实验室 溶液配制方法.doc

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1、实验室常用溶液配制(希望对大家有帮助)一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20。 10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性， 须将蛋白加入水中，而不是

2、将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20。 1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20。或转移100mg的二硫苏糖醇 至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。 1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。 3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三

3、水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。 1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。 1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。 25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-2

4、0。 1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl26H2O于足量的水中，定容到100ml。 100mmol/L PMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹 或贮存于-20。 20mg/ml蛋白酶K（proteinase K）：将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20。 10mg/mlRnase（无DNase）（DNasefree RNase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH 5.

5、0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的TrisHCl调pH至7.5，于-20贮存。（配制过程中要戴手套） 5mol/L氯化钠（NaCl）：溶解29.2g氯化钠于足量的水中，定容至100ml。 10N氢氧化钠（NaOH）：溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。 10SDS（十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。 2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）：溶解36.4g山梨（糖）醇于足量水中使终体积为100ml。 100三氯

6、乙酸（TCA）:在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制） 2.5 Xgal（5-溴-4-氯-3-吲哚-半乳糖苷）：溶解25mg的Xgal于1ml的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20。 100Denhardt试剂（Denhardts regent） 成分及终浓度 配制100ml溶液各成分的用量2%聚蔗糖（Ficoll，400型） 2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40） 2%BSA（组分V） 水 2g 2g 2g 加水至总体积为100ml ,依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20贮存。 10

7、标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接） 成分及终浓度 配制10ml溶液各成分的用量 0.5mol/L Tris-HCl:5ml1mol/L 贮液 ,100mmol/L MgCl2:1ml 1mol/L 贮液,100mmol/L DTT:1ml 1mol/L 贮液,2mmol/L ATP: 200ul 100 mmol/L 贮液,5mmol/L 盐酸亚精胺（可选）:50ul 1 mmol/L 贮液,0.5mg/ml BSA（组分V）（可选）:0.5ml 10 mg/mL 贮液 ,水: 2.25ml将配制好的缓冲液分装成小份，贮存于-20

8、。 100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions） 可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液，-80可贮存至少6个月。 10mmol/L dNTP混合液 成分及终浓度 配制20ul溶液各成分的用量10mmol/L dATP 10mmol/L dCTP10mmol/L dGTP 10mmol/L dTTP 水2ul 100 mmol/L dATP 贮液 2ul 100 mmol/L dCTP 贮液 2ul 100 mmol/L dGTP 贮液 2ul 100 mmol/L dTTP 贮液 12ul 20PEG 8000/2.5M NaCl 成分及终浓度 配制10ml溶液

9、各成分的用量质量浓度为20聚乙二醇 2.5mol/L 氯化钠 水20g 50ml 5 mol/L 氯化钠 或 14.6g 固体氯化钠 补足100ml 加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中，加水至终体积100ml，用磁力搅拌器搅拌溶解。 20SSC 成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量300mmol/L 柠檬酸三钠（二水） 3mol/L 氯化钠 水88.2g 175.3g 补足1L 溶解柠檬酸三钠（二水）和氯化钠于约0.9L水中，加几滴10N NaOH溶液调pH为7.0，用水补足体积至1L。 DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水 加100ul DEPC 于 100ml 水中，使DEPC的体积分数为0.1。

10、在37温浴至少12h，然后在15 psi 条件下高压灭菌20min，以使残余的DEPC失活。DEPC会与胺起反应，不可用DEPC处理Tris缓冲液。 甲酰胺（deionized formamide） 直接购买或加Dowex XG8 混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中，用磁力搅拌器轻轻搅拌1h，可去除甲酰胺中的离子。经Whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份，充氮气于-80贮存（防止氧化）。 磷酸缓冲液（phosphate buffer） 按照下表所给定的体积，混合1 mol/L 的磷酸二氢钠（单碱）和1mol/L 磷酸氢二钠（双碱）贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1 mol/L 的磷酸

11、二氢钠（NaH2PO4H2O）贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠（Na2HPO4）贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。 1mol/L 磷酸二氢钠（ml） 1mol/L 磷酸氢二钠（ml） 最终pH值877 850 815 775 735 685 625 565 510 450 390 330 280123 150 185 225 265 315 375 435 490 550 610 670 7206.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 7.0 7.1 7.2TE（用于悬浮和贮存DNA） 成分及终浓度 配制10

