必须做骨髓检查才能确诊的疾病:白血病、再障,原发性血小板减少性紫癜,多发性骨髓瘤。2、骨髓检查能提供重要依据:缺铁性贫血,溶血性贫血,失血性贫血。3、血象及临床表现:不明原因的发烧、肝、脾、淋巴结肿大的经骨髓检查可协助诊断。4、观察疗效及预后的估计。5、追踪观察,骨髓增生异常综合征(MDS
14、)。禁忌证:血友病,急性白血病的FAB分型,基于细胞形态学和细胞化学染色的分型。急性淋巴细胞白血病(ALL)的FAB分型项目 L1 L2 L3细胞大小 小细胞为主 大细胞为主 大细胞为主,大小较一致 核染色质 较粗,结构较一致 细而分散或粗而浓集 呈细点状均匀一致 结构较不一致核形 规则,偶有凹陷折叠 不规则,常有凹陷折叠 较规则核仁 小而不清楚,少或无 清楚,一个或多个 明显,一个或多个,泡沫状胞浆 少 不定,常较多 较多胞浆嗜碱性 轻或中度 不定,有些细胞深染 深蓝色胞浆空泡 不定 不定 常明显,呈蜂窝状,急性白血病的FAB分型,急性髓系白血病(AML)的FAB分型 分型 全称 诊断特征A
15、ML-M0 急性髓系白血病微分化型 骨髓中原始细胞 90%(NEC)AML-M1 急性粒细胞白血病未分化型 骨髓原粒细胞I+II型 90%(NEC)AML-M2 急性粒细胞白血病部分分化型 骨髓原粒细胞I+II型占30%90%AML-M3 急性早幼粒细胞白血病 骨髓中以异常的多颗粒早幼粒 细胞为主。AML-M4 急性粒单核细胞白血病 有多种特征表现AML-M5 急性单核细胞白血病 分M5a和M5b两种亚型AML-M6 红白血病 骨髓中原始细胞I+II型30%AML-M7 急性巨核细胞白血病 骨髓原巨核细胞30%,急性白血病的MICM分型,基于形态学(Morphology)、免疫学(Immuno
16、logy)、细胞遗传学(Cytogenetics)与分子生物学(Molecular biology)。急性淋巴细胞白血病(ALL)的MIC分型FAB type immmunophenotype immuno subtype cytogenetic abberationL1/L2 CD10+,CD19+,CD20-/+,CD34+,early t(12;21)CD79a+,HLA-DR+,TdT+B-precursor ALL t(9;22)L1/l2 CD9+,CD10+,CD19+,CD20+/-,Pre-B-ALL t(1;19)CD34-,cCD79a+,HLA-DR+,TdT+/-,c
17、IgM+L3 CD10+/-,CD19+,CD20+,CD22+,B-ALL t(8;14),t(2;7),t()CD34-,cCD79a+,HLA-DR+,Tdt-,sIg+L1/L2 CD1+,CD2+,CCD3+,CD5+,CD7+,T-ALL t(1;14)CD4+/CD8+,CD34-/+,HLA-DR-/+,TdT+,急性白血病的MICM分型,急性髓系白血病(AML)的MIC分型FAB type immunophenotype cytogenetic aberrationMo CD13+,CD15-,CD33+,HLA-DR+,complex karyotypes and freq
18、uently MPO-/+,CD7-/+,TdT-/+involvement of chromosomes 5,7,8,and13M1 CD13+,CD15-/+,CD33+,CD34+,t(9;22),inv(3)HLA-DR+.MpO-/+,CD7-/+M2 CD13+,CD15+,CD33+,HLA-DR+,t(8;21),t(6;9),t(12p)CD34+/-,CD19-/+M3 CD13+,CD15+,CD33+,CD34+/-,t(15;17)HLA-DR+,MPO+/-,CD19-/+M4 CD13+,CD14+/-,CD15+,CD33+,CD34-/+,+4,11q23 r
