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1、基因工程乳酸菌表达载体的构建与应用,研究院 穆熙军,提供营养促进生长,维持肠道菌群平衡,刺激肠道免疫组织产生免疫球蛋白,降低动物血清胆固醇含量,促进小肠局部细胞免疫和体液免疫,乳酸菌,表达抗原蛋白,口服疫苗,表达细胞因子,表达抗菌多肽,表达活性酶/功能性蛋白,文献分析1,文献分析2,文献分析3,宝来利来研发中心,乳酸菌,如何分布?,定殖情况?,Subject 1,pMG36e载体图谱,pMG36e,pMG36e,Subject 2,产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是一种重要的人兽共患病原菌,能引起动物坏死性肠炎(Necrotic enteritis,NE)、人类食
2、物中毒等。,C perfringens是一种条件性致病菌,能产生多种致病作用的外毒素,其中、和是主要的致死性毒素。,乳酸菌来源的细菌素一般称为乳酸菌素,分子量一般小于6KDa,能抑制或杀死食品中多数革兰氏阳性致病菌和腐败菌,少数乳酸菌素对革兰氏阴性菌有效,产生菌对其乳酸菌素具有自身免疫性。有资料显示,乳酸菌片球菌属产生的细菌素对产气荚膜梭菌有抑菌活性。,TCTAGAATGAAAAAAATTGAAAAATTAACTGAAAAAGAAATGGCCAATATCATTGGTGGTAAATACTACGGTAATGGGGTTACTTGTGGCAAACATTCCTGCTCTGTTGACTGGGGTAAGGC
3、TACCACTTGCATAATCAATAATGGAGCTATGGCATGGGCTACTGGTGGACATCAAGGTAATCATAAATGCTAGAAGCTT,pMG36e载体图谱,pNZ8048载体图谱,pMG36e-Pediocin转化NZ9000菌液PCR筛选电泳图1 阴性对照 2-12 菌液PCR产物13 pMG36e-Pediocin质粒扩增产物 14 DL2000 Marker,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14,Subject 3,产肠毒素性大肠杆菌ETEC,鸡大肠杆菌病,鸡致病性大肠杆菌APEC,Fi mH 是1型菌毛特异性粘附素,新生仔猪大肠杆菌性腹泻,K88是仔猪腹泻的主要抗原,Summary,一菌两用安全、无毒可直接口服,无须静脉注射高效性,同时诱导粘膜免疫和系统免疫,THANK YOU!,