12、0ml溶液各成分的用量10mmol/L TrisHCl 1mmol/L EDTA 水1ml 1mol/L Tris-HCl（pH7.4-8.0，25） 200ul 0.5 mol/L EDTA（pH 8.0） 98.8ml Tris缓冲液（Tris-HCl buffer） 将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH（25下）加一定量的浓盐酸（11.6N），用水调整终体积至1L。 浓盐酸的体积（ml） pH8.6 14 21 28.5 38 46 56 66 71.3 769.0 8.8 8.6 8.4 8.2 8.0 7.8 7.6 7.4 7.2 二.电泳缓冲液、染料和凝

13、胶加样液 电泳缓冲液 50Tris-乙酸（TAE）缓冲液 成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量2mol/L Tris碱 1mol/L 乙酸 100 mmol/L EDTA 水242g 57.1 ml的冰乙酸（17.4 mol/L） 200ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0） 补足1L 5Tris-硼酸（TBE）缓冲液 成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量445 mmol/L Tris碱 445 mmol/L 硼酸盐 10 mmol/L EDTA 水54g 27.5g 硼酸 20 ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0） 补足1L 染料 1溴酚蓝（bromopheno

14、l blue） 加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。 1二甲苯青FF（xylene cyanole FF） 溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。 10mg/ml的溴化乙锭（ethidium bromide） 小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4贮存。 凝胶上样液（gel loading solutions） 6碱性凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量0.3 N 氢氧化钠 6 mmol/L EDTA 18聚蔗糖（400型） 0.15溴甲酚绿 0.25二甲

15、苯青FF 水300ul 10N 氢氧化钠 120ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0） 1.8g 15mg 25mg 补足到10ml 6聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量0.15溴酚蓝 0.15二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 15聚蔗糖（400型） 水1.5ml 1溴酚蓝 1.5ml 1二甲苯青FF 100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0） 1.5g 补足到10ml 6溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量0.25溴酚蓝 0.25二甲苯青FF 15聚蔗糖（400型） 水2.5ml

16、 1溴酚蓝 2.5ml 1二甲苯青FF 1.5g补足到10ml 6甘油凝胶上样液（4贮存） 成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量0.15溴酚蓝 0.15二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 50甘油 水1.5ml 1溴酚蓝 1.5ml 1二甲苯青FF 100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0） 3ml3.9ml 6蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量0.15溴酚蓝 0.15二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 40聚蔗糖 水1.5ml 1溴酚蓝 1.5ml 1二甲苯青FF 100ul 0.5mol/L EDTA（pH8.0） 4g补足到10

17、ml 10十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存） 成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量0.2溴酚蓝 0.2二甲苯青FF 200 mmol/L EDTA 0.1SDS 50甘油水20mg 20mg 4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 100ul 10 SDS 5ml 补足到10ml 三.常用培养基 LB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g如果需要用1N NaOH（1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 SOB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨

18、20g酵母提取物 5g氯化钠 0.5g1 mol/L 氯化钾 2.5ml用水补足体积到1L。分成100ml的小份，高压灭菌。培养基冷却到室温后，再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。 SOC培养基 成分、方法同SOB培养基的配制，只是在培养基冷却到室温后，除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外，再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖（18g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100ml，用0.22um的滤膜过滤除菌）。 TB培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 12g酵母提取物 24g甘油 4ml各组分溶解后高压灭菌。冷却到60，再加100ml灭

19、菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液（2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中，使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌）。 2YT培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 16g酵母提取物 10g氯化钠 4ml如果需要用1N NaOH（1ml）调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 YPD培养基 将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白胨 20g酵母提取物 10g葡萄糖 20g用水补足体积为1L后，高压灭菌。建议在高压灭菌之前，对色氨酸营养缺

20、陷型每升培养基添加1.6g色氨酸，因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板，需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。 四.常用抗生素 氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml） 溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以25ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） 溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以25ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） 溶解

21、1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。 卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） 溶解100mg卡那霉素于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） 溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以12.5ug/ml25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 链霉素（streptomycin）（50mg/ml）

22、 溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） 溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。 四环素（tetracyyline）（10mg/ml） 溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中，或者将无碱的四环素溶于无水乙醇，定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光，于-20贮存。常以10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。几种溶液的

