前带检查方法及参数确定方案.doc

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1、前带检查基本原理图1 抗原抗体反应的剂量反应曲线在抗原抗体的反应中,生成的不溶性抗原抗体复合物与抗原抗体的比例密切相关,在适当比例时生成的不溶性抗原抗体复合物量最大,此时透过的光最少,相当于吸光度最大;大于和小于这个比例时,生成的不溶性抗原抗体复合物量都会减少,透过的光增加,吸光度减小。在这种情况下,浓度相差很大的两份样本(抗原),生成的不溶性抗原抗体复合物量可以相等,如果不进行前带检查,会得到相同的测定结果。如图7所示。因此,对于抗原抗体反应,有必要进行前带检查。前带检查仅适用于终点法,固定时间法和动力学法不进行前带检查。前带限指没有出现抗原过剩时允许的最大或最小PC值。前带检查判断方法:反

2、应速度比法反应速度比法是根据在一定的相同的时间内,抗体过剩反应曲线能够达到平衡,如图2所示;而抗原过剩反应曲线达不到平衡,如图3所示。具体判断方法: (prozone limit)前带限【PCM】 【q1】【q2】【q3】【q4】 (prozone check distinction abs.lowlimit)前带检查吸光度下限值ABS【abs.lowlimit】 样本PC值: 若PC PCM正常情况,PC值比较小.,给出“前带!”标记。以下两种情况,不再进行前带检查。(1) 样本终点吸光度Aabs.lowlimit(下降反应)。(2) 样本反应度绝对值RRCMAX(最大浓度标准品反应度绝对值

3、)。上述q1q4为测光点.且满足 0q1q2q3q4RCMAX(最大浓度标准品反应度)时,测试结果不再计算,即使计算,测试结果已经很大,并会给出相应报警,因此该种情况下也不必检查。3. 由于除alycon160外,大部分生化仪(如日立、奥林巴斯、雅培、贝克曼、岛津、sysmex等)均把抗原过剩检查称为前带检查,因此建议BS生化仪抗原过剩检查项(采用反应速度比法)改名为前带检查。参数确定方案1. 配置各种浓度水平的溶液(浓度水平覆盖前带.等价带及后带),找出如图1所示的抗原抗体反应的剂量反应曲线.2. 取测光点q1q4, 要求0q1q2q3q4反应时间终点,q1,q2取反应曲线的前几个点(反应最快的部分,要求在反应曲线拐点以前), q3,q4取反应曲线的最后几个点(一般反应曲线达到了平衡) .如图2中,q1可取1,q2可取5,q3可取29,q4可取34.3. 根据2中的测光点,计算出各浓度水平的PC值,从而找出前带和后带之间的阈值PCm4. 前带检查吸光度下限值abs.limit取所配溶液的最低浓度水平的终点吸光度.图2 抗体过剩的时间反应曲线图3 抗原过剩的时间反应曲线

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