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1、微电流刺激在眼科中的应用,2023/3/3,文献汇报,2,电疗法 Electro-Therapy,经皮神经电刺激Transcutaneous Electrical Nerve Stimulation(TENS)干扰电疗法Interferential Current(IFC)直流电疗法 Galvanic Stimulation(GS)微电流刺激Microcurrent stimulation（MCT）,1818年关于电疗的漫画：灵药电万能药,2023/3/3,文献汇报,3,微电流刺激的优势,1969年，Wolcott 团队报告使用200-800微安电流加速伤口愈合，瘢痕组织抗张强度更好，抗菌能力
2、更强。安-舒二氏定律:弱刺激增强生理活动,强刺激抑制生理活动微电流更接近生物体组织修复时的自发生物电流。,2023/3/3,文献汇报,4,微电流刺激的作用,增加ATP的产生增加蛋白合成增加离子交换加快细胞运输加快血流速度,2023/3/3,文献汇报,5,文献汇报,微电流刺激对视觉神经细胞存活与再生的作用细胞实验Retinal mller cells动物实验-RCS大鼠人体实验经角膜电刺激经皮电刺激,2023/3/3,文献汇报,6,人眼解剖结果,2023/3/3,文献汇报,7,视网膜,光,2023/3/3,文献汇报,8,文献1,2023/3/3,文献汇报,9,问题,电刺激对BDNF产生的作用机理
3、是什么？,2023/3/3,文献汇报,10,背景介绍,Muller细胞:视网膜中主要的胶质细胞表达谷氨酸钠转运体-保护神经节细胞合成谷氨酰胺合成酶产生多种神经营养因子(BDNF,bFGF,IGF)Ca2+:第二信使L型电压依赖性钙通道-钙流入-神经营养因子电刺激引起钙流入从而诱发多种基因表达,2023/3/3,文献汇报,11,实验方法,Muller细胞培养 95%1代电刺激:AgCl针型电极(直径0.2mm)插入培养液 间隔20mm双相方波串(脉宽1ms;频率20Hz;电流10mA)作用时间:30分钟微阵列分析RNA样本与包含31099个目标探针杂交量化实时聚合酶链反应RT-PCRBDNF的m
4、RNA水平酶联免疫吸附法 BDNF蛋白水平L-VDCC阻滞的量化实时PCR（硝苯吡啶）,2023/3/3,文献汇报,12,实验结果,微阵列分析电刺激下，245个探针表达信号强度比对照组高两倍以上神经系统发育相关基因中BDNF的基因表达增加2.6倍BDNF mRNA上调2h,3h 增加1.2倍6h 降低,2023/3/3,文献汇报,13,细胞内BDNF蛋白水平 6h,细胞外BDNF蛋白水平,2023/3/3,文献汇报,14,L-VDCC阻滞,0mA 10mA 0mA+blocker 10mA+blocker,2023/3/3,文献汇报,15,讨论,钙离子通过L型电压依赖性钙离子通道流入mulle
5、r细胞上调BDNF的转录Muller细胞不只合成BDNF，而且表达BDNF的特异受体BDNF对光感受器和神经节细胞有神经保护作用电刺激如何刺激L-VDCC的机制尚不明确,2023/3/3,文献汇报,16,学到的知识细胞的培养细胞实验基因表达分析不足微阵列分析只选择了一种神经营养因子 BDNF进行分析,2023/3/3,文献汇报,17,问题,电刺激对BDNF产生的作用机理是什么？,钙离子通过L型电压依赖性钙离子通道流入细胞上调BDNF的转录,2023/3/3,文献汇报,18,文献2,2023/3/3,文献汇报,19,问题,本文采用的大鼠视网膜功能的评价方法是什么？,2023/3/3,文献汇报,2
6、0,背景知识,RCS大鼠(Royal College of Surgeon rat)在英国皇家外科学院（Royal College of Surgeons）最早培育成功而得名。此鼠有常染色体遗传性视网膜变性，基因型为rdy；是目前研究某些形式的视网膜色素变性、遗传性黄斑变性及脉络膜缺损等疾病的动物模型 视网膜色素变性(Retinitis pigmentosa,RP)感光细胞逐渐变性,进而演变成不可治愈的失明遗传缺陷或基因突变,2023/3/3,文献汇报,21,实验,动物6只RCS大鼠（光照：12小时暗12小时亮循环，光照度：100 lux）电极：双极性接触式电极电流：脉宽1ms；频率20Hz；
7、电流50,100uA；双相方波；持续时间 1h效果分析:视网膜功能：视网膜电图视网膜形态：组织学观察,2023/3/3,文献汇报,22,100uA,Sham,组织学观察,2023/3/3,文献汇报,23,ONL,INL厚度随电流强度的改变,2023/3/3,文献汇报,24,3周control 5周TES 5周Sham 9周TES 9周Sham,2023/3/3,文献汇报,25,ONL,INL厚度随时间的改变,2023/3/3,文献汇报,26,视网膜电图 ERG,Control,ControlTESSham,B波,a波,b波,2023/3/3,文献汇报,27,类暗视阈值反应负响应,暗视阈值反应阈