23、配制方法1、PBS: 取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH值应在7.27.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL或NaOH调整。2、TBS： 2.1 Tris缓冲液配方：（0.5 MpH7.6） Tris（三羟甲基氨基甲烷） 60.57g 1N HCL 约420ml 双蒸水 加至1000ml Tris缓冲液配制方法： 先以少量双蒸水（300500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6， 最后双蒸水加至1000ml。此液为储备液，4冰箱中保存。 2.2 TBS配方： Tris-HCI缓冲液（0.5MpH7.6） 10

24、0ml NaCI 8.59g (0.15mol/L) 双蒸水 加至1000ml TBS配制方法： 先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。 3、枸橼酸盐缓冲液（Citrate buffer）： 3.1 储存液： A. 0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸（C6H8O7H20）溶于1000ml蒸馏水中。 B. 0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠（C6H5Na3O72H20）溶于1000ml蒸馏水中。 3.2 工作液： 取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.00.1 4、胰酶（Trypsin

25、）： 4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液： 常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合（1:3稀释），则可直接滴加使用。胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%（1:10稀释）至0.25%（1:1稀释）。 4.2 ZLI-9010胰蛋白酶： 取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可。 5、胃酶（Pepsin）：4%胃蛋白酶，用0.1mol/L HCL配制。（我公司备有ZLI-9013胃蛋白酶消化工作液，不需稀释直接滴加使用，欢迎选购） 6、DAB： 6.

26、1 ZLI-9032/9033 DAB Kit： 使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1ml双蒸水中，即可获得1ml DAB工作液，简单易用。 6.1 ZLI-9030 DAB： 6mgDAB溶于10mlTBS（0.05MpH7.6），再加入0.1ml浓度为3的H2O2，过滤掉沉淀物，即可。7、AEC：4mg AEC溶于1ml二甲基甲酰胺中，加入14ml浓度为0.1M的醋酸缓冲液（pH5.2），然后加入0.15ml 3%H2O2，过滤掉沉淀物。8、RIPA：1PBS，1%NP 40，0.5 sodium deoxycholate，0.1% SDS（此液体可长期保存）。以下抑制剂

27、以储存液方式保存，临用前加入RIPA中。8.1 10mg/ml PMSF异丙醇溶液（用量为10ml/ml）8.2 Aprotinin（Sigma产品，用量为30ml/ml）8.3 1000mM sodium orthovanadate冷冻液（用量为10ml/ml）9、Blotto A：常规使用1PBS，5% milk，0.05% Tween 20。10、Blotto B：与Phosphotyrosine抗体共用，1PBS，1% milk，0.05% Tween 20。部分实验中milk可完全去除，但可能引起背景增高。 Last edited by BlueGuy on 2006-4-26 at

28、 20:42 相关回复：作者: Eric6007 发布日期: 2006-04-26实验室常用贮存液的配制参数一、核酸及蛋白质常用数据化合物 分子量 max(pH7.0) 1摩尔溶液（pH7.0）中max时的最大吸收值 OD280/OD260 ATP 507 259 15400 0.15CTP 483 271 9000 0.97GTP 523 253 13700 0.66UTP 484 262 10000 0.38dATP 494 259 15200 0.15dCTP 467 271 9300 0.98dGTP 507 253 13700 0.66dTTP 482 267 9600 0.712常

29、用核酸的长度与分子量核酸 核苷酸数 分子量DNA 48502（双链环状） 3.0107pBR322 4363（双链） 2.810628SrRNA 4800 1.610623SrRNA 3700 1.210618SrRNA 1900 6.110519SrRNA 1700 5.51055SrRNA 120 3.6104tRNA（大肠杆菌） 75 2.51043常用核酸蛋白换算数据（1）重量换算1g=10-6g 1pg=10-12g1ng=10-9g 1fg=10-15g（2）分光光度换算：1A260双链DNA=50g/ml1A260单链DNA=30g/ml1A260单链RNA=40g/ml（3）D

30、NA摩尔换算：1g 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端1g pBR322 DNA=0.36pmol1pmol 1000bp DNA=0.66g1pmol pBR322=2.8g1kb双链DNA（钠盐）=6.6105道尔顿1kb单链DNA（钠盐）=3.3105道尔顿1kb单链RNA（钠盐）=3.4105道尔顿（4）蛋白摩尔换算：100pmol分子量100，000蛋白质=10g100pmol分子量50，000蛋白质=5g100pmol分子量10，000蛋白质=1g氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿（5）蛋白质/DNA换算：1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.71

