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1、生物梅里埃厌氧菌 解决方案,定义,是指一大群在有氧条件下不能生长，必须在无氧条件下才能生长的细菌。这类细菌缺乏完整的代谢酶系统，其能量代谢以无氧发酵的形式进行，不但不能利用氧气，反而被其抑制。,常见厌氧菌分类,菌类属常见种革兰阳性球菌厌氧球菌属厌气葡萄球菌、厌气链球菌消化球菌、消化链球菌革兰阴性球菌厌氧球菌属小韦荣球菌大韦荣球菌革兰阴性杆菌类杆菌属脆弱类杆菌、产黑色素类杆菌梭形杆菌属二路类杆菌、普通类杆菌、普雷沃杆菌属核梭杆菌、坏死梭杆菌、卟啉单胞菌属死亡梭杆菌、解糖普雷沃杆菌无芽胞革兰阳性杆菌放线菌属伊氏、纳氏放线菌、真杆菌属不介糖真杆菌、迟缓真杆菌、丙酸杆菌属痤疮颗粒丙酸杆菌、双歧杆菌属短
2、双歧杆菌、长双歧杆菌、乳酸杆菌属嗜酸乳酸杆菌产芽胞革兰阳性杆菌梭菌属产气荚膜梭菌、难辩梭菌、破伤风梭菌,厌氧菌分离鉴定流程,样本 血琼脂 厌氧血琼脂或 涂片革兰染色 中国蓝琼脂 选择培养基 记录结果 需氧培养基18-24h 48h厌氧培养 需氧菌鉴定报告 可疑菌菌落做耐氧试验 需氧24h 厌氧48h 生长 不生长 生长 不生长 兼性厌氧菌或需氧菌 作第二次耐药试验 兼性或需氧菌 厌氧(+)需氧(-)涂片并与最初涂片 VITEK API 20A 气相色谱 PCR 菌种保存 药敏试验:对照有无遗漏 ANI卡 Rapid ID 32A Etest或 琼脂稀释法,几种主要厌氧菌的特征,细菌血琼脂菌落形
3、态镜下形态其他特征脆弱类杆菌突起、灰白色、透明G-杆菌、多形态、耐卡那霉素、青折光微溶血染色不匀霉素、胆汁促生长触酶阳性产黑色素类杆菌突起、桃红色荧光、小、末端园型、卡那：R白光下棕黑色、溶血常呈球型青霉素：S胆汁抑制生长核梭杆菌突起闪光、斑点状、面包长梭状、二头卡那、青霉素“S”屑样斑点菌落、绿色溶血尖细、有时呈可被胆汁抑制、纤维状ind+、脂酶阴性消化球菌小突起、灰白浑浊、边缘大小不等、可成单、巨消化球菌、形态大透明、可溶血或绿色溶血成双、成堆成堆、液化明胶。不介糖消化球菌ind+消化链球菌同上大小不等成对成链形态较小产气荚膜杆菌微突起、微浑浊、灰色、边缘大、末端钝无动力、液化明胶、发整齐
4、或不规则。宽的双溶血环芽胞极难形成酵多种糖、水解七叶苷,厌氧培养方法,一、简易厌氧袋培养法 方便 易使用原理:用一种透明、不透气的塑料袋作为厌氧容器，内置化学吸氧装置（如连二亚硫酸钠和碳酸氢钠，或产H2,CO2的化学时间和催化剂钯粒，或商品化产气条），厌氧指示剂二、厌氧罐(盒)培养法 方便 易使用三、厌氧手套箱法 当今国际公认的培养厌氧菌的最佳方法，但价格昂贵，而且长期维持手套保持厌氧环境需要消耗大量的混合其它，费用很高，限制了其推广应用四、Oxyrase酶平皿培养系统五、气体喷射培养法六、其它方法（一）液体培养法（二）高层琼脂培养法,生物梅里埃的厌氧培养系统,简易厌氧袋（盒）培养,特殊气体发
5、生剂,所有产气装置包括:活性碳抗坏血酸钠有机和无机成份,最终气体环境与以上各化学成份量多少有关,不需水 不需催化剂 不产热,特殊气体发生剂,高性能：能在1小时内达到所需要的气体环境,厌氧指示剂,亚甲兰+还原剂在无氧环境无色有氧环境为兰色方法:在反应区加1滴水并放进厌氧缸或厌氧袋内 4-6小时后变成无色每次用新指示条,货号:96118规格:50条,GENbag,需培养的平板数量少时GENbox已经关闭时急诊标本小型实验室API试剂条适合于单个使用,GENbag anaer:最多放5个平板+1个厌氧指示剂 GENbag CO2:最多放2个平板 GENbag microaer:最多放2个平板 1个G