8、值,2023/3/3,文献汇报,28,讨论,验证电刺激对光感受器细胞形态和功能上的保护延长光感受器的存活期减缓视网膜功能的损失对视网膜形态的保护对整个视网膜均有保护作用(药物注射方法只能作用局部)对内核层的厚度没有显著影响动物模型光感受器变性速度快，可考虑选用其他RP模型，如RPE65-缺陷小鼠作用机理-尚不明确未见明显副作用,2023/3/3,文献汇报,29,学到的知识RP动物模型评价方法不足所用动物模型与人的RP病程特点有差异电刺激模式简单，参数单一,2023/3/3,文献汇报,30,问题,本文采用的大鼠视网膜功能的评价方法是什么？,视网膜电图,分析b波幅度和阈值,暗视阈值反应的幅度和阈值
9、,2023/3/3,文献汇报,31,文献3,2023/3/3,文献汇报,32,问题,经角膜电刺激的电流强度以多少为宜？,2023/3/3,文献汇报,33,方法,病人：3 NAION,5 TON视锐度：0.01-0.2(NAION);HM-0.2(TON)57-75 yrs(NAION);14-71 yrs(TON)4-24个月(NAION);3周-11个月(TON)电极：双极性接触式电极介入过程：0.4%奥布卡因盐酸盐麻醉3%透明质酸+4%硫酸软骨素保护角膜电流：脉宽 10ms;频率 20Hz;电流 300uA-2mA(产生光幻点)时间:30分钟,2023/3/3,文献汇报,34,视功能评价,
10、最佳矫正视力（BCVA）提高:0.3logMAR降低:0.3logMAR闪光临界融合频率（CFF）提高:15%外周视野提高:20%降低:20%测量时间治疗前，治疗后1个月，治疗后3个月安全性角膜上皮细胞、内皮细胞IOP 眼内压，眼底瞳孔，前房,2023/3/3,文献汇报,35,BCVA 结果,2023/3/3,文献汇报,36,2023/3/3,文献汇报,37,等视力线,2023/3/3,文献汇报,38,闪光临界融合频率,2023/3/3,文献汇报,39,安全性,无痛感报告所有病人出现轻微浅层点状角膜损伤，次日全部复原角膜内皮细胞数无明显变化瞳孔大小与形状无变化前房未观察到闪光眼内压未见明显变化
11、眼底检查视网膜或视盘无明显变化,2023/3/3,文献汇报,40,长期效果观察,治疗后3个月内持续改善视功能之后视觉功能出现减退再次治疗后，功能再次改善,2023/3/3,文献汇报,41,讨论,治疗越早，效果越好4周之内的病人治疗效果明显，3个月以外的病人效果不明显不排除自发复原的可能有效电流强度在外周和中央视野激发光幻点的电流强度电刺激的神经保护作用至少3个月经角膜电刺激的安全性,2023/3/3,文献汇报,42,学到的知识电流模式视功能评价方法眼科检查手段不足病人数量过少治疗时间短，没有重复治疗缺少对照组,2023/3/3,文献汇报,43,问题,经角膜电刺激的电流强度以多少为宜？,能够在外
12、周和中央视野激发出光幻点的电流强度,2023/3/3,文献汇报,44,文献4,2023/3/3,文献汇报,45,问题,微电流刺激对哪种黄斑变性更有效？,2023/3/3,文献汇报,46,背景知识,老年性黄斑变性湿性：10%，脉络膜新生血管，引起视网膜出血、水肿及色素上皮细胞的破坏，最终导致疤痕形成，从而视力丧失 干性：90%，黄斑区色素上皮细胞萎缩变性，进展缓慢，可发展为湿性。目前尚无有效的治疗方法,2023/3/3,文献汇报,47,实验,实验对象（湿性组W：27只眼睛;干性组D：7只）病人：15 男性/1女性 W:51-85 yrs D:63-85 yrs电流：800uA,单相波,20min
13、/次,4次/天效果评价：治疗前与治疗后4周最佳矫正视锐度糖尿病视网膜病变早期治疗研究视力分值裂隙灯检查眼底镜自动静态视野荧光素血管造影术病人主观评分,2023/3/3,文献汇报,48,2023/3/3,文献汇报,49,结果,ETDRS分值,静态视野,2023/3/3,文献汇报,50,裂隙灯、眼底镜检查无明显变化1名被试双侧眼睑出现接触性皮炎,主观治疗效果评价,2023/3/3,文献汇报,51,总结与讨论,对ARMD的病理了解有限导致治疗效果有限实验证明：微电流刺激对湿性老年性黄斑变性有效对干性老年性黄斑变性效果不明显微电流对光感受器细胞或色素上皮细胞轻微损伤、或刚刚发生的损伤更加有效,2023/3/3,文献汇报,52,学到的知识老年性黄斑变性经皮微电流刺激方式不足：电流刺激模式需要改进缺少对照组缺少对病人的长期跟踪,2023/3/3,文献汇报,53,问题,微电流刺激对哪种黄斑变性更有效？,湿性老年性黄斑变性,2023/3/3,文献汇报,54,微电流的其他应用,青光眼近视加速伤口愈合缓解疼痛美容,2023/3/3,文献汇报,55,微电流刺激的注意事项,不适宜人群：心率不齐的病人心脏起搏器心脏病人孕妇皮肤有炎症与损伤的地方不宜使用不能与其他电刺激设备同时使用,2023/3/3,文献汇报,56,谢谢,
