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1、分离以尿素为氮源的微生物,实验2,（一）制备培养基：,（二）制备细菌悬液 制备成10-4、10-5土壤稀释液,实验组,对照组,全营养LB固体培养基,尿素固体培养基,倒平板,需要倒2个LB平板，6个尿素平板,每个稀释度 1个LB对照平板 3个尿素平板(平行重复组),（三）涂布分离,（三）涂布分离,涂布前后玻璃刮刀需要灼烧吗？,（四）恒温37培养24-48h，观察,LB培养基上10-4、10-5稀释度土样涂布结果,尿素培养基上10-4、10-5稀释度土样涂布结果,流程 制备培养基 灭菌 倒平板 称土样梯度稀释菌液 涂布,培养观察,细菌 尿素 NH3 中性 碱性 酚红颜色：黄色 红色,细菌产生的脲酶
2、向周围扩散，将培养基中的尿素分解，产生的氨使培养基变碱，于是酚红由黄变红。随着培养时间的延长，红色区域的面积越来越大。,分离纯化,原理：设计特殊的分离培养基，即人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。常用选择培养基筛选。通过观察微生物在选择培养基上生长状况或生化反应如透明圈、变色圈等进行分离。,本课题的培养基以尿素为唯一氮源。,变色圈法：在平板中加入指示剂或显色剂，使所需微生物能被快速鉴别出来。产生有机酸或胺等碱性物质的微生物，通常采用pH值指示剂可检测出来。,在本课题提供的选择培养基的配方中，尿素是培养基中的惟一氮源，因此，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。,实际上，微生物的培养是一个非常复杂的问题，比如有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此能够在选择培养基上生长的微生物不一定都是所需要的微生物，还需要进一步的验证。,能够在选择培养基上生长的微生物是否都是所需要的微生物？,