6、ENbag和产气袋可供1个API 试剂条或2个ATB试剂条培养用.,GENbag,名称GENbagGENbagGENbagAnaerCO2Microaer货号45 53445 53345 532试验数202020包装20个袋20个袋20个袋20个产气包 20个产气包 20个产气包 保存 2-25 C干燥环境,2个密封夹最多可反复用10次,GENbag 密封夹货号.45 511含10个密封夹,GENbox,体积大，可放置平板多经常用于特殊气体环境适合每天使用产气袋使用数量需根据GENbox容积确定 2.5L GENbox可放12个平板+1个产气袋 7L GENbox可放42个平板+3个产气袋,使
7、用API厌氧鉴定条，先在试条的盘中加水，再把API试条放进盘，然后放入缸内,放厌氧指示剂.,GENbox,GENbox,聚碳酸酯缸硅酮盖密封,GENbag/GENbox,使用方法：把平板放进培养袋/缸内从铝箔袋内取出产气条放进塑料培养袋/缸内立刻用密封夹密封培养袋/盖严培养缸,不要往产气包内加水:灭活反应培养过程中不能打开产气袋/缸如果厌氧袋/缸打开并需进行再培养:用一个新的产气包由于Genbox/bag气体容积经过校正，所以必须使用同系统产气包应快速将产气袋放入Genbox/bag.不要迟疑!时间不能超过:GENbag-30秒；GENbox-1分钟 GENbag/box anaer:确认厌氧
8、指示条颜色变化 Genbag CO2-microaer:如果只有1个平板培养,需再放1个空平板,GENbag/GENbox,注意,产品种类齐全可培养厌氧菌、微需氧菌、嗜二氧化碳菌高性能快速产生最佳培养环境简单不需要缸,水,触酶和不产热培养盒种类齐全，长方形设计，节省空间操作过程简单实用可通过透明容器观察是否有菌落生长，不需要打开容器标准组件系统:相同系统可用于平板,API试剂条,.,GENbag/GENbox,厌氧培养用培养基,斯氏琼脂+5%羊血：适用所有厌氧菌生长 货号：43401 2090mm 43279 100*90mm斯氏万古霉素+5%羊血：适用革兰阴性厌氧菌的分离（主要为类拟杆菌和普
9、雷沃菌属）货号：43223 1090mm产气荚膜梭菌选择培养基 货号：43603 6200ml亚硫酸铁琼脂 计数食品中的亚硫酸盐还原厌氧菌和产气荚膜梭菌 货号：51048 TSN琼脂 500g 分离产气荚膜梭菌,常用厌氧菌鉴定方法,常规生化鉴定法1、手工生化鉴定方法2、生化鉴定条鉴定法预成酶鉴定法 厌氧菌菌体内含有的各种酶，在菌体暴露空气死亡后仍能较长时间地保留其活性。利用这一特性，采用特定的底物和指示剂，测定代检厌氧菌预成酶的种类和活性，从而鉴定出厌氧菌的种属,生物梅里埃鉴定产品,手工 半自动 全自动,ANC卡片货号：21347,Rapid ID 32 A货号：32300,API 20 A货号：20300,API 20 A操作流程,自动细菌鉴定-ATB,比浊器(Densimat):提供标准、简单及准确的细菌浓度。,连续加样器(Electronic Pipette):提供标准化、简单及准确的加样量。,标准化的接种方法,1.取菌,2.稀释,3.加样,ATB 耗材操作规程,4.孵育,5.加附加试剂,6.读取结果,VITEK:全自动细菌鉴定仪,=树立自动化操作金标准,传统与现代的完美结合,WWW.bioM,