31、04MW蛋白质10，000MW蛋白质=270bp DNA30，000MW蛋白质=810bp DNA50，000MW蛋白质=1.35kb100，000MW蛋白质=2.7kb DNA4常用蛋白质分子量标准参照物（1）高分子量标准参照 （2）中分子量标准参照 （3）低分子量标准参照肌球蛋白 分子量 磷酸化酶B 97，400 碳酸酐酶 31，00肌球蛋白 212，000 牛血清白蛋白 66，200 大豆脻蛋白酶 21，500-半乳糖甘酶B 116，000 谷氨酶脱氢酶 55，000 抑制剂 磷酸化酶B 97，400 卵白蛋白 42，700 马心肌球蛋白 16，900牛血清白蛋白 66，200 醛缩酶

32、40，000 溶菌酶 14，400过氧化氢酶 57，000 碳酸酐酶 31，000 肌球蛋白（F1） 8，100醛缩酶 40，000 大豆脻蛋白酶 21，500 肌球蛋白（F2） 6，200 抑制剂 肌球蛋白（F3） 2，500 溶菌酶 14，400 5常用DNA分子量标准参照物DNA/Hind DNA/EcoR /Hind+EcoR pBR322/Hae23130 21226 21227 587 1239416 7421 5148 405 1046557 5804 4973 504 894361 5643 4268 458 802322 4843 3530 434 642027 3530 2

33、027 267 57564 1904 234 51125 1584 213 21 1375 192 18 974 184 11 831 124 7 564 125 续上表pBR322/Hinf 174/Hinf 174/Hae 174/Tap1631 726 140 1353 2914517 713 118 1078 1175506 553 100 872 404396 500 82 603 327344 417 66 310 231298 413 48 281 141221 311 42 271 87220 249 40 234 54154 200 24 194 3375 151 118 2

34、0 72 二、常用缓冲液1分子克隆常用缓冲液2磷酸缓冲液（1）25下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制pH 1mol/L K2HPO4(ml) 1mol/L KH2PO4(ml)5.8 8.5 91.56.0 13.2 86.86.2 19.2 80.86.4 27.8 72.26.6 38.1 61.96.8 49.7 50.37.0 61.5 38.57.2 71.7 28.37.4 80.2 19.87.6 86.6 13.47.8 90.8 9.28.0 94.0 6.2（2）25下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制pH 1mol/L Na2HPO4(ml) 1mol/L NaH2PO

35、4(ml)5.8 7.9 92.16.0 12.0 88.06.2 17.8 82.26.4 25.5 74.56.6 35.2 64.86.8 46.3 53.77.0 57.7 42.37.2 68.4 31.67.4 77.4 22.67.6 84.5 15.57.8 89.6 10.48.0 93.2 6.8:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml，根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH值：pH=pK+1g(质子受体/质子供体)在此，pK=6.86(25)。3电泳缓冲液测序凝胶加样缓冲液98%去离子甲酰胺10mol/L EDTA(pH8.0)0.

36、025%二甲苯青FF0.025%溴酚蓝甲酰胺：许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理。不过，一旦略呈黄色，则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与Dowex XG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理，并用Whatman 1号滤纸过滤2次，去离子甲酰胺分装成小份，充氮存于-70。常用的电泳缓冲液缓冲液 使用液 浓贮存液（每升）Tris-乙酸（TAE） 1：0.04mol/L Tris-乙酸 50：242g Tris碱 0.001mol/L EDTA 57.1ml冰乙酸 100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)Tris-磷酸（TPE） 1:0.09mol/L Tris-磷

37、酸 10:10g Tris碱 0.002mol/L EDTA 15.5ml85%磷酸（1.679g/ml） 40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)Tris-硼酸（TBE）a 0.50.045mol/L Tris-硼酸 5：54g Tris碱 0.001mol/L EDTA 27.5硼酸 20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)碱性缓冲液b 1:50mmol/L NaOH 1:5ml 10mol/L NaOH 1mmol/L EDTA 2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)Tris-甘氨酸c 1:25mmol/L Tris 5:15.1g Tris 250mmol/L 甘氨酸 94g 苷氨酸（电泳级）（pH8.3） 0.1% SDS 50ml 10% SDS(电泳级)说明：TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5溶液，出现沉淀后则予以废弃。以片都以1TBE作为使用液（即1：5稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小， 故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1TBE以提供足够的