19、earrangement,M4EO HLA-DR+,CD2+,CD4+/-inv(16),t(16:16)M5 CD13+,CD14+/-,CD15+,CD33+,CD34-/+,t(11q),t(8;16)CD64+/-,HLA-DR+,CD4+/-M6 CD13-/+,CD33+/-,CD34+,HLA-DR-,GlyA+-7/del(7q),-5/del(5q)M7 CD33+/-,CD34+,CD41+,Cd61+,HLA-DR-inv/del(3),一期止血缺陷筛选试验的应用,一期止血缺陷是指血管壁和血小板缺陷所致的出血病。选用BT和PLT作为筛选试验。BT和PLT均正常:正常人、过
20、敏性紫癜、单纯性紫癜。BT延长,PLT减少:原发或继发血小板减少性紫癜BT延长,PLT增多:原发或反应性血小板增多症。BT延长,PLT正常:血小板功能异常或某些凝血因子严重缺乏。,二期止血缺陷筛选试验的理论基础,二期止血缺陷筛选试验的应用,二期止血缺陷是凝血因子缺陷或病理性抗凝物质所致的出血病。选用APTT和PT作为筛选试验。APTT和PT均正常:正常人、遗传性或获得性因子XIII缺陷症。APTT延长,PT正常:内源性凝血途径缺陷,如HA、HB、因子XI缺乏症、因子VIII抗体形成等。APTT正常,PT延长:多数由外源性凝血途径缺陷。APTT延长,PT延长:多数由共同凝血途径缺陷。,纤溶亢进性
21、出血筛选试验的应用,纤溶亢进性出血是纤维蛋白(原)和某些凝血因子被纤溶酶降解所致的出血病。选用FDP和D-D作为筛选试验。FDP和D-D均正常:正常人。FDP阳性,D-D阴性:原发性纤溶。FDP阴性,D-D阳性:继发性纤溶。FDP和D-D都阳性:表示纤维蛋白原和纤维蛋白同时被降解,见于继发性纤溶,如DIC、溶栓治疗。,抗血栓和溶栓治疗中的应用,口服抗凝药的监测:INR(international Normalized Ratio)INR=(PT/MNPT)ISI(1.50-2.80推荐国人)PTR(1.5-2.0推荐国人)F1+2(1.0-1.5nmol/L推荐国人),普通肝素(uFH)治疗的
22、监测,APTT:用于肝素治疗剂量在100U/kg以下的抗凝治疗监测,使其较正常对照延长1.5-2.0倍;血浆uFH浓度:维持0.2-0.4IU/mL;ACT:用于肝素治疗剂量在100U/kg以上的抗凝治疗监测,延长至380-420s(体外循环、血液透析)血小板计数:若低于50X109/L需暂停药。抗凝血酶活性测定(AT:A):要求维持在80%120%,AT:A低于70%:肝素疗效减低,AT:A低于30%,肝素无效。,低分子量肝素(LMWH),Anti-Xa活性测定:0.2-0.4 AFXa IU/mL(预防血栓形成)0.4-0.7 AFXa IU/mL(治疗血栓形成)血小板计数:维持在正常范围
23、内,若低于50X109/L需暂停药。,ISTH/SSC2001 推荐的全球化DIC诊断方案,DIC的实验室诊断,临床怀疑DIC时可以测以下项目:BPC、PT、FIB、D-Dimer。结果判断:累计积分:5分符合显性DIC,每天重复检测计分;5分提示非显性DIC,在随后的12天内重复测定并计分。,溶栓治疗的监测,监测指标及安全范围FIB:1.21.5g/L;TT:正常对照的1.52.5倍;FDP:300400mg/mL 注意:当FIB 正常对照3倍、FDP 400mg/mL,临床出血并发症增加3倍。,降纤药治疗的监测,监测指标及安全范围血浆纤维蛋白原(FIB):FIB维持在1.01.5g/L血小
24、板计数(BPC):血小板数维持在(5060)x109/L,抗血小板治疗的监测,抗血小板治疗是动脉粥样硬化血栓栓塞性疾病治疗的基石。主要包括冠脉病、脑血管病、外周动脉闭塞性疾病等。常用3种抗血小板药物:阿斯匹林、ADP受体抑制剂、GPIIb/IIIa抑制剂。,GP1b,暴露的内皮下胶原,花生四烯酸代谢,花生四烯酸代谢,TXA2,ADP,肾上腺素,凝血酶,Ca2+,内皮细胞,cAMP,前列环素,无活性,配体-受体,GP IIb/IIIa受体(Fig 3),vWF,抵克力得氯吡格雷,TXA2,TXA2,ADP,肾上腺素,5-羟色胺,PDGF,颗粒释放,阿斯匹林,纤维蛋白原,GP IIb/IIIa受体
25、拮抗剂,潘生丁,刺激,抑制,GP=glycoprotein;PDGF=platelet derived growth factor;vWF=von Willebrand factorcAMP=cyclic adenosine monophosphateADP=adenosine diphosphateTXA2=thromboxane A2,监测指标及推荐范围,血小板计数(BPC):血小板数减低到参考值下限(100 x109/L)的40%50%;血小板聚集功能试验(PAgT)血小板聚集抑制率维持在参考值的30%50%(不同药物推荐范围不同);出血时间(BT)延长到正常值(4.89.0min)的1
26、.52.0倍。,阿司匹林的实验室监测,出血时间(BT):以BT延长至治疗前的2.02.5倍为宜。血小板聚集功能测定:应以花生四烯酸作为诱导剂,以最大聚集率降至正常的20%30%为宜,ADP-受体拮抗剂(P2Y12),(抵克力得、氯吡格雷)作用机制:对血小板聚集的各个阶段均有抑制作用:抑制内源性和外源性的ADP诱导的两相血小板聚集减少TXA2的合成稳定血小板膜刺激腺苷酸环化酶,使cAMP增多,ADP-受体拮抗剂的实验室监测,出血时间(BT):以BT延长至治疗前的2.02.5倍为宜。血小板聚集功能测定:应以ADP作为诱导剂,以最大聚集率降至正常的20%30%为宜。白细胞、血小板计数:若有白细胞明显
27、减少或血小板降低应立即停药。,GPb/a拮抗剂的作用机制,血小板膜GPba受体存在于血小板膜表面,在血小板激活时大量表达,是引起血小板聚集的共同通路。所有血小板诱导剂(5-HT、ADP、凝血酶、血栓素、NE等)与各自受体结合后,都必须经血小板膜GPba受体才能引起血小板聚集。因此,无论是血小板膜GPb/a受体单克隆抗体还是竞争性受体抑制剂,均是强烈的血小板聚集抑制药物。,GPb/a拮抗剂,1、单抗 Abciximab(ReoPro)-阿昔单抗2、短肽 Eptifibatide(Integrelin)-埃替巴肽3、非肽 Tirofiban(MK-383,Aggrastat-TM)-替罗非斑 La
28、mifiban,GPb/a拮抗剂的实验室监测,白细胞、血小板计数:若有白细胞明显减少或血小板降低应立即停药。出血时间(BT):以BT延长至治疗前的2.02.5倍为宜。血小板聚集功能测定:常以ADP为诱导剂,以最大聚集率降至正常的20%30%为宜。,红细胞膜缺陷检测,红细胞渗透脆性试验遗传性球形红细胞增多症和自身免疫性溶血性贫血患者脆性增加;缺铁贫、海洋性贫血脆性减低。酸溶血试验阳性主要见于PNH。蔗糖溶血试验PNH的本试验阳性。,红细胞酶缺陷检测,高铁血红蛋白还原试验还原率减低,见于蚕豆病和伯氨喹啉型药物溶血性贫血。红细胞G6PD/6PGD活性比值测定G6PD缺陷者比值明显减低。根据比值可以将
29、G6PD缺陷分为重度缺乏、中度缺乏和临界缺乏。,异常血红蛋白检测,血红蛋白电泳胎儿血红蛋白HbF测定血红蛋白H包涵体染色不稳定血红蛋白检查,流式细胞仪的临床应用,在免疫学中的应用,1、外周血淋巴细胞及其亚群测定:T淋巴细胞及其亚群测定总T淋巴细胞:CD3+CD19-辅助/诱导性T淋巴细胞:CD3+CD4+CD8-抑制/细胞毒性T淋巴细胞:CD3+CD4-CD8+辅助/抑制T淋巴细胞比值CD3+CD4+/CD3+CD8+B淋巴细胞及其亚群测定总B淋巴细胞:CD3-CD19+NK细胞分析:CD3-CD(16+56)+,2、在艾滋病监测中的应用HIV主要选择性侵入人类T淋巴细胞亚群中的CD4+Th细
30、胞。AIDS患者的一个特征性免疫诊断指标表现为:T淋巴细胞总数减少,T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比例倒置,Th细胞数量显著下降甚至测不出。,3、细胞内染色和细胞因子的测定分泌型细胞因子的检测胞内细胞因子的检测监测分泌细胞因子的不同细胞变化细胞内细胞因子测定(IFN-/IL-4/CD8/CD3)细胞内细胞因子测定(TNF-/IL-2/CD8/CD3),4、HLA群体分析HLA-B27抗原检测:HLA-B27抗原阳性与强直性脊柱炎、Reiter综合征、反应性关节炎等一系列关节病有着不同程度的正相关。移植配型及移植后免疫状态检测。,在细胞增殖和肿瘤学中的应用,1、细胞周期和DNA倍体分析细胞周期
31、由G1期、S期、G2期、M期所构成。应用流式技术测定细胞周期各时相的DNA含量进行细胞周期分析。2、DNA分析在肿瘤学中的应用发现癌前病变,协助肿瘤的早期诊断;肿瘤的诊断、预后判断和疗效评价。3、细胞凋亡及多药耐药基因检测。,在血液学中的应用,1、白血病免疫分型2、淋巴瘤免疫分型3、多发性骨髓瘤免疫分型 流式细胞术的多参数分析白血病、淋巴瘤细胞膜、浆或核的免疫表型,可了解被测细胞所属的细胞系列及其分化程度。特别在下列情况意义更大:用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源的白血病;形态学为急性淋巴细胞白血病或急性未分化白血病,但缺乏特异性淋巴细胞系列抗原标记;混合性白血病;部分髓系白血病;慢性淋巴
32、细胞白血病;微小残留白血病。,在血液学中的应用,4、造血干细胞移植监测近年来,造血干祖细胞的移植已越来越多地用于治疗血液系统疾病、恶性肿瘤及一些遗传性异常病变等。CD34抗原表达在骨髓和外周血的未成熟造血细胞和所有具有造血潜能的集落形成细胞上,包括单能和多能祖细胞。流式细胞仪ProCOUNT自动分析软件为鉴定和计数CD34+细胞提供了一个快速、定量、重复性好的方法。,在血液学中的应用,5、阵发性睡眠性血红蛋白尿症的诊断和治疗监测PNH是一种后天获得的克隆性造血干细胞疾病,是由于造血干细胞基因突变,引起细胞膜上GPI锚连蛋白(CD59,CD55,CD16,CD14等)缺失,导致红细胞对补体敏感造
33、成的溶血。PNH患者CD55,CD59细胞明显高于正常人,中性粒细胞的CD16和单核细胞的CD14也缺乏。一般认为,CD55,CD59细胞高于35%时就有诊断意义,并且外周血中性粒细胞CD59的检测对PNH有早期诊断的价值。但在缓解期的病人PNH表型的细胞可以被正常表型细胞所取代。PNH异常细胞起源于造血干细胞,当外周血细胞尚无CD59细胞时,骨髓细胞可能已经有CD59细胞,因此检测骨髓细胞比外周血细胞更有意义。,在血液学中的应用,6、血小板相关疾病中的临床应用血小板膜表面糖蛋白分析血小板活化分析血小板相关抗体检测血小板微粒(PMP)检测网织血小板检测,如何合理选择检验项目?,检验项目选择的原
34、则满足诊断、治疗疾病以及预后监测所需要的证据;减轻患者经济负担;符合徇证检验医学与检验项目合理组合的要求。,筛查试验:选用某种检测方法在无症状人群中找出患有某疾病的病人。如地贫(海洋性贫血)筛查、血常规筛查、尿常规筛查、隐血试验对大肠癌的筛查、PT对外源性凝血因子缺陷的筛查、APTT对内源性凝血因子缺陷的筛查、HIV抗体筛查、肝炎病毒筛查等等。一般选择操作简单、价廉、危害小、检出率高的试验作为筛查试验。,诊断试验:指通过实验室的检查协助临床确诊某一疾病的试验。如在血片中找到疟原虫或微丝蚴,粪便检查发现钩虫卵、肝吸虫卵,骨髓涂片加外周血细胞分类计数,特定凝血因子活性和抗原的测定,基因诊断等。临床
35、上此类试验不多,一般需要多个检验指标的综合,再结合临床资料作出诊断。,监测试验:主要用于监测疾病发展过程或并发症及药物治疗效果的试验。如PT、APTT、TT、ACT、WBC、BPC、FIB、HbA1c、微小残留白血病细胞检测等等。监测试验必需满足两个条件:与疾病的病程或其并发症密切相关;能够用于药物疗效的评价监测。,典型病例分析,病例3资料 患者男性,69岁,因皮肤多发溃疡于2006年8月10日入住我院皮肤科。体格检查发现:阴囊腹侧皮肤见2x2x1cm溃疡,表面覆有痂皮,触痛;双下肢伸侧皮肤见多个散在分布黄豆粒大小的溃疡,表面覆有痂皮。为了行实验室检查给患者抽血时发现血液标本离体后立即凝固,即
36、使采用肝素钠、柠檬酸钠、EDTA二钾抗凝管亦即刻发生凝固。标本送到检验科后,在室温条件下,3000rpm离心10分钟无法分离出血清或血浆,将标本置于37水浴中温育60分钟后,有血清和血浆析出,但是取出后3分钟迅即自凝,6分钟完全变成凝胶状,3000rpm离心10分钟后的标本亦呈凝胶状。,采用37预温、稀释方法以及手工测试等进行常规检验项目测定。WBC:5.34X109/L,RBC:2.32X1012/L,Hb:71g/L,BPC:78X109/L。红细胞沉降率(ESR):90mm/1h。尿白蛋白:0.25g/L,尿本周蛋白定性阴性,血清结核抗体阴性,抗人球蛋白直接试验阴性,冷凝集素试验阴性,抗
37、人球蛋白间接试验阴性,抗心磷脂抗体IgG(ACA-G)阴性,抗心磷脂抗体IgM(ACA-M)阴性。免疫球蛋白定量:IgG 41.7g/L,轻链56.7g/L,IgM 1.104g/L,IgA 0.25g/L。血清蛋白电泳显示位于球蛋白区单克隆蛋白条带,扫描结果为球蛋白,占62.3%(参考值8.8%16.3%);免疫固定电泳分析发现该球蛋白为IgG-型免疫球蛋白,参照Robert1提供的方法,用冷的生理盐水洗涤分离冷球蛋白沉淀,经过免疫固定电泳分析表明该冷球蛋白为IgG-型免疫球蛋白。,经过病理科、检验科、血液形态室、多个临床科室的密切合作,查明其病因,并诊断为多发性骨髓瘤合并冷球蛋白血症。,B
38、ePersistent,GetExcited,Make Connections,Expect Unexpected,BeSociable,Pursue projects that are funPlay with ideas and thingsAsk interesting questionsTake risks,Focus on the key problemsBe systematic and keep recordsConfirm early,but disconfirm late,Take anomalies seriouslyLearn from failuresRecover f
39、rom previous failuresCreate agility,Broaden yourself to more than one fieldRead widelyUse analogiesUse visual as well as verbal Multiple methodsNovel mechanisms,Find smart collaboratorsOrganize good teamsStudy how others are successfulFoster different cognitive stylesCommunicate your work to others,Habits of Highly Creative People,成为创新型人才的5个关键品质,Thank You!,